Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6220-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ

БИФЕНТРИНА (ТАЛСТАРА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

       CH   CH

         3\/  3        /\\

          /\          /  \\

         /  \     O  ││   │                          C  H  O F Cl.

        C----\   / \ ││   │                           22 22 2 3

        ││    \C/   \/\  //\  /\\

        ││     \\   CH \//  \/  \\                   М.м. 422.

        ││      O     2 │   ││   │

        C               │   ││   │

       / \              CH   \  //

    F C   Cl              3   \//

     3

    Бифентрин   (талстар,  бифенат) -  (2-метил-/1,1'-бифенил/-3-ил)-метил-

3(2-хлор-3,3,3-трифлуро-1-пропенил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат.

    Химически  чистое  соединение  представляет собой белый кристаллический

                                                                  -7

порошок  с температурой плавления 51 - 66 °C, давление пара 1 x 10   Па при

25   °C.   Хорошо   растворим   в  большинстве  органических  растворителей

(хлороформ,  ацетон,  эфир,  хлористый метилен), слабо растворим в гептане,

метаноле, воде.

В воздухе рабочей зоны может находиться в виде аэрозоля.

ОБУВ талстара в воздухе рабочей зоны - 0,015 мг/куб. м.

1. Характеристика метода

Метод основан на использовании газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов или тонкослойной хроматографии.

Отбор проб проводится с концентрированием на бумажном фильтре "синяя лента".

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,1 нг (ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).

Нижний предел измерения в воздухе 0,001 мг/куб. м (ГЖХ), 0,01 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 100 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций 0,001 - 0,1 мг/куб. м (ГЖХ), 0,01 - 0,1 мг/куб. м (ТСХ).

Измерению не мешают другие пестициды, в том числе ДДТ, ГХЦГ, хостаквик, пиретроиды.

Суммарная погрешность не превышает +/- 20,5% (ГЖХ) и +/- 25% (ТСХ).

2. Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф, снабженный детектором по захвату электронов (ДЭЗ).

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Ротационный вакуумный испаритель с набором колб типа ИР-1М (2М), ТУ 25-11-317-74.

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.

Фильтродержатель (патроны).

Весы аналитические.

Хроматографическая стеклянная колонка длиною 1 м и внутренним диаметром 3 мм.

Секундомер, ГОСТ 5072-72.

Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1, 2, 5 мл.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 100 мл.

Воронки химические, ГОСТ 25336-82.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 10 мл с ценой деления 0,1 мл.

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.

Эксикатор, ГОСТ 25336-82.

2.1. Реактивы, растворы, материалы

Талстар хч.

Хлороформ хч, ГОСТ 20015-74.

н-Гексан хч, ГОСТ 6-09-3875-78.

Ацетон хч, ГОСТ 2603-79.

Спирт этиловый хч, ГОСТ 5962-81.

Натрия сульфат безводный ч, ГОСТ 4166-76.

Йод кристаллический чда, ГОСТ 4139-79.

Крахмал водорастворимый хч, ГОСТ 10163-76, 1-процентный водный раствор.

Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", ТУ 6-09-1673-77, предварительно промытые смесью хлороформ - ацетон (1:1) и высушенные.

Пластинки хроматографические "Силуфол" UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15 см.

Азот особой чистоты газообразный в баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74.

Хроматон N-AW силанизированный ГМДС с 5% SE-30 (0,16 - 0,20 мм).

Стандартный раствор в ацетоне с содержанием талстара 100 мкг/мл (N 1); растворы, содержащие 10, 1, 0,1 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением раствора N 1. Хранят в холодильнике не более 2-х недель.

2.2. Отбор проб

Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента" в течение 5 минут. (Для определения на уровне чувствительности методики необходимо отобрать 25 л воздуха.)

Пробы анализировать сразу.

