Утвержден

и введен в действие

Приказом Федерального

агентства по техническому

регулированию и метрологии

от 14 декабря 2009 г. N 754-ст

Дата введения -

1 сентября 2010 года

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ИЗДЕЛИЯ МЕДИЦИНСКИЕ

ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ МЕДИЦИНСКИХ ИЗДЕЛИЙ

ЧАСТЬ 15

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОДУКТОВ

ДЕГРАДАЦИИ ИЗДЕЛИЙ ИЗ МЕТАЛЛОВ И СПЛАВОВ

MEDICAL DEVICES. BIOLOGICAL EVALUATION OF MEDICAL DEVICES.

PART 15. IDENTIFICATION AND QUANTIFICATION OF DEGRADATION

PRODUCTS FROM METALS AND ALLOYS

ГОСТ Р ИСО 10993-15-2009

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".

Сведения о стандарте

1. Подготовлен Автономной некоммерческой организацией "Институт медико-биологических исследований и технологий" (АНО "ИМБИИТ").

2. Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 422 "Оценка биологического действия медицинских изделий".

3. Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 14 декабря 2009 г. N 754-ст.

4. Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 10993-15:2000 "Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 15. Идентификация и количественное определение продуктов деградации изделий из металлов и сплавов" (ISO 10993-15:2000 "Biological evaluation of medical devices - Part 15: Identification and quantification of degradation products from metals and alloys").

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации, сведения о которых приведены в дополнительном Приложении D.

5. Взамен ГОСТ Р ИСО 10993-15-2001.

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.

Введение

Соблюдение положений стандартов серии ИСО 10993 "Оценка биологического действия медицинских изделий" позволит обеспечить системный подход к исследованию биологического действия медицинских изделий.

Целью этих стандартов не является безусловное закрепление единообразных методов исследований и испытаний за группами однородных медицинских изделий в соответствии с принятой классификацией их по виду и длительности контакта с организмом человека. Поэтому планирование и проведение исследований и испытаний должны осуществлять специалисты, имеющие соответствующую подготовку и опыт в области санитарно-химической, токсикологической и биологической оценок медицинских изделий.

Стандарты серии ИСО 10993 являются руководящими документами для прогнозирования и исследования биологического действия медицинских изделий на стадии выбора материалов, предназначенных для их изготовления, а также для исследований готовых изделий.

В серию ИСО 10993 входят следующие части под общим названием "Оценка биологического действия медицинских изделий":

Часть 1 - Оценка и исследования;

Часть 2 - Требования к обращению с животными;

Часть 3 - Исследования генотоксичности, канцерогенности и токсического действия на репродуктивную функцию;

Часть 4 - Исследование изделий, взаимодействующих с кровью;

Часть 5 - Исследование на цитотоксичность: методы in vitro;

Часть 6 - Исследование местного действия после имплантации;

Часть 7 - Остаточное содержание этиленоксида после стерилизации;

Часть 9 - Основные принципы идентификации и количественного определения потенциальных продуктов деградации;

Часть 10 - Исследования раздражающего и сенсибилизирующего действия;

Часть 11 - Исследование общетоксического действия;

Часть 12 - Приготовление проб и контрольные образцы;

Часть 13 - Идентификация и количественное определение продуктов деградации полимерных медицинских изделий;

Часть 14 - Идентификация и количественное определение продуктов деградации изделий из керамики;

Часть 15 - Идентификация и количественное определение продуктов деградации изделий из металлов и сплавов;

Часть 16 - Моделирование и исследование токсикокинетики продуктов деградации и вымывания;

Часть 17 - Установление пороговых значений для вымываемых веществ;

Часть 18 - Исследование химических свойств материалов;

Часть 19 - Исследование физико-химических, морфологических и топографических свойств материалов;

Часть 20 - Принципы и методы исследования иммунотоксического действия медицинских изделий.

