"Методические указания по определению гербицидов - производных тиокарбаминовой кислоты (вернам, ронит, сутан, тиллам, эптам, ялан) в воде, растительном материале, биосубстратах и воздухе газохроматографическим методом" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

5 июня 1978 г. N 1877-78

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГЕРБИЦИДОВ - ПРОИЗВОДНЫХ

ТИОКАРБАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ (ВЕРНАМ, РОНИТ, СУТАН, ТИЛЛАМ,

ЭПТАМ, ЯЛАН) В ВОДЕ, РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ, БИОСУБСТРАТАХ

И ВОЗДУХЕ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны: М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС), И.Ш. Кофманом (ИФР АН УССР); В.И. Кофановым (ИКХиХВ АН УССР); Л.Г. Александровой (Институт гигиены труда и профзаболеваний).

Краткая характеристика препаратов приведена в таблице 92.

Таблица 92

КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕРБИЦИДОВ ГРУППЫ ТИОКАРБАМАТОВ

┌──────┬────────┬─────────┬───────┬───────────┬────────────────────┬──────┐

│Гер- │Общепри-│ Брутто- │Молеку-│ Т. кип., │ Растворимость │Давле-│

│бицид │нятое │ формула │лярная │ °C ├─────┬──────────────┤ние │

│ │название│ │масса │ │ в │в органических│пара │

│ │ │ │ │ │воде,│растворителях │при │

│ │ │ │ │ │мг/л │ │25 °C,│

│ │ │ │ │ │ │ │Па │

├──────┼────────┼─────────┼───────┼───────────┼─────┼──────────────┼──────┤

│Эптам │ЭПТК │C H NOS │189,3 │127 │375 │Ацетон, │4,5 │

│ │ │ 9 19 │ │(2666,4 Па)│ │бензол, │ │

│ │ │ │ │ │ │этанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │метанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │гексан, │ │

│ │ │ │ │ │ │хлороформ │ │

│Вернам│Вернолят│C H NOS│203,3 │150 │90 │Бензол, │1,39 │

│ │ │ 10 21 │ │(3999,7 Па)│ │метанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │гексан, │ │

│ │ │ │ │ │ │этанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │хлороформ │ │

│Ронит │Циклоат │C H NOS│215,4 │145 │75 │Ацетон, │0,83 │

│ │ │ 11 21 │ │(1333,2 Па)│ │бензол, │ │

│ │ │ │ │ │ │метанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │этанол, гексан│ │

│Сутан │Бутилат │C H NOS│217,4 │13 │46 │ДХЭ, метанол, │0,17 │

│ │ │ 11 25 │ │(1333,2 Па)│ │гексан, этанол│ │

│Тиллам│Пебулат │C H NOS│203,3 │142 │60 │Бензол, │4,7 │

│ │ │ 10 22 │ │(2799,8 Па)│ │метанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │гексан, │ │

│ │ │ │ │ │ │этанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │хлороформ │ │

│Ялан │Молинат │C H NOS │187,3 │202 │880 │Ацетон, │0,75 │

│ │ │ 9 17 │ │(1333,2 Па)│ │этанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │метанол, │ │

│ │ │ │ │ │ │хлороформ │ │

└──────┴────────┴─────────┴───────┴───────────┴─────┴──────────────┴──────┘

Принцип метода. Метод основан на извлечении пестицидов путем перегонки с водяным паром, экстракции гексаном с последующим определением микроколичеств тиокарбаматов (вернам, ронит, сутан, тиллам, эптам, ялан) с применением ТИД.

Метрологическая характеристика метода. Предел определения тиокарбаматов в воде, почве, растениях 0,02 мг/кг; воздухе - 0,02 - 0,2 мг/куб. м; биосубстратах: ткани внутренних органов - 2 - 10 мг%; кровь - 4 - 20; моча - 0,4 мг%. Среднее значение определения в почве, воде, растительном материале 85 +/- 8,5%; воздухе 82 +/- 9,8%.

Реактивы и растворы. Этанол. н-Гексан ч. Сульфат натрия безводный, х.ч.

Фосфатно-щелочная буферная смесь, pH 6,0 - 8,0 (смешивают 50 мл 0,1 М

раствора KH PO с 0,1 н раствором NaOH и доводят объем до 100 мл).

2 4

Стандартные растворы тиокарбаматов концентрацией 1 - 5 мкг/мл в этаноле.

Фильтры АФА-ХА-18. Наполнители для хроматографических колонок: I - 5%

ДС-550 (для колонки размером 1 м x 3 мм), либо II - 5% XE-60 (для колонки

размером 2 м x 3 мм), либо III - 5% SE-30 (для колонки размером 1 м x 3

мм), нанесенные на хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм). Колонка IV со

смешанной насадкой 1:1 по массе - хроматон N-AW-DMCS с 5% SE-30 и хроматон

N-AW-DMCS с 5% XE-60 (для колонки размером 2 м x 3 мм). Газы (азот,

водород, воздух) в баллонах с редукторами. Парафин медицинский для

предотвращения вспенивания при перегонке.

Приборы и посуда. Газовый хроматограф серии "Цвет-100" с ТИД. Насадка для перегонки с водяным паром. Колбы круглодонные на 200 - 500 мл. Испаритель ротационный. Гомогенизатор для биосред. Устройство для отбора проб воздуха. Поглотители с пористой пластинкой N 1 (для отбора проб воздуха). Колонки стеклянные для ГЖХ длиной 1 и 2 м и внутренним диаметром 3 мм. Бани водяные и электроплитки. Колбы грушевидные (концентраторы) вместимостью 100 мл. Пробирки градуированные с пробками на шлифах, вместимостью 10 мл. Секундомер. Лупа измерительная.

Ход анализа. Пробу воды 200 мл помещают в круглодонную колбу, которую присоединяют к отгонному аппарату. Проводят перегонку с водяным паром в течение 1 ч, собирая около 75 мл дистиллята. Водную фазу экстрагируют трижды по 30 мл гексана. Объединенный гексановый экстракт осушают над безводным сульфатом натрия и отгоняют на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C до объема 3 - 4 мл, остаток количественно переносят в градуированную пробирку на 10 мл. К полученному раствору прибавляют 1 мл раствора внутреннего стандарта в этаноле и объем доводят до 1 мл током воздуха. Аликвотную часть полученного раствора хроматографируют. Условия хроматографирования приведены в таблице 93.

Таблица 93

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ ТИОКАРБАМИНОВЫХ ГЕРБИЦИДОВ

НА РАЗЛИЧНЫХ КОЛОНКАХ. НОСИТЕЛЬ ХРОМАТОН N-AW-DTCS

(0,16 - 0,20 ММ)

┌─────────────────────────┬────────────────┬───────────────┬────────────────┬───────────────┐

│ Параметры │ Колонка I │ Колонка II │ Колонка III │ Колонка IV │

├─────────────────────────┼────────────────┼───────────────┼────────────────┼───────────────┤

│Температура испарителя, │200 │200 │210 │210 │

│°C │ │ │ │ │

│Температура термостата │ │ │ │ │

│колонок, °C: │ │ │ │ │

│ в изотермическом режиме│- │140 │160 │- │

│ в режиме │140 - 160 │- │- │140 - 170 │

│программирования │ │ │ │ │

│(рис. 8 - не приводится) │ │ │ │ │

│Расход газа-носителя │20 │20 │20 │20 │

│(гелий или азот особой │ │ │ │ │

│чистоты), мл/мин. │ │ │ │ │

│Расход водорода с после- │15 │15 │15 │15 │

│дующим после зажигания │ │ │ │ │

│снижением расхода до │ │ │ │ │

│значения фонового тока, │ │ │ │ │

│равного 50 - 60 Па, │ │ │ │ │

│мл/мин. │ │ │ │ │

│Расход воздуха, мл/мин. │400 │400 │200 │200 │

│Скорость протяжки ленты │200 │200 │200 │200 │

│регистратора, мм/ч │ │ │ │ │

│Рабочая шкала усилителя │ -12│ -12│ -12│ -12│

│ИМТ-05 для всех условий │50 - 100 x 10 │5 - 100 x 10 │50 - 100 x 10 │5 - 100 x 10 │

│разделения, А │ │ │ │ │

│Хроматографируемый объем,│2 - 10 │2 - 10 │2 - 5 │2 - 5 │

│мкл │ │ │ │ │

│Предел обнаружения, нг │2 │2 │2 │2 │

│Линейный динамический │2 - 200 │2 - 200 │2 - 200 │2 - 200 │

│диапазон, нг │ │ │ │ │

│Время удерживания: │ │ │ │ │

│ эптам │4 мин. 30 с │4 мин. │- │4 мин. 45 с │

│ сутан │5 мин. 48 с │4 мин. 48 с │1 мин. 10 с │5 мин. 48 с │

│ вернам │6 мин. 45 с │5 мин. 41 с │1 мин. 30 с │6 мин. 15 с │

│ тиллам │7 мин. 17 с │6 мин. │1 мин. 35 с │11 мин. 30 с │

│ ялан │11 мин. 52 с │11 мин. 2 с │2 мин. 40 с │12 мин. 30 с │

│ ронит │15 мин. 54 с │14 мин. 29 с │4 мин. 50 с │15 мин. 10 с │

│Размеры колонок │1 м x 3 мм │2 м x 3 мм │1 м x 3 мм │2 м x 3 мм │

└─────────────────────────┴────────────────┴───────────────┴────────────────┴───────────────┘

