Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6188-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ КВИНКЛОРАКА

(ФАЦЕТА) В РИСОВОЙ СОЛОМЕ, ВОДЕ И ПОЧВЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Квинклорак (фацет) - 3,7-дихлор-8-хинальдиновая кислота.

          COOH

      Cl    │                                М.м. 242,1.

       \// \ / \\

       │   ││   │                            C  H Cl NO .

        \\ / \ //\                            10 5  2  2

                  Cl

    Твердое вещество слегка желтоватого цвета. Т. пл. 269 °C.

    Растворимость в 100 г растворителя при 20 °C:

                             -3

    вода           - 6,2 x 10  ;

    этиловый спирт - 0,2;

    ацетонитрил    - 0,1;

    ацетон         - 0,2;

    этилацетат     - 0,1.

                                      -7                -7

    Давление пара  при  20 °C < 1 x 10  , mbar = 0,9 x 10   мм рт.

ст. ЛД   для крыс = 2680 мг/кг.

      50

МДУ в рисе 0,05 мг/кг.

2. Методика определения квинклорака в рисовой соломе, почве

и воде методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении квинклорака из исследуемого образца ацетоном при pH 10 - 11 и затем переэкстракции хлороформом при pH 2, очистке, концентрировании и последующем определении методом реакционной хроматографии в виде метилпроизводного.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Таблица

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАЦЕТА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РИСОВОЙ СОЛОМЕ

┌──────────────┬─────────────────────────────────────────────────────────┐

│ Исследуемый  │                        Метод ГЖХ                        │

│    объект    ├────────────┬───────────┬─────────────┬──────────────────┤

│              │  предел    │  среднее  │ стандартное │  доверительный   │

│              │обнаружения,│ значение  │отклонение, %│интервал среднего,│

│              │мг/кг, мг/л │определения│             │        %         │

├──────────────┼────────────┼───────────┼─────────────┼──────────────────┤

│вода          │0,005       │85         │+/- 4,5      │+/- 7,5           │

│почва         │0,005       │80         │+/- 5,5      │+/- 8,7           │

│рисовая солома│0,04        │78         │+/- 5,9      │+/- 9,3           │

└──────────────┴────────────┴───────────┴─────────────┴──────────────────┘

2.1.3. Избирательность метода

Условия экстракции, очистки и дальнейшего газохроматографического определения фацета позволяют избирательно определять препарат в присутствии пестицидов других групп.

2.2. Реактивы и материалы

Ацетон, осч, ТУ 6-09-3513-86.

Хлороформ, хч, ТУ 6-09-42-63-76.

Метанол, хч, ГОСТ 6995-77.

Едкий натр, хч, ГОСТ 4328-77.

Кислота серная, хч, ГОСТ 4204-77.

Гидразингидрат, чда.

Кали едкое, ч, ГОСТ 9285-78.

Диэтиловый эфир, хч, ГОСТ 6262-79.

Азот в баллоне, особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Неподвижная фаза 3% OV-17 на хроматоне N-AW-DWCS (0,16 - 0,20 мм).

Квинклорак (ВАСФ) - 250 мг/л (эмульсия).

Основной стандартный раствор (ОСР) с концентрацией 100 мг/мл готовят взятием навески 40 мг (0,0400 г) эмульсии, содержащей 250 мг/л квинклорака, и растворением в ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл. Хранят в холодильнике 2 месяца.

Рабочие стандартные растворы с содержанием 2 мкг/мл, 1 мкг/мл, 0,5 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением ОСР ацетоном. Хранят в холодильнике.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Газовый хроматограф серии "Цвет" с детектором ДПР.

Колонка стеклянная длиной 1 м, диаметром 3,5 мм.

Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Колбы грушевидные (круглодонные) емкостью 500 мл, 100 мл, 50 мл ОКШ 500-29/50-14, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пробирки мерные на шлифах емкостью 5 и 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Аппарат для встряхивания.

Колбы конические емкостью 500, 250 мл, ГОСТ 25336-82.

Пипетки на 0,1; 0,2; 1; 5; 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ SE-2.833.024.

Прибор для получения диазометана (рис. 1 - не приводится):

- колба круглодонная трехгорлая емкостью 500 мл на шлифах (реакционный сосуд);

- холодильник Либиха на шлифах;

- делительная воронка на шлифах;

- П-образный переходник на шлифах;

- капилляр.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор проб

Отбор, хранение и доставка проб производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N 2051-79 от 21.08.79.

2.4.2. Подготовка колонки для ГЖХ

Колонку заполняют стандартной фазой (3% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS), подключив ее к вакууму водоструйного насоса. Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в течение 6 часов без подключения к детектору, продувая азотом (50 мл/мин.) и постепенно поднимая температуру от 120° до 190°. Затем колонку присоединяют к детектору.