Объектом стандарта являются методы идентификации и количественного определения продуктов деградации металлов и сплавов, которая возникает в результате электрохимического разложения при взаимодействии медицинского изделия при контакте с биологическими средами организма.

В таких биологических средах разные продукты разложения могут взаимодействовать с биологической системой различными путями. Поэтому идентификация и количественная оценка этих продуктов разложения являются важным шагом для оценки биологического действия медицинских изделий.

Данные, получаемые в результате идентификации и количественного определения химического состава продуктов деградации, служат основой для оценки риска и, при необходимости, биологической безопасности медицинских изделий из металлов и сплавов в соответствии с ИСО 10993-1.

Допускается применение других методов, обеспечивающих идентификацию и количественное определение продуктов деградации металлов и сплавов в соответствии с требованиями международных стандартов.

1. Область применения

Настоящий стандарт содержит основные требования к системе методов исследования для количественного анализа продуктов деградации медицинских изделий из металлов и сплавов или соответствующих образцов материалов, готовых для клинического применения.

Настоящий стандарт распространяется только на исследования продуктов деградации, образующихся в результате химических изменений состава медицинских изделий, при использовании методов ускоренной деградации в условиях in vitro. Следует подчеркнуть, что результаты исследований ускоренных испытаний могут не отражать поведения изделия или материалов в организме человека. Для полного описания продуктов деградации необходимо привлекать существующие методики химического анализа.

Настоящий стандарт не распространяется на продукты деградации, образующиеся в результате механических нагрузок.

Примечание - Для описания процессов механической деградации, таких как износостойкость, необходимо при наличии привлекать стандарты для конкретного вида продукции, в которых количественный анализ продуктов деградации проводится с помощью специальных методик.

    Из-за   широкого  спектра   металлических  материалов,  применяемых для

изготовления медицинских изделий, не существует специального аналитического

оборудования    для    количественного    анализа   продуктов   деградации.

                                                        -6

Идентификация  следовых  количеств  элементов  (менее 10  ), содержащихся в

конкретных  металлах и сплавах, не является задачей настоящего стандарта. В

стандарте   не   существует   специальных  требований  к  уровню  продуктов

деградации.

Настоящий стандарт не предназначен для исследования биологической активности продуктов деградации, которые изложены в соответствующих разделах ИСО 10993-1 и ИСО 10993-17.

2. Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на нормативные документы, содержащие положения, которые являются составной частью положений настоящего стандарта. В приведенные нормативные документы нельзя вносить любые исправления и дополнения. Однако допускается возможность использовать последние издания нормативной документации, приведенной ниже. При ссылках на новые положения последних изданий нормативных документов эта нормативная документация должна прилагаться. Члены ИСО и МЭК должны постоянно следить за сохранением юридической силы международных стандартов.

ИСО 3585. Стекло боросиликатное 3.3. Свойства

ИСО 3696. Вода для лабораторных анализов. Характеристика и методы тестирования

ИСО 8044. Коррозия металлов и сплавов. Термины и определения

ИСО 10993-1. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 1. Оценка и исследования

ИСО 10993-9. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 9. Основные принципы идентификации и количественного определения потенциальных продуктов деградации

ИСО 10993-12. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 12. Приготовление проб и стандартные образцы

ИСО 10993-13. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 13. Идентификация и количественное определение продуктов деградации полимерных медицинских изделий

ИСО 10993-14. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 14. Идентификация и количественное определение продуктов деградации изделий из керамики

ИСО 10993-16. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Моделирование и исследование токсикокинетики продуктов деградации и вымывания

3. Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины по ИСО 10993-1, ИСО 10993-9, ИСО 10993-12, ИСО 8044, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1. Сплав: материал, состоящий из металлического элемента с одной или более добавками других металлических и (или) неметаллических элементов.

3.2. Продукты деградации: продукты, которые получаются при электрохимическом распаде или деградации материала.

