Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6190-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГЛУФОСИНАТА АММОНИЯ (БАСТА)

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Глуфосинат аммоний (баста) - DL-гомоаланин-4-ил-(метил)-фосфонат аммония (по номенклатуре ИЮПАК).

    ┌   O         NH     ┐-

    │   │         │ 2    │   +                         C H  N O P.

    │CH P-CH -CH -CH-COOH│ NH                           5 15 2 4

    │  3\\  2   2        │   4

    └    O               ┘                             М.м. 198,2.

Фирменное название - XOE 039866.

Белое кристаллическое вещество, температура плавления 215 °C (разлагается). Растворим в воде, нерастворим в органических растворителях. При применении может находиться в виде аэрозоля.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны 0,04 мг/куб. м.

2. Характеристика метода

Определение основано на анализе препарата методом реакционной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) на неподвижной фазе OV-17 с термоионным (ТИД) или пламенно-фотометрическим фосфорным (ПФД) детектором или на хроматографировании в тонком слое (ТСХ) пластинок "Силуфол" с обнаружением баста по реакции с нингидрином.

Отбор проб проводится с концентрированием (фильтр "синяя лента", поглотитель с водой).

Предел измерения в анализируемом объеме пробы методом ГЖХ - 0,5 нг, методом ТСХ - 0,1 мкг.

Предел измерения в воздухе (при отборе 125 л воздуха): ГЖХ - 0,02 мг/куб. м, ТСХ - 0,08 мг/куб. м.

Диапазон измеряемых концентраций: 0,02 мг/куб. м - 4 мг/куб. м.

Определению как методом ГЖХ, так и ТСХ может мешать гербицид глифосат. Однако совместное применение баста и глифосата в технологиях защиты исключено.

Другие фосфор- и азотсодержащие соединения определению баста методом ГЖХ не мешают; определению методом ТСХ могут мешать соединения, содержащие аминогруппу. Границы суммарной погрешности измерения методом ГЖХ +/- 15,7%, методом ТСХ +/- 18,5%.

3. Реактивы, растворы, материалы

Общие для ТСХ и ГЖХ

Фильтры "синяя лента".

Дистиллированная вода.

Аммиак водный 25% ч, ГОСТ 3760-79.

Метиловый спирт хч, ГОСТ 6996-77.

Глуфосинат аммония 99%.

Основной стандартный раствор баста (ОСР): 100 мг баста растворяют в 100 мл 1-процентного водного раствора аммиака. Хранить в холодильнике не более 3-х месяцев.

К методу ТСХ

Этанол 96%, ТУ 6-09-17-10-77.

Медь сернокислая чда, ГОСТ 4165-78, прокаленная при 160 °C до светло-голубого цвета.

Пластинки "Силуфол", Хемапол, Чехословакия, или отечественные "Армсорб".

Рабочие стандартные растворы глуфосинат аммония:

"а" - 100 мкг/мл - готовят разведением ОСР 1-процентным водным раствором аммиака, хранят в холодильнике не более 2-х недель; раствор "б" - 10 мкг/мл - готовят разведением раствора "а" и раствор "в" - 1 мкг/мл - разведением раствора "б" этанолом в день проведения исследований.

Проявляющий реагент: 2-процентный раствор нингидрина в ацетоне. Хранить в темной склянке.

К методу ГЖХ

Неподвижная фаза 3% OV-17 на Хроматоне N-AW-DMCS.

Азот газообразный особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Водород в баллоне, ГОСТ 3022-88.

Толуол чда, ГОСТ 5789-78.

Этилацетат хч, ГОСТ 22300-81.

Уксусная кислота ледяная, ГОСТ 18270-81.

Триметилортоацетат хч.

Рабочие стандартные растворы глуфосинат аммония: "а" - 40 мкг/мл, "б" - 20 мкг/мл, "в" - 10 мкг/мл готовят разведением ОСР 1-процентным водным раствором аммиака. Для получения хроматографируемых производных берут по 0,1 мл каждого стандарта, упаривают досуха при комнатной температуре и далее поступают, как описано в разделе получения хроматографируемых производных в образце. Концентрация полученных производных глуфосинат аммония в 2 мл метанола: из "а" - 2 мкг/мл, "б" - 1 мкг/мл, "в" - 0,5 мкг/мл.

4. Приборы, аппаратура и посуда

Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-82.

Фильтродержатели.

Поглотители Рыхтера.

Аппарат для встряхивания колб типа АВУ-60, ТУ 64-1-2451-78.

Весы аналитические ВЛА-200М.

Колбы конические широкогорлые или стаканы емкостью 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 50, 100 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Пипетки мерные, ГОСТ 20292-74.

К методу ТСХ

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

Камера для опрыскивания - колпак для насосов с кнопкой и рантом диаметром 160 мм, высотой 220 мм, ТУ 25-11-1022-75.

К методу ГЖХ

Газовый хроматограф серии "Цвет" или аналогичный с ТИД или ПФД-фосфорным.

Колбонагреватели для круглодонных колб (50 мл) или электроплитка с закрытой спиралью.

Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1М, ТУ 20-11-917-74, или аналогичный.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76, или аналогичная.

Холодильники Либиха 200 - 400 мм, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82, емкостью 50, 100 мл.

Пробирки мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 5, 10 мл.

Микрошприцы на 10 мкл.

Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 см.

Секундомер.

