Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6214-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМЕТОМОРФА В КЛУБНЯХ

КАРТОФЕЛЯ, ОГУРЦАХ И ПОЧВЕ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Диметоморф (акробат) - экспериментальный фунгицид, предназначенный для борьбы с фитофторой.

    CH O       OCH

      3           3

        \_____/

        //   \\

        \ ___ /    O    __

          --- \    \\  /  \

               C=CH-C-N    O

         _____/        \__/

        //   \\

        \ ___ /

        / ---

      Cl

    Химическое    название   -   (E,Z)-3-/3-(4-хлорофенил)-3-(3,4-

диметоксифенил)акрилоил/морфолин.

    Эмпирическая формула: C  H  ClNO .

                           21 22    4

Молекулярная масса - 287,9.

Препараты: ЦМЕ 151 поставляется в виде смачивающегося порошка 500 г/кг для бакового смешения с контактными фунгицидами или в качестве готового порошка, который уже включает манкоцеб 90/600 г/кг.

Физические свойства: бесцветное твердое кристаллическое вещество, без запаха, реакции изомеризации происходят в различных растворителях под влиянием света.

Температура плавления - 127 - 148 °C.

Растворимость: легко растворим в дихлорметане, растворим в ацетоне, ацетонитриле и метаноле; плохо растворим в гексане - 0,112 г/л и воде - 0,050 г/л.

Стабильность: хорошая термальная и гидролитическая стабильность.

                                -5

    Давление паров - E,-форма 10   Па при 20 °C.

    Препарат малотоксичен. ЛД   для мышей составляет 3700 мг/кг, а

                             50

для крыс 3900 мг/кг, не оказывает кожно-раздражающего действия.

2. Методика определения диметоморфа

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении диметоморфа ацетоном, очистке переэкстракцией в дихлорметан. Количественное определение производится с помощью жидкостного хроматографа (УФ-детектор).

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

    Минимальное детектируемое количество            1 нг

    Предел обнаружения                              0,01 мг/кг

    P - размах варьирования                         75 - 87%

    C - среднее значение определения                82%

    S - стандартное отклонение                      +/- 5,0%

    Доверительный интервал среднего при

альфа = 0,95 и n = 5                                82,0 +/- 14,0%

Мешающих анализу пестицидов не выявлено.

2.2. Реактивы и растворы

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.

Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетонитрил, хч, ТУ 6-09-3534-87.

Дихлорметан, хч, ТУ 6-09-3435-86.

Натрий хлористый, хч, ГОСТ 4233-77.

Натрий сернокислый, безводный, ч, ГОСТ 4166-76.

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74.

2.3. Приборы и посуда

Хроматограф жидкостный со спектрофотометрическим детектором марки "Милихром".

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на шлифе, ГОСТ 9737-70.

Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на шлифе, ГОСТ 9737-70.

Воронки химические, ГОСТ 25336-82.

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82.

Аппарат для встряхивания проб любого типа.

Испаритель ротационный вакуумный любого типа.

Весы технические лабораторные ВЛКТ-500.

Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 19491-74.

Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

2.4.1. Отбор и подготовка проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79, N 2051-79.

2.5.1. Экстракция

25 г измельченного материала - картофель, огурцы, почва - помещают в коническую колбу и заливают 100 мл охлажденного ацетона (t ~ 10 - 15 °C). Пробу встряхивают 15 мин. на аппарате для встряхивания. Ацетоновый экстракт фильтруют. Экстракцию повторяют с 80 мл ацетона, остаток промывают 20 мл ацетона. Экстракты объединяют и упаривают на ИР до отсутствия запаха ацетона.

2.5.2. Очистка экстракта

1. К сконцентрированному остатку приливают 100 мл воды, 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 25 мл дихлорметана (или свежеперегнанного хлороформа). Смесь встряхивают в течение 5 мин. и переносят в делительную воронку. Нижнюю фазу (дихлорметан) фильтруют через 30 г безводного сернокислого натрия. Водную фазу экстрагируют еще дважды в течение 5 мин. 25 мл дихлорметана. Экстракты дихлорметана фильтруют через безводный сернокислый натрий, который затем промывают 15 мл дихлорметана. Фильтраты собирают в круглодонную колбу и концентрируют до сухого состояния на ротационном испарителе.

Иногда очистки перераспределением диметоморфа в дихлорметан оказывается недостаточно. В этом случае дополнительно выполняется следующая очистка.

2. К сухому остатку добавляется 20 мл воды, 30 мл ацетонитрила и 30 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 5 мин., затем переносят в делительную воронку. Гексан - верхняя фаза - отбрасывают, водный остаток экстрагируют еще 2 раза в течение 5 мин. 30 мл гексана. Гексан удаляют, а нижнюю фазу экстрагируют 2 раза 25 мл дихлорметана. Фазы дихлорметана фильтруют через 20 г сульфата натрия. Сульфат натрия промывают 10 мл дихлорметана. Из полученного экстракта с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель.

2.6. Определение диметоморфа жидкостной хроматографией

Сухой остаток по п. 1 и п. 2 (2.5.2) растворяют в 2 - 4 мл ацетонитрила или дихлорметана в зависимости от используемой колонки.

Измерения выполняются при следующих условиях:

    Колонка:                   1) Силасорб 600, 5,0 мкм

                               размер, мм, - 64 x 2

                               2) Диасорб-130 - фенил/Т, 10 мкм

                               размер, мм, - 120 x 2

    Подвижная фаза:            1) гексан:изопропанол:дихлорметан

                               (35:20:5) (по объему)

    (элюент)                   2) ацетонитрил:вода - 60:40 (по объему)

    Скорость элюента:          100 мкл/мин.

    Длина волны:               240 нм

    Объем вводимой пробы:      5 мкл

    Диапазон чувствительности: 0,2 - 0,4

    Объем удерживания:         1) 264 - 266 мкл

                               2) 376 - 378 мкл

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание пестицида в анализируемой пробе определяется методом соотношения пиков стандартов и анализируемых проб.

Количество диметоморфа рассчитывается по формуле:

                          H  x V  x C x V

                           2    1        3

                      X = ----------------,

                            H  x V  x P

                             1    2

    где:

    X - количество препарата в пробе, мг/кг;

    C  -  количество препарата в стандартном растворе, введенном в

хроматограф, мкг/мл;

    H  - высота пика стандарта, мм;

     1

    H  - высота пика пробы, мм;

     2

    V   -  объем  стандартного раствора, введенного в хроматограф,

     1

мкл;

    V   - объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф,

     2

мкл;

    V  - объем анализируемой пробы, мл;

     3

    P - навеска пробы, г.

Минимально детектируемая концентрация диметоморфа в анализируемой пробе 0,2 мкг/мл. Линейный диапазон детектирования 0,2 мкг/мл - 4 мкг/мл.

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила предосторожности при работе с токсичными, взрывоопасными и легковоспламеняющимися веществами.