    3.3.  Пограничный потенциал пассивной области E : потенциал начала тока

                                                   a

коррозии (см. рисунок 1 - здесь и далее рисунки не приводятся).

    3.4.   Электролит:   раствор,   содержащий  ионы,  способные  проводить

электрический ток.

    3.5.   Потенциал   пробоя  E :  критический  потенциал,  выше  которого

                                p

происходит транспассивная коррозия.

3.6. Равновесный потенциал: электродный потенциал, при котором соответствующие электродные реакции термодинамически равновесны.

3.7. Потенциал разомкнутой цепи: потенциал электрода, измеренный по отношению к электроду сравнения или другому электроду при отсутствии тока между ними (см. рис. 1).

4. Методы исследования деградации

4.1. Общие положения

Для идентификации и количественной оценки продуктов деградации металлов и сплавов, входящих в состав медицинских изделий, используют сочетание двух подходов к исследованию деградации металлов и сплавов.

Первый подход заключается в использовании двух электрохимических методов исследования: потенциодинамического и потенциостатического. Второй способ представляет собой иммерсионный метод испытаний. Выбор метода испытаний определяется функциональным назначением медицинского изделия.

    Потенциодинамический    метод    привлекают    для    изучения   общего

электрохимического   поведения  исследуемого  материала  и  для  нахождения

определенных  специфических  точек  (E  и E ) на кривой потенциал/плотность

                                      p    a

тока.   Потенциостатический   метод   применяют  для  активного  разложения

исследуемого  материала при определенном потенциале для получения продуктов

электрохимического разрушения с целью дальнейшего анализа.

Иммерсионный метод применяют для химического разрушения исследуемого материала с целью получения продуктов деградации для дальнейшего анализа.

4.2. Необходимые условия

Скорости реакций электрохимической деградации материала чувствительны к небольшим изменениям условий испытаний, к приборам измерений, состоянию образца и способам его изготовления. Поэтому исследования электрохимической деградации (разрушения) образцов должен проводить квалифицированный персонал в специально оборудованных лабораториях. Техническое обслуживание и калибровку аппаратуры необходимо осуществлять в соответствии с эксплуатационной документацией, утвержденной в установленном порядке.

5. Реагенты и подготовка образцов

5.1. Описание образцов

Состав материала(ов) должен быть внесен в протокол.

5.2. Раствор для испытаний (электролит)

При выборе электролита следует принимать во внимание условия, при которых будет использоваться медицинское изделие. Все химические реагенты должны быть аналитической степени чистоты и растворены в воде аналитической степени чистоты класса 2 в соответствии с ИСО 3696.

Используют следующие электролиты:

- изотонический 0,9%-ный раствор хлорида натрия;

- искусственную слюну;

- искусственную плазму.

Примечание - Составы искусственной слюны и плазмы приведены в Приложении C.

При необходимости можно использовать другие электролиты, если они соответствуют предполагаемому применению медицинского изделия.

В отчете об исследованиях выбор электролита должен быть обоснован. Если используют неизотонический 0,9%-ный раствор хлорида натрия, то в отчете указывают pH применяемого раствора.

5.3. Подготовка образцов

5.3.1. Образцы для испытаний

Чувствительность методов химической деградации зависит от состава материала, обработки материала и окончательной обработки поверхности. Отбор образца, его форма и подготовка поверхности имеют существенное значение. Образцы представляют в том виде, в котором они используются в готовом медицинском изделии.

5.3.2. Отбор образцов

В соответствии с ИСО 10993-12 для испытаний изделий на склонность к химической деградации готовят не менее двух образцов. Если обнаружены значительные отклонения в результатах исследований, выясняют причины отклонений и исследованию подвергают большее число образцов.

Если металлический образец обладает анизотропными свойствами, обусловленными условиями производства, в исследования, связанные с изучением только свойств поверхности, должны быть включены образцы, разрезанные в продольном и поперечном направлениях.