5. Отбор проб воздуха

Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр "синяя лента" или через поглотительный прибор Рыхтера, заполненный 10 мл дистиллированной воды, в течение 25 мин. Длительность хранения пробы в холодильнике не более 2-х суток.

6. Подготовка к измерению

Бумажный фильтр из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 10 мл дистиллированной воды. Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт сливают в мерную пробирку, доводят объем точно до 10 мл. При отборе в поглотитель Рыхтера воду сливают в мерную пробирку и доводят объем точно до 10 мл.

7. Проведение измерения методом ТСХ

    Из  полученных 10 мл водного экстракта отбирают 1 мл, прибавляют к нему

1  мл этанола и 1,2 г  (~ 1 мл) прокаленной сернокислой меди, перемешивают,

дают  отстояться  и  аликвоту  0,1  -  0,2 мл наносят на хроматографическую

пластинку  микропипеткой (шприцем) или пипеточным дозатором. Справа и слева

от   пробы   наносят   0,2  мл  рабочего  стандартного  раствора  "в",  что

соответствует  0,2  мкг, и  0,1  мл рабочего стандартного раствора "б", что

соответствует  1  мкг.  Пластинку при нанесении проб и стандартов для более

быстрого  испарения  растворителя  можно  подогреть на электрогрелке. Когда

растворитель  (в  пятне) испарится, пластинку помещают в хроматографическую

камеру,  в  которую  налита смесь метанол - аммиак (7:3). Дают растворителю

подняться  на  10  см от старта и вынимают пластинку из камеры. Помещают ее

под УФ-свет на 25 минут, располагая на расстоянии 20 см от источника света.

После облучения опрыскивают пластинку проявляющим реагентом и помещают на 1

мин.  в сушильный шкаф при температуре 40 °C. Вынимают из шкафа и оставляют

при  комнатной  температуре  (исключить прямое попадание солнечного света).

Через   5   -   7   минут  глуфосинат  аммоний  проявляется  в  виде  пятен

сиренево-красного цвета, R  = 0,7 +/- 0,05.

                          f

Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартов. Прямопропорциональная зависимость между концентрацией и площадью пятна (при одинаковых нанесенных объемах) соблюдается в интервале 0,1 - 5 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (5 мкг), для хроматографирования необходимо брать аликвоту (0,1; 0,2 мл) экстракта (из 10 мл).

Концентрацию препарата в воздухе X, мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

                                    G x V

                               X = --------,

                                   V  x V

                                    1    20

    где:

    G  - количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме пробы,

мкг;

    V  - объем пробы, нанесенный на пластинку, мл;

     1

    V - общий объем пробы (экстракта), мл;

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям, л.

Метод ГЖХ

Полученный экстракт (10 мл) переносят в круглодонную колбу емкостью 50 мл и упаривают под вакуумом на роторном испарителе при температуре бани не более 50 °C досуха. Прибавляют для удаления остаточной воды 3 - 5 мл этилацетата и испаряют еще раз досуха.

Получение хроматографируемых производных

К сухому остатку прибавляют 2 мл ледяной уксусной кислоты и встряхивают 15 мин. Затем прибавляют 8 мл триметилортоацетата, интенсивно встряхивают и нагревают с обратным холодильником в течение 4-х часов на колбонагревателе (электроплитке или песчаной бане), периодически встряхивая колбу вместе с холодильником. По окончании прибор снимают с нагревателя, добавляют в колбу трижды по 15 мл толуола и испаряют его каждый раз под вакуумом при температуре бани не более 50 °C до 0,5 - 1 мл (до удаления запаха уксусной кислоты). К остатку прибавляют 5 мл метанола, перемешивают и упаривают растворитель до 1 - 1,5 мл, переносят в мерную пробирку, доводят точно до 10 мл и анализируют методом ГЖХ. Одновременно с пробами метоксилируют стандартные рабочие растворы для ГЖХ ("а", "б", "в").

Измерение методом ГЖХ проводится на хроматографе с ТИД или ПФД-фосфорным:

- колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3,5 мм;

- фаза 3% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS.

    Условия анализа                        ТИД             ПФД-фосфорный

    газ-носитель (азот)                23 мл/мин.          30 мл/мин.

    водород                            14 - 17 мл/мин.     70 мл/мин.

    воздух                             400 мл/мин.         100 мл/мин.

    Температура ввода                  225 °C              225 °C

      детектора                        -                   225 °C

      колонки                          220 °C              220 °C

    Вводимый объем                     2 - 3 мкл           2 - 3 мкл

    Время удерживания                  3,25 мин.           1,5 мин.

Концентрацию глуфосинат аммония (баста) (X, мг/куб. м) в воздухе рассчитывают по формуле:

                             C   x V   x H   x V

                              ст    ст    пр

                         X = -------------------,

                               H   x V  x V

                                ст    1    20

    где:

    C   - концентрация стандартного раствора производного баста, введенного

     ст

в хроматограф, мкг/мл;

    V    -  объем  стандартного  раствора  производного баста, введенного в

     ст

хроматограф, мкл;

    H   - высота пика хроматографируемого объема пробы, мм;

     пр

    V - общий объем пробы, мл;

    H   - высота пика хроматографируемого объема стандарта, мм;

     ст

    V  - хроматографируемый объем пробы, мкл;

     1

    V    - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным

     20

условиям, л.

8. Требования безопасности

Выполняются в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N 2455-81 от 20.10.81.