Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6178-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ N-ОКИСИ-2,6-ЛУТИДИНА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Торговое название: Люцис.

Люцис - композиционная смесь комплекса N-окиси-2,6-лутидина и янтарной кислоты с молибденовокислым аммонием в соотношении 99:1 соответственно.

Производитель: Молдова.

Структурная формула комплекса N-оксида-2,6-лутидина с янтарной кислотой:

          /\\      COOH

         /  \\     │

        ││   │     CH

        ││   │     │ 2                                М.м. 241,24.

    H C--\  //\    CH

     3    \//  CH  │ 2

           N     3 COOH

           │

           O

    Эмпирическая формула: C  H  NO .

                           11 15  5

    Содержание основного вещества - 99,8%.

    Растворимость - легко растворим в воде, спирте.

    Молибденовый аммоний по структурной формуле:

    (NH ) Mo O   x 4H O.                              М.м. 1236,0.

       4 6  7 24     2

    Эмпирическая формула: H  N O  Mo .

                           32 6 28  7

Содержание основного вещества - 99,9%.

Растворимость - вода.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,8 мг/куб. м.

Препарат люцис - новый регулятор роста растений.

Рекомендован для применения по вегетирующим культурам на люцерне при норме расхода 3 г/га.

2. Методика измерения концентраций люциса

в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной

и тонкослойной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на отборе проб воздуха с концентрированием на бумажный фильтр "синяя лента", извлечении препарата с фильтра подщелоченной дистиллированной водой и получении N-окси-2,6-диметилпиридина, экстрагировании последнего бензолом и последующем определении газожидкостной или тонкослойной хроматографией.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

2.2. Реактивы и материалы

Люцис, 99,9-процентный препарат.

Гидроксид натрия хч, ГОСТ 4328-77.

Натрия сульфат безводный хч, ГОСТ 4166-76.

Бензол, ГОСТ 5955-81.

Азот газообразный, ГОСТ 9283-74, в баллоне с редуктором.

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Уксусная кислота, ГОСТ 18290-72.

Иод кристаллический чда, ГОСТ 4139-79.

Крахмал, ГОСТ 10163-76.

Аммиак 25-процентный, ГОСТ 3760-74.

Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", диаметр 5,5 - 6,0, ТУ 6-09-1678-77.

2.3. Посуда и приборы

Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации.

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Весы аналитические ВЛА-200М.

Фильтродержатели.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Холодильник бытовой.

Шкаф электрический сушильный, ТУ 64-1-1411-72.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10396-75.

Колбы грушевидные, вместимостью 50 - 100 мл (для отгонки растворителя), ГОСТ 10394-72.

Холодильник, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные, цилиндры, мензурки, пробирки, ГОСТ 1770-74.

Воронки лабораторные, диаметр 50 мм, ГОСТ 8613-75.

Пипетки на 1; 5; 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ 8613-75.

Микропипетки на 0,1; 0,2; ГОСТ 20292-74.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Скальпель.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.

Камера для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.

Колба с тубусом, ГОСТ 25336-82.

Воронка Бюхнера, ГОСТ 9147-80.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ 16-536-280-74.

2.4. Отбор проб

Воздух со скоростью 2 - 5 л/мин. аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента", закрепленный в фильтродержателе. Продолжительность отбора пробы - 30 мин. Длительность хранения проб в стеклянной таре в затемненном от света месте не более 5-ти суток.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Приготовление стандартного раствора N-окси-2,6-диметилпиридина

В делительную воронку помещают 100 мл дистиллированной воды, прибавляют 50 мг препарата люцис, подщелачивают до pH 8 - 9 и экстрагируют полученный раствор бензолом трижды по 25 - 30 мл. Экстракты объединяют и фильтруют через б/в сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя. Растворитель отгоняют до исчезновения запаха бензола. Затем 10 мг полученного остатка N-окси-2,6-диметилпиридина помещают в мерную колбу на 100 мл, доводят ацетоном до метки. Получают раствор с концентрацией 100 мгк/мл. Годен к употреблению в течение 30 дней.

Рабочие растворы препарата с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках с пришлифованной пробкой вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора. Хранят рабочие растворы в холодильнике. Годны к употреблению в течение 30 дней.

2.5.2. Приготовление растворов, проявляющих реактивов, пластинок

2.5.2.1. Раствор иода в хлороформе

2,0 г кристаллического иода растворяют в 5 мл хлороформа, затем доводят объем жидкости до 100 мл хлороформом. Раствор хранят в холодильнике в затемненном месте.