5.3.3. Форма образцов

Для испытаний используют однотипные образцы (прямоугольные или круглые стержни, пластины или образцы с одной свободной поверхностью), изготовленные способом, аналогичным изготовлению медицинского изделия. Образцы, представляющие собой часть конкретного медицинского устройства, могут быть любой формы и любого состояния, однако исследования должны проводиться в тщательно контролируемых условиях, которые фиксируют в протоколе.

Площадь поверхности образца, контактирующая с электролитом, должна быть определена с точностью до 10% общей геометрической площади, для того чтобы обеспечить достоверное и воспроизводимое определение скорости деградации.

5.3.4. Качество поверхности

Так как качество поверхности материала может влиять на его электрохимические свойства, качество поверхности исследуемого образца и готового медицинского изделия должно быть идентично.

Соответствующие характеристики поверхности образца и изделия должны быть представлены в отчете об исследовании. Для сравнения результатов испытаний различных материалов качество поверхности образцов должно быть одинаковым.

6. Электрохимические методы испытаний

6.1. Оборудование

6.1.1. Измерительные ячейки из боросиликатного стекла соответствующих размеров согласно ИСО 3585, термостатированные, контроль температуры с точностью +/- 1 °С.

    6.1.2. Потенциостат  с  диапазоном  измерения   потенциала  в  пределах

                                         -9      -1

+/- 2 В и значениями выходного тока от 10   до 10   А.

                                                                  11

    6.1.3.  Вольтметр  с  высоким входным сопротивлением (более 10   Ом), с

точностью регистрации +/- 1 мВ в диапазоне +/- 2 В.

                                                          -9        -1

    6.1.4.  Амперметр  диапазоном  измерения  тока  от  10    до  10    А и

относительной погрешностью в пределах +/- 1%.

6.1.5. Рабочий электрод (исследуемый образец).

6.1.6. Измерительный электрод, например платина (сетка, пластинка или проволока) или графитовый электрод площадью, не менее чем в 10 раз превышающей площадь рабочего электрода.

6.1.7. Электрод сравнения.

6.1.8. pH-метр с точностью измерения +/- 0,1.

Функциональная схема электрохимической измерительной цепи представлена в приложении A (не приводится). Схематический рисунок электролитической ячейки приведен на рисунке B.1 приложения B (не приводится).

6.2. Подготовка образцов

Образец (рабочий электрод) устанавливают в водонепроницаемый держатель электрода таким образом, чтобы только исследуемая поверхность контактировала с электролитом. Принимают меры предосторожности, для того чтобы между держателем электрода и образцом не было зазора, так как в этом случае возможна щелевая коррозия. Перед исследованием рабочий электрод очищают в этиловом спирте с помощью ультразвука в течение 10 - 15 мин., тщательно промывают водой класса 2 по ИСО 3696 и сразу же помещают в измерительную ячейку.

6.3. Условия проведения измерений

Ячейку заполняют раствором (электролитом). Так как скорость большинства электрохимических реакций зависит от температуры в диапазоне от 10 °С до 50 °С, то измерения рекомендуют проводить в термостатированной ячейке при температуре (37 +/- 1) °С.

    Уровень  кислорода  в электролите снижают путем барботирования раствора

                                                                       -1

азотом или аргоном без примесей кислорода со скоростью 100 куб. см мин.   в

течение не менее 30 мин. до начала измерений. Электролит перемешивают путем

барботирования газом или механически для устранения градиента концентраций.

При   перемешивании  пузырьками  газа  необходимо  избегать  их  адгезии  к

исследуемой поверхности.

При использовании магнитных мешалок необходимо учитывать возможное их взаимодействие с электрохимической ячейкой. Данный эффект должен быть учтен при валидации измерительного оборудования (см. 4.2).