2.5. Описание определения

2.5.1. Экстракция

    Вода. 200 мл анализируемой пробы помещают в круглодонную колбу

емкостью  500  мл,  прибавляют  100  мл  ацетона и экстрагируют на

аппарате  для  встряхивания  в течение ~ 1 часа. Ацетон упаривают,

остаток  экстрагируют  3 x 60 мл хлороформа. Хлороформный экстракт

сушат  Na SO  и упаривают в вакууме водоструйного насоса до объема

         2  4

(V  - 5 - 10 мл),  отбирают  0,5  -  1 мл (V )   пробы,  упаривают

  3                                         2

досуха.  К  сухому  остатку  прибавляют  5  мл  эфирного  раствора

диазометана.   Выдерживают   20   мин.   Если   реакционная  смесь

обесцветится, прибавляют еще 2 мл эфирного раствора диазометана  и

выдерживают 10 мин. Упаривают досуха. Остаток  растворяют  в 1  мл

(V ) ацетона и хроматографируют.

  4

    Рисовая  солома. 10 г измельченной рисовой соломы заливают 100

мл  0,1  N  водного раствора NaOH и экстрагируют в течение 1 часа,

затем прибавляют 100 мл ацетона, выдерживают ~= 5 мин., фильтруют.

Из  фильтрата  упаривают ацетон в вакууме водоструйного насоса при

температуре   бани   ~=   50   °C.   Остаток   подкисляют   3   мл

концентрированной  H SO   и  экстрагируют  3  x 60 мл хлороформом.

                    2  4

Экстракт  сушат  Na SO  и упаривают в вакууме водоструйного насоса

                   2  4

до  V   (5  - 10 мл). Отбирают 0,5 - 1 мл (V ) экстракта и очищают

     3                                      2

его  пропусканием  через  слой  силикагеля  (0,16  -  0,3).  Перед

очисткой   через  силикагель  пропускают   3  мл  смеси  метиловый

спирт:хлороформ  (5:95).  Элюируют квинклорак 3 мл смеси метиловый

спирт:хлороформ   (40:60).   Элюат   упаривают   досуха.   Остаток

метилируют, как описано выше, и хроматографируют.

    Почва.  50  г  увлажненной  пробы  почвы заливают 100 мл 0,1 N

водного  раствора  NaOH,  экстрагируют  в  течение  1  часа, затем

прибавляют  200  мл ацетона, выдерживают ~= 5 мин. Фильтруют через

бумажный фильтр или центрифугируют в течение 5 - 10 мин. Упаривают

в  вакууме  водоструйного насоса ацетоном, остаток подкисляют 3 мл

концентрированной  H SO   и  экстрагируют  3  x 60 мл хлороформом.

                    2  4

Хлороформный   экстракт   сушат   Na SO   и  упаривают  в  вакууме

                                    2  4

водоструйного  насоса до V  (5 - 10 мл), отбирают 0,5 - 1 мл (V ),

                          3                                    2

очищают  на  колонке  с  силикагелем,  упаривают и метилируют, как

описано выше, и затем хроматографируют.

2.5.2. Получение диазометана

Работа с диазометаном должна проводиться в вытяжном шкафу вследствие его токсичности и раздражающего действия. При работе использовать индивидуальные средства защиты: перчатки, очки.

В реактор, снабженный обратным холодильником, капельной воронкой, газоотводной трубкой и трубкой для подачи азота (см. рис. 1 - не приводится) помещают 6 г едкого кали, 3 мл метанола и 3 мл гидразингидрата. Через смесь продувают азот с расходом 100 мл/мин. и прикапывают хлороформ из капельной воронки со скоростью 1 капля за 1 - 2 секунды. Получаемый указанным способом диазометаном насыщают диэтиловый эфир. После окончания реакции прекращают подачу хлороформа, отключают азот, остатки в реакционной колбе заливают водой, тщательно промывают водой все составные части прибора.

2.5.3. Хроматографический анализ

Газовый хроматограф серии "Цвет" с детектором ДПР.

Колонка хроматографическая стеклянная длиной 1 м, диаметром 3,5 мм.

Неподвижная фаза 3% OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS.

Температура колонки - 190 °C.

Температура испарителя - 250 °C.

Газ-носитель - азот с расходом 65 - 70 мл/мин.

Расход воздуха -

Вводимый объем - 3 мкл.

                             -12

    Шкала множителя - 20 x 10   .

Скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.

Время удерживания - 6,5 мин.

Предел определения - 0,1 нг.

Количественную оценку проводят методом абсолютной калибровки по сравнению со стандартом квинклорака.

Расчет результатов анализа проводят по формуле:

                        C x H  x V  x V  x V

                             2    1    3    4

                    X = ---------------------,

                             H  x V  x P

                              1    2

    где:

    C - содержание квинклорака в стандартном растворе, нг;

    Н  - высота пика стандартного раствора, мм;

     1

    H  - высота пика пробы, мм;

     2

    V  - объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;

     1

    V  - объем экстракта, взятый для очистки, мл;

     2

    V  - объем экстракта для очистки, мл;

     3

    V  - конечный объем экстракта, мл;

     4

    P - навеска анализируемой пробы, г, мл.

3. Техника безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими веществами и токсическими веществами.