Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6234-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТЕФЛУБЕНЗУРОНА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Торговое наименование: Номолт.

Фирма: Цианамид (США).

Действующее вещество: тефлубензурон - 1-(3-5-дихлор-2,4-дифторфенил)-3-(2,6-дифторбензоил)-мочевина.

      ---F              F---Cl

    //   \\            //   \\

    \ ___ /--CONHCONH--\ ___ /F

      ---F               ---Cl

    Эмпирическая формула: C  H Cl F N O .

                           14 6  2 4 2 2

Молекулярная масса: 384.

Химически чистое соединение представляет собой белый кристаллический порошок без особого запаха с температурой плавления 222,5 °C. Хорошо растворим в органических растворителях (хлороформ, ацетон, бензол и др.), растворимость в воде ограничена (0,02 мг/л). Стабилен по отношению к действию света и температуре. В воздухе может находиться в виде аэрозоля.

ОБУВ номолта в воздухе рабочей зоны не установлен.

Краткая токсикологическая характеристика

Малотоксичен.

Острая оральная токсичность.

    ЛД   для крыс и мышей - более 5000 мг/кг.

      50

    Острая дермальная токсичность.

    ЛД   для крыс - более 2000 мг/кг.

      50

Не раздражает кожу и глаза.

Область применения препарата

Номолт используется в качестве регулятора роста насекомых против личинок чешуекрылых, жесткокрылых и двукрылых. Рекомендован к применению на яблоне, виноградной лозе, персике, картофеле, сое, рисе, пшенице, хлопчатнике, кукурузе, овощных культурах.

Изготовляется в виде концентратов суспензий (50 и 150 г д.в./га) и концентрата эмульсии (50 г д.в./л).

2. Методика измерения концентраций тефлубензурона

в воздухе рабочей зоны

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Определение основано на концентрировании аэрозолей тефлубензурона из воздуха на фильтр "синяя лента" с последующей идентификацией и количественным определением с помощью газожидкостной (ГЖХ) или тонкослойной (ТСХ) хроматографии.

2.1.2. Избирательность методики

Определению номолта в предлагаемых условиях не мешают близкие по структуре и области применения такие соединения, как ДДТ, ДДД, ДДЕ, ГХЦГ, талстар, каскад.

2.1.3. Метрологическая характеристика методики

(n = 25, p = 0,95)

2.2. Реактивы, растворы, материалы

Тефлубензурон хч.

Хлороформ хч, ГОСТ 20215-74.

н-Гексан хч, ГОСТ 6-09-3875-78.

Ацетон хч, ГОСТ 2603-79.

Спирт этиловый хч, ТУ 6-1710-77.

Натрия сульфат безводный ч, ГОСТ 4166-76.

Соляная кислота концентрированная хч, ГОСТ 3118-77, 12-процентный водный раствор (по объему).

Калий марганцовокислый хч, ГОСТ 20490-76, 3-процентный водный раствор.

Калий йодистый хч, ГОСТ 4232-74, 1-процентный водный раствор.

Крахмал водорастворимый хч, ГОСТ 10163-76, 3-процентный водный раствор.

Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77, предварительно промытые смесью хлороформ - ацетон (1:1) и высушенные.

Пластинки хроматографические "Силуфол" UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15 см.

Азот особой чистоты газообразный в баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74.

Хроматон N-AW силанизированный ГМДС с 5% XE-60 (0,16 - 0,20 мм).

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации.

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Ротационный вакуумный испаритель с набором колб типа ИР-1М (2М), ТУ 25-11-917-74.

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.

Фильтродержатели (патроны).

Весы аналитические.

Хроматографическая колонка стеклянная длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм.

Секундомер, ГОСТ 5072-72.

Микропипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.

Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы конические на 100 мл, ГОСТ 20292-82.

Воронки химические, ГОСТ 29932-74.

Цилиндры мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пробирки мерные емкостью 10 мл с ценой деления 0,1 мл, ГОСТ 1770-74.

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-79.

2.4. Отбор проб

Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента" в течение 5 минут. (Для определения на уровне чувствительности методики необходимо отобрать 25 л воздуха.) Пробы анализировать сразу.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Приготовление проявляющего реактива для ТСХ-определения

Проявляющий реактив для ТСХ-определения: хлорирование - йодид калия - крахмал.