6.4. Потенциодинамические измерения

    Потенциал  разомкнутой  цепи  измеряют  в  течение  не  менее 2 ч после

погружения рабочего электрода. Значение этого потенциала является начальной

точкой  для  потенциодинамических  измерений. Скорость развертки потенциала

                            -1

должна  составлять  1,0 мВ/с  . В тех исследованиях, где скорость изменения

потенциала   оказывает   незначительное   влияние,  время  измерения  можно

                                                               -1

сократить,    увеличивая    скорость    записи   до   10   мВ/с  .   Кривую

потенциал/плотность тока записывают до максимального потенциала 2000 мВ или

                                                -2

максимальной  плотности тока, равной 1,0 мА х см   (что наступит ранее), до

достижения  области  транспассивирования  (рисунок  1).  Чтобы  убедиться в

воспроизводимости   полученных  результатов,  проводят  запись  в  обратном

направлении,  по  крайней мере, до потенциала разомкнутой цепи. Затем вновь

кривую потенциал/плотность тока записывают до значений 2000 мВ или 1,0 мА х

  -2

см  .  Если  кривая  не  воспроизводится, то повторяют цикл от 5 до 10 раз.

Если  после  5  -  10  циклов  не  будет  достигнуто воспроизведение кривой

потенциал/плотность,  необходимо  исследовать  возможные причины, такие как

правильность  проведения  исследования,  состояние  электрода,  особенности

свойств  материала и др. Также кривую потенциал/плотность тока представляют

в  логарифмических  координатах (рисунок 2). Фиксируют потенциал пробоя E ,

                                                                         p

определенный на кривой потенциал/плотность тока на последнем цикле (рисунок

1).

6.5. Потенциостатические измерения

Этот метод позволяет провести качественное и количественное определение растворенных в электролите продуктов деградации образца.

Исследуют образец при постоянном потенциале и регистрируют кривую плотность тока/время.

Значение потенциала пробоя, которое используют для определения продуктов деградации, равно значению потенциала пробоя плюс 50 мВ. В зависимости от изучаемого материала время поляризации составляет 1 или 5 ч.

Продолжительность поляризации и объем используемого электролита вносят в отчет для последующих вычислений.

7. Иммерсионный метод

7.1. Оборудование

7.1.1. Измерительные ячейки (камеры, контейнеры) из боросиликатного стекла соответствующих размеров согласно ИСО 3585, термостатированные, контроль температуры с точностью +/- 1 °С.

7.1.2. pH-метр с точностью измерения +/- 0,1.

7.2. Подготовка образцов

Исследуемый образец помещается в отдельную измерительную ячейку. Размер измерительной ячейки должен быть таким, чтобы объем электролита был не менее 1 мл на 1 кв. см поверхности образца и полностью покрывал его. Чтобы получать достоверные результаты, электролит приготавливают в асептических условиях.

Площадь поверхности образца и объем электролита должны быть достаточны для проведения необходимых анализов (см. раздел 8).

Обращают особое внимание на то, чтобы образец нигде не соприкасался со стеклянной поверхностью, за исключением минимальной линии или точки, необходимой для поддержки. При небольшом образце требуемое соотношение площадь поверхности/объем может не достигаться. В этом случае исследуемый образец составляют из двух или более частей, и эти части не должны касаться друг друга.

7.3. Проведение иммерсионного измерения

Измеряют pH электролита в измерительной ячейке с исследуемым образцом до начала испытаний. Затем измерительную ячейку плотно закрывают для предотвращения испарения растворителя и инкубируют при температуре (37 +/- 1) °С в течение (7,0 + 0,1) суток. После окончания инкубации образец вынимают и измеряют pH электролита.

8. Анализ полученных результатов

С использованием оптической микроскопии исследуют состояние поверхности образца при небольших увеличениях (более 50х) и записывают в отчете существенные изменения качества поверхности. При необходимости возможен более детальный анализ поверхности.