2.5.2.2. Раствор крахмала

1,0 г крахмала растворяют в 100 мл дистиллированной воды, доводят до кипения, охлаждают, используют свежеприготовленный раствор.

2.5.2.3. Подготовка пластин "Силуфол"

Пластину "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон 25% - аммиак в соотношении 7:3 (об./об.).

Глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см.

После подъема фронта растворителя до верхнего конца пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе над слоем осушителя.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Подготовка пробы к анализу

Бумажный фильтр, содержащий люцис, из фильтродержателя переносят в делительную воронку и заливают 15 - 20 мл дистиллированной воды. Экстрагируют препарат из фильтра в течение 10 - 15 мин., периодически перемешивая содержимое емкости. Экстракцию повторяют дважды свежими порциями дистиллированной воды. Объединенный экстракт помещают в делительную воронку, подщелачивают до pH 8 - 9 и трижды экстрагируют бензолом по 25 - 30 мл. Объединенный экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия и упаривают на ротационном испарителе при температуре 60 °C до объема 1,0 - 1,5 мл. Остаток растворителя испаряют в токе сжатого воздуха. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона.

2.6.2. Условия хроматографирования

2.6.2.1. Газохроматографический метод

Детектор постоянной скорости рекомбинации.

Колонка стеклянная - 1000 x 3 мм.

Твердый носитель - Хромосорб-750.

Жидкая фаза - 3% OV-17.

    Температура термостата колонки - 175 °C;

                           детектора - 180 °C;

                           испарителя - 200 °C.

    Газ-носитель - азот особой чистоты.

    Скорость движения диаграммной ленты - 240 мм/час.

    Скорость потока азота через колонку - 60 мл/мин.;

                                детектор - 150 мл/мин.

                                        -12

    Рабочая шкала электрометра - 20 x 10    А.

    Время удерживания люциса - 12 мин. 40 сек.

    Объем вводимой пробы - 3 - 5 мкл.

    2.6.2.2. Метод тонкослойной хроматографии

    0,2   мл   полученного  раствора  наносят  микропипеткой  на  очищенную

пластинку  "Силуфол".  Рядом  с  пробой  наносят по 0,2 мл каждого рабочего

раствора  N-окси-2,6-диметилпиридина,  что соответствует содержанию в пятне

0,5; 1,0;  2,0  мкг  препарата.  Пластинку  помещают  в  хроматографическую

камеру,  куда  за  10 - 15 мин.  до  хроматографирования   наливают   смесь

растворителей бензол - уксусная кислота (1:1,5) в таком  количестве,  чтобы

глубина  погружения  пластинки  в  растворитель  составляла  0,5  мл. После

подъема   фронта   растворителя   от   линии   старта   на   высоту  10  мл

хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в вытяжном  шкафу  до

испарения  растворителей  и  подвергают  УФ-облучению  в  течение  10  мин.

После  чего  пластинку   орошают  2%  раствором  иода  в  хлороформе, затем

высушивают на воздухе  и  проявляют  1% водным раствором крахмала. Препарат

проявляется в виде синих пятен на  белом  фоне  с  величиной  R  = 0,6  +/-

                                                               f

0,02. Минимально детектируемое количество - 1 мкг.

2.7. Обработка результатов анализа

2.7.1. Газохроматографический метод

Для количественного анализа измеряют площади пиков проб и стандартных растворов. Содержание люциса в воздухе рабочей зоны рассчитывают по формуле:

                             G x S   x V  x 2,1

                                  пр    1

                         X = ------------------,

                               S   x V x V

                                ст        20

    где:

    X - содержание препарата люцис в воздухе рабочей зоны, мг/куб. м;

    G - содержание люциса в стандарте, мкг;

    S   - площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;

     пр

    V  - общий объем пробы, мл;

     1

    S   - площадь пика стандартного раствора, кв. мм;

     ст

    V - объем хроматографируемой пробы, мл;

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям;

    2,1 - коэффициент пересчета на люцис.

    2.7.2. Тонкослойная хроматография

                                 G x V x 2,1

                             X = -----------,

                                  V   x 0,2

                                   20

где:

X - концентрация люциса в воздухе рабочей зоны, мг/куб. м;

G - количество препарата в пятне пробы, определенное путем сравнения со стандартами, мкг;

V - окончательный объем экстракта пробы, мл;

0,2 - объем экстракта пробы, нанесенной на пластинку, мл;

    V    -  объем  пробы  воздуха,  отобранный  для анализа и приведенный к

     20

нормальным условиям, л;

2,1 - коэффициент пересчета на люцис.

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах), санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81).