Примечание. Неподвижную фазу 5% SE-30 применяют для быстрого разделения смесей: вернам, ялан, ронит или сутан, ялан, ронит.

Пробу почвы 100 г известной влажности просеивают через сито с отверстиями 1 мм, помещают в круглодонную колбу и заливают 200 мл воды. Колбу присоединяют к отгонному аппарату и ведут определение, подобно описанному выше для анализа проб воды.

Тщательно измельченную пробу (100 г) растительного материала помещают в круглодонную колбу отгонного аппарата, прибавляют 200 мл воды и 0,5 - 1,0 г парафина. Дальнейший ход анализа аналогичен описанному выше для проб воды.

Исследуемый воздух (10 л), содержащий пестицид в виде аэрозоля, аспирируют через фильтр АФА-ХА-18 со скоростью до 5 л/мин.

Исследуемый воздух (10 - 20 л), содержащий пестицид в виде паров, протягивают через жидкий поглотитель (8 - 10 мл этанола), помещенный в баню со льдом, со скоростью до 0,5 л/мин. После отбора пробы воздуха фильтры обрабатывают 20 мл смеси этанол-вода (1:1). Через 30 мин. экстракты сливают в круглодонную колбу отгонного аппарата. Длительность кипячения до 30 мин. Далее определение ведут так, как описано для воды. При анализе паров пестицидов измеряют объем поглотительного раствора, концентрируют на ротационном испарителе до объема 3 - 4 мл и далее поступают так, как описано выше.

Навеску тканей внутренних органов (печень, почки, легкие, сердце, селезенка) 1 - 2 г измельчают и помещают в гомогенизатор, тщательно растирают, дважды приливают фосфатно-щелочной буфер (порциями по 25 мл) и количественно переносят в круглодонную колбу отгонного аппарата. Кипятят 15 - 20 мин. Далее поступают так, как описано для анализа воды.

Пробу цельной крови (0,5 - 1 мл) вносят в круглодонную колбу для отгона, приливают 1 мл фосфатно-щелочного буфера и 20 мл воды. Колбу присоединяют к отгонному прибору. Далее поступают так, как описано выше.

К 10 мл пробы мочи приливают 20 мл фосфатно-щелочного буфера и 20 мл воды. Смесь помещают в круглодонную колбу для отгонки и далее поступают так, как описано для анализа воды.

Количественная оценка хроматограмм. В связи с тем, что, как правило, на посевах сельскохозяйственных культур не применяют смеси указанных тиокарбаматов, для количественных расчетов можно использовать метод внутреннего стандарта, в качестве которого может быть использован любой из изученных гербицидов в случае, если он имеет время удерживания, близкое к определяемому соединению. Так, для определения эптама, сутана, тиллама и ронита в качестве внутреннего стандарта может быть использован ялан. Для определения ялана в качестве внутреннего стандарта подходит тиллам, а для вернама - эптам.

Обработка результатов анализа. Для определения количества препарата в определяемом образце (X, мг/кг) используют формулу:

H CV

пр

X = K -----,

H P

ст

где:

H , H - высоты пиков соответственно определяемого вещества и

пр ст

внутреннего стандарта, мм;

C - концентрация рабочего раствора внутреннего стандарта, мкг/мл;

V - объем добавленного рабочего раствора внутреннего стандарта, мл;

P - навеска пробы, г;

K - относительный калибровочный коэффициент, рассчитываемый по формуле:

ст

K = ---,

пр

где K , K рассчитывают по формуле:

ст пр

H H H

1 1 2 n

K , K = - (---- + ---- + ... + ----),

ст пр n C V C V C V

1 1 2 2 n n

где:

n - число вводимых проб стандартных растворов;

H - высоты пиков пестицидов, мм;

1, 2...n

C - концентрации стандартных растворов, мкг/мл;

1, 2...n

V - объем вводимых стандартных растворов, мкл.

1, 2...n

Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила работы с токсичными пестицидами и органическими растворителями.