    После  каждого  эксперимента осуществляют качественный и количественный

анализы   электролита,  используя  подходящие  по  чувствительности  методы

                                 -6

(например,  не  менее  1,0  х  10    при  атомно-абсорбционном  методе  или

масс-спектроскопии).   Регистрируют   только  те  количественные  изменения

состава  электролита,  которые  выше  минимального уровня определения. Если

биологически   опасные   компоненты   количественно   не  определяются,  то

используются  другие  аналитические  методы. Дополнительно регистрируют все

вещества,  осажденные на измерительном электроде. Кроме того, составляющие,

опасные  для  здоровья  человека,  регистрируют  в  отчете  в установленном

порядке.

9. Отчет об исследованиях

Отчет об исследованиях должен содержать:

- полную идентификацию исследуемого образца, включая химический состав;

- отношение площади поверхности рабочего электрода к объему электролита;

- состав, объем и pH (с точностью +/- 0,1) электролита, тип электрода сравнения для электрохимических измерений;

- температуру электролита;

- кривую(ые) плотности тока/потенциала, желательно в логарифмических координатах;

- потенциал разомкнутой цепи;

    - потенциал пробоя E  и плотность тока при потенциале пробоя;

                        p

- скорость развертки (изменения) потенциала;

- кривую(ые) плотность тока/время и общее время измерений;

- краткий анализ кривых (гистерезис, пики и т.д.);

- описание каких-либо значительных изменений поверхности образца и (или) электролита;

- результаты анализа продуктов деградации в электролите, включая скорость деградации, мкг/кв. см/ч для электрохимического теста или мкг/кв. см/7 сут. для иммерсионного теста;

- метод химического анализа электролита;

- тип электрода сравнения (значения потенциалов должны быть отнесены к нормальному водородному потенциалу);

- фамилию, инициалы;

- дату проведения исследования;

- подпись исследователя.

Приложение C

(справочное)

СОСТАВЫ ИСКУССТВЕННОЙ СЛЮНЫ И ИСКУССТВЕННОЙ ПЛАЗМЫ

КАК ЭЛЕКТРОЛИТОВ ДЛЯ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ

C.1. Общие положения

Все химические реагенты должны быть аналитической степени чистоты, растворение должно проводиться в воде класса 2 по ИСО 3696.

Следует предпринять меры по предотвращению образования осадка.

C.2. Искусственная слюна (см. [2])

    Na HPO                                             0,260 г/л

      2   4

    NaCl                                               0,700 г/л

    KSCN                                               0,330 г/л

    KH PO                                              0,200 г/л

      2  4

    NaHCO                                              1,500 г/л

         3

    KCl                                                1,200 г/л

C.3. Искусственная плазма (см. [2])

    NaCl                                               6,800 г/л

    CaCl                                               0,200 г/л

        2

    KCl                                                0,400 г/л

    MgSO                                               0,100 г/л

        4

    NaHCO                                              2,200 г/л

         3

    Na HPO                                             0,126 г/л

      2   4

    NaH PO                                             0,026 г/л

       2  4

Приложение D

(справочное)

СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ ССЫЛОЧНЫМ МЕЖДУНАРОДНЫМ СТАНДАРТАМ

Таблица D.1

БИБЛИОГРАФИЯ

[1] ASTM G 5-94 Reference Test Method for Making Potentiostatic and

    Potentiodynamic Anodic Polarization Measurements

[2] AFNOR NF 91-141G 5-94 Biodegradability of dental metal alloys -

    Standardization of electrochemical test

[3] ИСО 10993-17. Оценка биологического действия медицинских изделий.

    Часть 17. Установление пороговых значений для вымываемых веществ

    ISO 10993-17 Biological evaluation of medical devices - Part 17:

    Establishment of allowable limits for leachable substances using

    health-based risk assessment

[4] ИСО 10271. Материалы металлические стоматологические. Методы испытания

    на коррозионную стойкость

    ISO 10271 Dental metallic materials - Corrosion test methods