2.3. Подготовка к измерению

2.3.1. Градуировочный график

Для количественного определения талстара методом ГЖХ строят градуировочный график. Градуировку прибора осуществляют методом абсолютной калибровки. Для этого готовят серию стандартных растворов с содержанием 0,1 - 10 мкг/мл в ацетоне, 1 мкл каждого разведения вводят в хроматограф. По полученным данным строят градуировочный график зависимости высоты пика в мм от количества бифентрина (талстара) в нг.

Для определения талстара с помощью ТСХ применяется метод оценки по размерам пятна. Площадь пятен известных количеств стандартных растворов измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и строят график зависимости "площадь пятна - количество" в пределах диапазона линейности (1 - 10 мкг).

2.3.2. Проведение измерения

Фильтр переносят в коническую колбу и экстрагируют бифентрин хлороформом трижды по 15 - 20 мл, периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,1 - 0,2 мл. Растворитель удаляют на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее анализируют методами ГЖХ и ТСХ.

    Условия  ГЖХ-анализа  следующие:  хроматограф,  снабженный   детектором

постоянной  скорости рекомбинации, включают в соответствии с инструкцией на

следующий   режим:  температура  термостата  колонок - 210 °C;  температура

испарителя - 250   °C;   температура детектора - 270  °C;  скорость  потока

газа-носителя  (азота)  -  60 мл/мин.;  скорость  диаграммной  ленты  - 600

                                          -12

мм/час;  рабочая шкала электрометра 5 x 10    А; хроматографируемый объем -

1 мкл;  линейный  диапазон  детектирования  0,1 - 10  нг.  Абсолютное время

удерживания на колонке с SE-30 - 8 минут 45 секунд.

    Количественную оценку бифентрина проводят методом абсолютной калибровки

по   градуировочному   графику.   На   полученной   хроматограмме  измеряют

интенсивность  пиков  и  по  градуировочному  графику определяют количество

бифентрина.

    Для определения бифентрина с помощью ТСХ экстракт после анализа методом

ГЖХ  концентрируют  до объема примерно 0,1 - 0,2 мл и количественно наносят

на  хроматографическую пластинку "Силуфол". Справа и слева от пробы наносят

известные  количества стандартных растворов талстара в пределах линейности

детектирования.  Хроматографирование  проводят  в системе гексан - ацетон в

соотношении  50:1.  После  поднятия  фронта растворителя на 14 см пластинку

проветривают  на  воздухе  до  полного  удаления  растворителя. После этого

пластинку  подвергают  облучению УФ-светом в течение 20 - 25 минут, а затем

помещают  в камеру с парами йода на 5 минут. Далее пластинки выветривают на

воздухе  и  проявляют   1-процентным   водным   раствором   крахмала.  Зоны

локализации  обнаруживаются  в  виде  синих пятен на светлом фоне.  Окраска

пятен устойчива в течение 3-х дней.  Величина R   составляет 0,40 +/- 0,02.

                                               f

Линейный  диапазон  измерения  на пластинке составляет 1,0 - 10,0 мкг. Если

содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона линейности

(10 мкг),  то  для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть

экстракта.

На полученной хроматограмме измеряют интенсивность пиков (по окраске и площади) с помощью миллиметровой бумаги и по калибровочному графику определяют содержание бифентрина.

2.4. Расчет концентрации

Концентрацию (C, мг/куб. м) бифентрина вычисляют по формуле:

                                    a x V

                               C = --------,

                                   V  x V

                                    1    20

    где:

    a  -  количество  бифентрина,  найденное  в хроматографируемой пробе по

градуировочному  графику,  нг  (ГЖХ), или  соотношением  со стандартом, мкг

(ТСХ);

    V - общий объем анализируемого раствора, мл;

    V  - хроматографируемый объем пробы, мкл (ГЖХ) или мл (ТСХ).

     1

    При нанесении всей пробы на пластинку V = V ;

                                               1

    V   - объем анализируемого воздуха.

     20

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81).