Раствор для хлорирования. Смешивают равные объемы 3% раствора перманганата калия и 12% раствора соляной кислоты. Готовят перед употреблением в количествах, необходимых для разового пользования.

Проявляющий реагент: а) 1% раствор йодистого калия; б) 3% раствор крахмала; перед употреблением смешать растворы а), б) и этиловый спирт в соотношении 2,5:2,5:1.

2.5.2. Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор N 1 с содержанием тефлубензурона 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг вещества в ацетоне в мерной колбе на 100 мл.

Растворы, содержащие 20, 10, 1 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением раствора N 1. Хранят в холодильнике не более месяца.

2.5.3. Построение градуировочного графика

Для количественного определения тефлубензурона методом ГЖХ строят градуировочный график методом абсолютной калибровки. Готовят серию стандартных растворов с содержанием 1 - 20 мкг/мл в ацетоне, 1 мкл каждого разведения вводят в хроматограф. По полученным данным строят график зависимости интенсивности пика от количества тефлубензурона.

Для определения тефлубензурона с помощью ТСХ применяли метод оценки по размерам пятна. Площадь пятен известных количеств стандартных растворов измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и строят график зависимости "площадь пятна - количество" в пределах линейности детектирования (1 - 10 мкг).

2.6. Описание определения

Фильтр переносят в коническую колбу и экстрагируют тефлубензурон хлороформом трижды по 15 - 20 мл, периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,1 - 0,2 мл. Растворитель удаляют на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее анализируют методами ГЖХ и ТСХ.

    Условия  ГЖХ-анализа  следующие:   хроматограф,  снабженный  детектором

постоянной  скорости рекомбинации, включают в соответствии с инструкцией на

следующий   режим:  температура  термостата  колонок - 180 °C;  температура

испарителя  -  230  °C;  температура детектора - 190  °C;  скорость  потока

газа-носителя  (азота)  -  60 мл/мин.;  скорость  диаграммной  ленты  - 600

                                          -12

мм/час, рабочая шкала  электрометра 5 x 10    А; хроматографируемый объем -

1 мкл; нижний предел обнаружения - 1 нг.  Абсолютное  время  удерживания на

колонке с 5% XE-60 - 4 минуты 30 секунд.

Количественную оценку тефлубензурона проводят с помощью калибровочного графика. На полученной хроматограмме измеряют интенсивность пиков и по калибровочному графику определяют количество тефлубензурона.

Для определения тефлубензурона с помощью ТСХ экстракт после анализа методом ГЖХ концентрируют до объема 0,1 - 0,2 мл и количественно наносят на хроматографическую пластинку "Силуфол". Справа и слева от пробы наносят известные количества стандартного раствора тефлубензурона в пределах диапазона линейности.

    Хроматографирование  проводят  в  системе гексан - ацетон в соотношении

5:3.  После поднятия фронта растворителя на 14 см пластинку проветривают на

воздухе до полного удаления растворителей. После этого пластинку подвергают

облучению  УФ-светом  в  течение 30 - 35 минут, а затем помещают в камеру с

хлорирующей  смесью на 3 минуты. После этого оставляют пластинку на воздухе

до  полного  удаления  запаха  хлора  (около  15  минут)  и обрабатывают из

пульверизатора   проявляющим   реагентом  (йод-крахмальный  реактив).  Зоны

локализации  номолта  обнаруживаются  в  виде  синих пятен на светлом фоне.

Величина  R   составляет  0,4  +/-  0,02.  Линейный  диапазон  измерения на

           f

пластинке  составляет  1,0  -  10,0  мкг. Если содержание препарата в пробе

превышает  верхнюю  границу диапазона линейности (10 мкг), то для нанесения

на пластинку необходимо брать аликвотную часть экстракта.

На полученной хроматограмме измеряют интенсивность пятен (по окраске и площади) с помощью миллиметровой бумаги и по калибровочному графику определяют содержание тефлубензурона.

2.7. Обработка результатов анализа

Концентрацию (C, мг/куб. м) тефлубензурона вычисляют по формуле:

                                    a x V

                               C = --------,

                                   V  x V

                                    1    20

    где:

    a - количество номолта, найденное по калибровочному графику, мкг;

    V - общий объем анализируемого раствора, мл;

    V  - хроматографируемый объем пробы, мл;

     1

    V   - объем анализируемого воздуха, приведенный к стандартным условиям,

     20

л.

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81).