Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6180-91

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ

ЦИПРОКОНАЗОЛА (АЛЬТО) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ципроконазол (альто) - 2-(4-хлорфенил)-3-циклопропил-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)бутон-2-ол.

                  OH

          ---     │                                    C  H  ClNO.

    Cl--//   \\---C----CH ---N---N                      15 18

        \ ___ /   │      2  / \\

          ---     CH        \\ /                       М.м. 291,5.

                 /  \         N

               CH    CH

                 3  /  \

                  CH --CH

                    2    2

Растворим в хлороформе, ацетоне, метаноле, хлористом метилене.

ОБУВ альто в воздухе рабочей зоны - 0,7 мг/куб. м.

1. Характеристика метода

Определение основано на хроматографическом определении (ГЖХ, ТСХ) препарата после концентрирования из воздуха.

Отбор проб проводится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента", поглотитель с хлороформом).

Пределы измерения в анализируемом объеме пробы: 20 нг (ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).

Пределы измерения в воздухе: 0,2 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 100 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций - 0,2 - 6,0 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 - 3,0 мг/куб. м (ТСХ).

Определению не мешают наполнители технического препарата.

Граница суммарной погрешности - +/- 18,5%.

2. Реактивы, растворы, материалы

Ацетон хч, ГОСТ 2603-79.

Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Натрия сульфат безводный чда, ГОСТ 4166-76.

Хлороформ чда, ГОСТ 20015-74.

Стандартный раствор ципроконазола в ацетоне концентрации 100 мкг/мл. Готовят растворением 10 мг препарата в 100 мл ацетона. Срок хранения - до 3 месяцев. Для ГЖХ готовят стандартные растворы последовательным разведением исходного раствора. Срок хранения - до 5 дней.

К методу ГЖХ

Насадка для колонки - Хроматон N-AW с 5% SE-30.

К методу ТСХ

Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.

Пластинки "Силуфол" (ЧССР).

Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-1058-76.

Подвижная фаза - хлороформ - ацетон (9:1).

Проявляющий реактив - раствор бромфенолового синего. 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона, доводят до 100 мл 0,5% водно-ацетоновым (1 часть воды + 3 части ацетона) раствором азотнокислого серебра.

3. Приборы, аппаратура и посуда

Электроаспиратор, ТУ 64-1-862-77.

Бумажные фильтры "синяя лента".

Фильтродержатели.

Ротационный испаритель с набором колб (типа ИР-1), ТУ 26-11-917-76.

Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.

Посуда стеклянная лабораторная по ГОСТ 1770-74, ГОСТ 25336-82, ГОСТ 20292-74.

К методу ГЖХ

Хроматограф с термоионным детектором (типа "Цвет", "Кристалл-2000" или другой).

Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3 мм.

Микрошприц на 10 мкл МШ-10.

К методу ТСХ

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

4. Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтры "синяя лента" и дрексель, заполненный 100 мл хлороформа, в течение 20 мин. Дрексель целесообразно поместить в емкость с охлаждающей смесью (лед - соль).

Пробы хранятся в закрытых склянках до 3-х дней.

5. Проведение измерения

Фильтр переносят в коническую колбу, заливают 10 - 15 мл ацетона и оставляют на 1 час. Экстракцию повторяют дважды. Ацетон сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема ~ 0,2 - 0,3 мл, досуха удаляют растворитель на воздухе.

Хлороформ из дрекселя переносят в колбу для отгонки растворителей и концентрируют до объема ~ 0,2 - 0,3 мл. Досуха удаляют растворитель на воздухе. Сухой остаток количественно переносят с помощью ацетона в колбу, где находится экстракт пробы из фильтра. Объединенный экстракт доупаривают досуха, остаток растворяют в 3 мкл ацетона и далее хроматографируют. Параллельно в хроматограф вводят по 3 мкл стандартных растворов, содержащих 20, 30, 50, 100, 600 нг ципроконазола.

Метод ГЖХ

Хроматограф с термоионным детектором (ТИД).

Колонка длиной 1 м, диаметром 3 мм.

Носитель Хроматон N-AW с 5% SE-30.

Температура колонки - 210 °C.

Температура испарителя - 230 °C.

Расходы газов: азот - 3 - 32, водород 11 - 13, воздух 100 - 150 мл/мин.

                                        -10

    Рабочая шкала электрометра - 32 x 10   .

Объем вводимой пробы - 3 мкл.

Время удерживания: I пик - 2,8 мин.; II - 5,6 мин.

Количественный расчет ведут методом соотношения со стандартом путем сравнения высоты пика пробы с высотой пика соответствующего стандартного раствора, высота пика которого наиболее близка пику рабочей пробы.

6. Расчет концентрации

Концентрацию ципроконазола (альто) в воздухе (X) в мг/куб. м определяют по формуле (по сумме двух пиков):

                               C x H   x V

                                    рп    общ

                           X = ---------------,

                               h   x V   x V

                                ст    пр    20

    где:

    C - количество стандарта ципроконазола, введенного в хроматограф, нг;

    H   - высота пика рабочей пробы, мм;

     рп

    h   - высота пика стандартного раствора, мм;

     ст

    V   - объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;

     пр

    V    - общий объем рабочей пробы, мл;

     общ

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям, л.

    Метод ТСХ

    Аликвотную  часть рабочей пробы (0,1 мл) с помощью микропипетки наносят

на  хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см.

Центр  пятна  должен  быть  на  расстоянии  2 см от нижнего края пластинки.

Справа  и  слева  от  пробы  с помощью микропипетки наносят по 0,1 мл серии

стандартов,  содержащих 1, 2, 3...10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными

растворами  помещают  в  хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до

хроматографирования  залита  смесь хлороформ - ацетон (1:1). После развития

хроматограммы   пластинку  вынимают  и  оставляют  на  несколько  минут для

испарения  растворителя,  затем  пластинку  обрабатывают  из пульверизатора

раствором  бромфенолового  синего. После высушивания пластинку обрабатывают

для удаления фона  2-процентным  раствором   лимонной  (уксусной)  кислоты.

Ципроконазол  (альто)  проявляется  в виде 2-х пятен ярко-голубого цвета на

                                 1             2

светло-желтом  фоне.  Величина  R   =  0,45,  R   = 0,60. Линейный диапазон

                                 f             f

определения - 1 - 10 мкг.

Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона 10 мкг, то к рабочему раствору пипеткой добавляют дополнительное количество ацетона и анализируют более разбавленный раствор.

Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности (по сумме) окраски и площади пятен пробы и стандартных растворов.

7. Расчет концентрации

Концентрацию препарата (X) в воздухе мг/куб. м вычисляют по формуле:

                                    A x V

                               X = --------,

                                   V  x V

                                    1    20

    где:

    A - количество препарата, найденное в пробе, мкг;

    V - общий объем рабочей пробы, мл;

    V  - объем аликвоты, нанесенный на хроматографическую пластинку, мл;

     1

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям, л.

8. Требования безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами.