Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6186-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТИТУСА

В ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, ВОДЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Титус - N-((1,6-диметоксипиримидин-2ил)аминокарбонил)-3-(этилсульфонил)-2-пиридинсульфамид - применяется как гербицид в посевах ячменя.

           SO CH CH

     // \ /  2  2  3

    │   ││                                      C  H  S N O .

    │   ││                 OCH                   14 17 2 5 7

     \\ / \           N --/   3

       N   SO NHCONH--//  \\                    М.м. 431.

             2        \ __ /

                      N -- \

                            OCH

                               3

1. Характеристика препарата

Титус представляет собой белое кристаллическое вещество, не имеющее запаха, растворимое в хлороформе, хлористом метилене, ацетоне, ацетонитриле.

2. Методика определения титуса в почве, зеленой массе

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении титуса из проб исследуемых объектов смесью буферного раствора pH 7 и метанола, очистке и концентрировании экстрактов с последующим определением методом газожидкостной хроматографии с электронозахватным детектором.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

ПРЕДЕЛ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

┌───────┬────────────┬────────────┬─────────────┬─────────────┬────────────────┐

│Объект │   Предел   │  Среднее   │ Стандартное │Относительное│ Доверительный  │

│       │обнаружения,│  значение  │ отклонение, │ стандартное │    интервал    │

│       │мг/кг, мг/л │определения,│      %      │отклонение, %│среднего, %, при│

│       │            │     %      │             │             │ n = 5, P = 0,95│

├───────┼────────────┼────────────┼─────────────┼─────────────┼────────────────┤

│Почва  │0,03        │79,2        │79,2 +/- 1,95│5,1          │6,3             │

│Зеленая│            │            │             │             │                │

│масса  │0,09        │63,8        │63,8 +/- 1,9 │4,9          │7,3             │

│Вода   │0,001       │88,4        │88,4 +/- 0,6 │1,24         │1,4             │

└───────┴────────────┴────────────┴─────────────┴─────────────┴────────────────┘

3. Реактивы, растворы, материалы

Титус.

Метиловый спирт, хч, ГОСТ 6995-77.

Буферный раствор (калий фосфорнокислый двузамещенный 1 М) pH 7.

Фосфорная кислота, хч, ГОСТ 2156-76.

Метилен хлорид, ч, ТУ 6-09-3716-74.

Хлороформ, ГОСТ 20015-74.

Ацетон, осч, 9-5 ТУ 6-09-3513-86.

Трифторуксусный ангидрид, ТУ 6-09-4135-75.

Пиридин, ч, ГОСТ 13647-78.

Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5% XE-60.

    Приготовление  смеси  для   экстракции   (25%   метанола,  75%

буферного раствора pH 7): к 150 мл 1 М K HPO   прибавить  1350  мл

                                        2   4

дистиллированной   воды,  довести  pH  раствора  до  7  с  помощью

концентрированной  фосфорной кислоты (2 - 2,5 мл) (pH проверить на

pH-метре). Затем прибавить 500 мл метанола и тщательно перемешать.

Конечное pH смеси должно быть 7,5.

Основной стандартный раствор титуса, содержащий 100 мкг/мл, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл в хлороформе.

Раствор хранят в холодильнике не более месяца. Рабочие растворы титуса 2 - 10 мкг/мл. Хранят растворы в холодильнике не более 5 дней.

4. Приборы и посуда

Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75.

Колбы конические, 50, 100 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (тип "Цвет", "Газохром" или др.).

Микрошприцы на 10 мкл, ТУ 2-833-106.

Колонки стеклянные хроматографические, длина 1 м, d = 3 мм.

5. Отбор проб

Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР за N 2051-79 от 21 августа 1979 г. Пробы хранят в морозильной камере (-14 - 20 °C).

6. Проведение определения

Экстракция и очистка экстрактов

Почва, зеленая масса. 50 г почвы (10 г измельченного растительного материала) помещают в коническую колбу, заливают 70 - 100 мл экстракционной смеси и встряхивают 1 час. Фильтрат сливают. Повторяют экстракцию дважды с 70 мл смеси в течение 15 мин. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку и проводят экстракцию препарата 3 раза по 50 мл метиленхлоридом (хлороформом). Отделяют метиленхлорид и упаривают досуха при температуре бани не выше 40 °C.

Вода. Пробу воды (1 л) помещают в делительную воронку, доводят pH до 7,5 и экстрагируют препарат по 50 мл метиленхлоридом, каждый раз встряхивая воронку 3 - 5 мин. Объединяют метиленхлоридный экстракт и упаривают при температуре бани не выше 40 °C до объема 0,2 - 0,3 мл.

Определение методом ГЖХ

Удаляют остаток растворителя на воздухе. К сухому остатку пробы приливают 50 мкл трифторуксусного ангидрида и 10 мкл пиридина. Выдерживают приготовленный раствор в течение 30 мин. при комнатной температуре, после чего добавляют 1 мл хлороформа и 5 мл дистиллированной воды, интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения фаз хлороформную фазу упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона. После чего 4 мкл ацетонового раствора вводят в хроматограф.

Параллельно проводят аналогичную подготовку стандартного раствора титуса (5 мкг и 3 мкг) и контрольную пробу. Расчеты выполняют по сравнению пиков фторпроизводного титуса в стандартном растворе и в пробе.

Условия хроматографирования

Хроматограф с ДПР.

Колонка стеклянная, длина 1 м, d = 3 мм.

Носитель - хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм).

Неподвижная фаза - 5% XE-60.

    Температура испарителя - 250 °C;

                детектора - 250 °C;

                колонки - 180 °C.

    Скорость газа-носителя - 55 мл/мин. (через колонку);

                           - 150 мл/мин. (на поддувку).

    Вводимый объем - 4 мкл.

    Время удерживания фторпроизводного титуса - первый пик 7 мин. 48 с;

                                                второй пик - 27 мин.

    Минимально детектируемое количество - 9 нг.

    Содержание титуса в пробе рассчитывают по формуле:

                        C   x S   x V   x V

                         ст    пр    ст    0

                    X = --------------------,

                           S   x V   x M

                            ст    пр

    где:

    X - количество препарата в пробе, мг/кг, мг/л;

    C   - содержание вещества в стандарте, мкг/мл;

     ст

    V     -   объем   стандарта,   вводимого  в  колонку  газового

     ст

хроматографа, мкл;

    V    - объем анализируемой пробы, введенный в колонку газового

     пр

хроматографа, мкл;

    V  - общий объем анализируемой пробы, мл;

     0

    S   - площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;

     пр

    S   - площадь пика стандарта, кв. мм;

     ст

    M - масса или объем пробы, взятой для анализа, г, мл.

7. Техника безопасности

Выполняются в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N 2255-81 от 20.10.81.