Утверждены

Минздравом СССР

5 июня 1978 г. N 1872-78

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

НА МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИХОТЕЦИНА В ВОЗДУХЕ

    Краткая  характеристика  препарата.  Трихотецин  -  антибиотик

фунгицидного  действия,  продуцируемый грибом Trichotecium roseum.

Применяется  для  защиты  огурца  от  поражения  мучнистой  росой.

Представляет  собой  изокротиловый  эфир кетоспирта трихотеколона.

Брутто-формула  C  H  O . Молекулярная масса 333,5. Т. пл. 118 °C.

                 19 24 5

В  воде  практически  нерастворим,  хорошо  растворяется в спирте,

ацетоне,       диметилформамиде,      хлороформе.      Выпускается

микробиологической промышленностью в форме 1-процентного  дуста  и

10-процентного  смачивающегося  порошка  с  наполнителем каолином.

ОБУВ трихотецина в воздухе рабочей зоны 0,2 мг/куб. м.

Принцип метода. Метод основан на хроматографии трихотецина в тонком слое силикагеля. Подвижный растворитель - смесь дихлорэтана и ацетона в соотношении 9:1. Зона локализации антибиотика обнаруживается с помощью ультрахемископа.

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел обнаружения 0,5 мкг в анализируемом объеме. Погрешность определения +/- 15%. Диапазон измеряемых концентраций 0,1 - 4,0 мг/куб. м. Определению мешают вещества, поглощающие УФ-свет при длине волны 254 нм.

    Реактивы  и  материалы,  приборы  и  посуда.  Этиловый  спирт.

Ацетон. Дихлорэтан х.ч. Стандартный  раствор  трихотецина  1 мг/10

мл,   приготовленный   на   хлороформе.   Хлороформ    х.ч.   Весы

аналитические. Воронки  делительные. Испаритель ротационный. Колбы

грушевидные   на   25   мл.   Камера   для    хроматографирования.

Микропипетки. Пластинки "Силуфол"   УФ   .   Палочки   стеклянные.

                                      254

Ультрахемископ  типа  "Хроматоскоп"   либо   другой   аналогичный.

Цилиндры мерные.

Отбор проб воздуха. Пробу воздуха отбирают на фильтры АФА-ХП-18 с помощью электроаспиратора со скоростью 10 л/мин. в течение 30 мин.

Ход анализа. Фильтры с отобранной пробой помещают в делительную воронку на 25 мл, заливают 5 - 10 мл этилового спирта и экстрагируют, встряхивая 1 мин. Экстракт сливают в грушевидную колбу на 25 мл для отгонки и проводят повторную экстракцию. Спиртовые экстракты объединяют и упаривают на ротационном испарителе при слабом разрежении досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5 - 1,0 мл хлороформа (в зависимости от предполагаемого количества трихотецина) и проводят хроматографическое определение антибиотика.

    На предварительно промытую ацетоном и  высушенную  на  воздухе

пластинку "Силуфол" УФ    размером 70 x 50 мм на расстоянии 1,5 см

                      254

от  нижнего  края  пластинки  и  1,0  см от вертикального края при

помощи   микропипетки   наносят   3  пробы  стандартных  растворов

одинакового   объема.  В  промежутках  между  пятнами  стандартных

растворов  наносят  такой же объем исследуемой пробы. Размер пятна

на линии старта (диаметр) 2 - 4 мм.

Пластинку помещают под углом в хроматографическую камеру с подвижной системой, состоящей из дихлорэтана с ацетоном в соотношении 9:1. Камеру предварительно выдерживают в течение 15 - 20 мин. в закрытом состоянии для насыщения парами растворителей.

    После  развития  хроматограммы пластинку вынимают  из  камеры,

высушивают  на  воздухе  и  просматривают  в  УФ-свете  с  помощью

ультрахемископа. Трихотецин обнаруживается на хроматограмме в виде

малинового пятна (R  0,36 +/- 0,04).

                   f

Количественное определение проводят путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по размеру к площади пробы. Площадь пятен измеряют планиметром.

Количество трихотецина в воздухе (X, мг/куб. м) рассчитывают по формуле:

                                  CS

                                    x

                              X = ----,

                                  S V

                                   0 o

    где:

    C - количество трихотецина в стандарте, мкг;

    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;

     x

    S  - площадь пятна стандарта, кв. мм;

     0

    V  -  объем  пропущенного  воздуха, приведенный к атмосферному

     o

давлению 101,3 Па и температуре 20 °C, куб. м.

Требования безопасности. Соблюдаются меры безопасности, рекомендуемые для работы с химическими реактивами.