"Временные методические указания по определению концентраций санмайта в воде хроматографическими методами" // Технорма.RU

Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6206-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ САНМАЙТА В ВОДЕ

ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

CH \\ C H ClN OS.

│ 3 --- Cl 19 25 2

H C-C---N/ \\

3 │ \ ___ /\ --- CH М.м. 364,9.

H C N --- SCH --// \\ │ 3

3 2 \ ___ /--C--CH

--- │ 3

Санмайт - 4-хлор-2(1,1-диметилэтил-5///4-(1,1-диметилэтил/фенил/метил/тио-3(2H)-пиридазин - белое кристаллическое вещество с температурой плавления 111 - 112 °C. Легко растворим в ацетоне, хлороформе, растворим в спирте, бензоле, нерастворим в воде. Устойчив при комнатной температуре. Разлагается при сильном УФ-облучении.

2.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении санмайта из воды гексаном и дальнейшем хроматографировании препарата (ТСХ, ГЖХ).

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения, мг/л - 0,005.

Диапазон измеряемых концентраций, мг/л - 0,005 - 0,5.

┌───────┬──────────────┬─────────────┬─────────────┬─────────────────────┐

│ Метод │ Среднее │ Стандартное │Относительное│ Доверительный │

│ │ значение │отклонение, %│ стандартное │интервал среднего, %,│

│ │определения, %│ │отклонение, %│ при n = 5, P = 0,95 │

├───────┼──────────────┼─────────────┼─────────────┼─────────────────────┤

│ГЖХ │90,8 │6,64 │3,32 │7,31 │

│ТСХ │80,9 │4,97 │2,48 │6,14 │

└───────┴──────────────┴─────────────┴─────────────┴─────────────────────┘

2.1.3. Избирательность метода

Определению не мешают наполнители технического препарата.

2.2. Реактивы, растворы, материалы

Ацетон, осч, 9-5 ТУ 6-09-3513-86.

Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.

Натрия сульфат безводный, чда, ГОСТ 4166-76.

Стандартный раствор санмайта, содержащий 100 мкг/мл вещества.

Стандартный раствор санмайта, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более месяца.

Спирт этиловый, 96-процентный, ГОСТ 5962-81.

Универсальная индикаторная бумага, ТУ 6-09-1181-71.

К методу ГЖХ

Носитель для колонки - Хроматон N-AW с 5% SE-30.

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74, в баллонах с редуктором.

К методу ТСХ

О-толидин, МРТУ 6-09-6332-75.

Кислота уксусная ледяная, хч, ГОСТ 18270-72.

Калия иодид, хч, ГОСТ 4232-74.

Калий марганцевокислый, хч, ГОСТ 20490-75.

Кислота соляная, хч, ГОСТ 3118-77.

Пластинки "Silufol" (Хемапол, ЧССР).

Подвижная фаза: ацетон - гексан 1:1.

Проявляющий реактив. Готовят раствор А: 0,2 г о-толидина растворяют в 2 мл уксусной кислоты. Раствор Б - 0,8 г иодида калия растворяют в 2 мл дистиллированной воды. Растворы А и Б смешивают и доводят дистиллированной водой до 100 мл.

Раствор для хлорирования. На дно эксикатора помещают 2 - 3 г перманганата калия и добавляют 10 - 15 мл дистиллированной воды. Затем сюда же приливают 8 - 10 мл концентрированной соляной кислоты.

2.3. Приборы и посуда

Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Водяная баня, ТУ 64-1-425-72.

Колбы конические, емкостью 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.

Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 0,1 мл и 1 мл, ГОСТ 20292-74.

Воронки химические, ГОСТ 25336-82.

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82.

К методу ГЖХ

Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (типа "Цвет", "Газохром" или др.).

Микрошприц МШ-10, ТУ 283-3-106.

Колонка хроматографическая, стеклянная, длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм.

К методу ТСХ

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор проб

Отбор проб осуществляется в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР, N 2051-79 от 21.08.79.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Экстракция и очистка

Пробу анализируемой воды объемом 500 мл (pH воды равен 7 по универсальной индикаторной бумаге) помещают в делительную воронку на 1000 мл и экстрагируют санмайт дважды гексаном порциями по 30 мл. Водно-гексановую смесь в воронке встряхивают в течение 5 мин. Для лучшего расслаивания водной фазы и растворителя в воронку пипеткой вносят 1 мл 96-процентного этилового спирта. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия (примерно 1 столовая ложка) и отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл.

2.5.2. Определение методом ГЖХ

Остаток растворителя тщательно удаляют в токе воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и вводят в хроматограф 4 мкл.

Условия хроматографирования

Длина колонки - 1 м.

Диаметр колонки - 3,5 мм.

Твердый носитель Хроматон N-AW.

Жидкая фаза - 5% SE-30.

Температура колонки - 220 °C.

Температура испарителя - 240 °C.

Температура детектора - 260 °C.

Газ-носитель - азот.

Скорость потока газа-носителя - 60 мл/мин.

Скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч.

Объем вводимой пробы - 4 мкл.

Время удерживания - 5 мин.

Нижний предел детектирования - 1 нг.

Количественное определение проводят методом расчета по соотношениям высота пика - концентрация. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 4 мкл стандартного раствора, измеряют высоты пиков и вычисляют среднее арифметическое из 3-х определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (4 мкл) конечного экстракта его концентрация превышает линейный диапазон детектирования, пробу разбавляют.

Концентрацию препарата (X) в мг/л воды вычисляют по формуле:

C x V x h x V

ст ст пр общ

X = ----------------------,

V x h x P

пр ст

где:

C - концентрация санмайта в стандартном растворе, введенном

ст

в хроматограф, мкг/мл;

V - объем пробы стандарта, введенный в хроматограф, мкл;

ст

h - высота пика пробы, мм;

пр

V - общий объем пробы, мл;

общ

V - объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;

пр

h - высота пика стандарта, мм;

ст

P - навеска пробы, мл.

2.5.3. Определение методом ТСХ

Раствор пробы после упаривания с помощью капилляра или

микропипетки количественно наносят на пластинку "Silufol" так,

чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Стенки колбы смывают

несколькими каплями растворителя, который наносят в центр пятна.

Рядом с пробой наносят стандартные растворы, содержащие 1, 2, 5,

10 мкг препарата, после чего пластинку помещают в

хроматографическую камеру. После подъема фронта смеси

растворителей ацетон:гексан 1:1 на 10 см пластинку вынимают из

камеры, сушат на воздухе, помещают в эксикатор с раствором для

хлорирования (на 5 мин.). Пластинку вынимают из эксикатора,

выдерживают на воздухе до полного выветривания хлора (больше 1

часа) и опрыскивают проявляющим раствором - раствором о-толидина.

Препарат проявляется в виде темно-фиолетового пятна. Нижний предел

обнаружения - 1 мкг. Величина R = 0,58.

Концентрацию санмайта (X) в воде в мг/л вычисляют по формуле:

X = -,

где:

A - количество санмайта, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

P - навеска анализируемой пробы, мл.

3. Требования безопасности

Выполняются в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противопожарного режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N 2255-81 от 20.10.81.