"Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазина в воздухе хроматографическими методами" // Технорма.RU

Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6159-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 2-АМИНО-4-ДИМЕТИЛАМИНО-6-ХЛОР-1,3,5-ТРИАЗИНА

В ВОЗДУХЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика вещества

// \ C H N Cl.

Cl--C // \ C--NH 5 8 5

│ ││ 2

│ ││ М.м. 173,61.

N \\ / N

\\ /C

│

/ \

H C CH

3 3

2-Амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазин (АДХТ) - метаболит и полупродукт синтеза грамекса. Белое кристаллическое вещество без запаха с Т пл. 210 - 211 °C. Растворимость в воде - 0,049% (25 °C), ацетоне - 1,94%, хлороформе - 0,34%.

ОБУВ для воздуха рабочей зоны 1,5 мг/куб. м.

2. Методика измерения концентраций АДХТ

в воздухе рабочей зоны

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на использовании тонкослойной и газожидкостной хроматографии с применением пламенно-ионизационного детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр, в хлороформ и на полисорб.

2.1.2. Избирательность метода

Измерению не мешают другие триазины - полупродукты производства производных сульфанилмочевин.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Нижний предел измерения АДХТ в хроматографируемом объеме пробы 1 мкг (ТСХ) и 0,01 мкг (ГЖХ).

Нижний предел измерения АДХТ в воздухе 0,01 мг/куб. м.

Диапазон измеряемых концентраций АДХТ в воздухе от 0,01 до 2 мг/куб. м. Данные по метрологической характеристике методики представлены в таблице.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 2,0%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 2 часа (ГЖХ) и 3 часа (ТСХ).

Таблица

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ

2-АМИНО-4-ДИМЕТИЛАМИНО-6-ХЛОР-1,3,5-ТРИАЗИНА (АДХТ)

В ВОЗДУХЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

┌─────────┬──────────┬────────────┬───────────────┬───────────────────────┐

│ Метод │ Предел │ Процент │ Средняя │ Доверительный │

│измерения│измерения,│определения,│ квадратичная │ интервал (p = 0,95) │

│ │мг/куб. м │ % │ ошибка │ │

│ │ │ │ определения, │ │

│ │ │ │ мкг │ │

├─────────┼──────────┼────────────┼───────────────┼───────────────────────┤

│ГЖХ │0,01 │65 │+/- 1,1 │+/- 0,8 (n = 4, m = 4)│

│ │ │ │ │ a │

│ТСХ │0,01 │90 │+/- 0,5 │+/- 0,4 (n = 6, m = 4)│

│ │ │ │ │ a │

└─────────┴──────────┴────────────┴───────────────┴───────────────────────┘

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Ацетон чда, ТУ 6-08-3513-75.

Бензол чда, ГОСТ 5955-75.

Натрий сернокислый б/в, ч, ГОСТ 4106-76.

Этиловый эфир уксусной кислоты чда, ГОСТ 1277-75.

Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.

Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-37-9-83.

Лимонная кислота осч, ТУ 6-09-584-75.

Силикагель КСК N 2, ГОСТ 3956-76, ТУ 6-09-2523-72.

Силикагель ЛС 5/40 мю для тонкослойной хроматографии с 13% гипса (Хемапол, ЧССР).

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол R" (Хемапол, ЧССР).

Калий иодистый чда, ГОСТ 4232-74.

Крахмал растворимый чда, ГОСТ 10163-76.

Калий марганцовокислый чда, ГОСТ 20490-75, 3-процентный водный раствор.

Хлористоводородная кислота хч, ГОСТ 18290-72, 12-процентный водный раствор.

Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-66.

Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77.

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Хроматон N-AW, 0,16 - 0,20 мм, с 5% XE-60, промытый кислотой и силанизированный ДМСХ.

Хромосорб W-HP, 80/100 меш, с 3% OV-17.

Полисорб C, 60/100, ТУ 6-05-24-1313-86.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором.

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Фильтродержатели.

Склянка Дрекселя вместимостью 250 мл.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.

Водяная баня, ТУ 64-22-603-75.

Электроплитка, ТУ 92-275-76.

Поглотители Зайцева с пористой пластинкой, ТУ 25-11-1081-75.

Стеклянные концентрационные трубки (гофрированные).

Стеклянные пластинки, 15 х 15 см.

Сито капроновое, 100/120 меш.

Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок.

Камера для обработки пластинок, ТУ 25-11-430-70.

Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-63.

Эксикатор, ГОСТ 6471-73.

Сушильный шкаф, ТУ 69-1-1411-76.

Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10.

Фарфоровая ступка (d = 86), ГОСТ 9147-78.

Стеклянный водоструйный насос, МРТУ 42961-64.

Весы лабораторные ВЛА-200М.

Колбы мерные вместимостью 100 мл, ГОСТ 1770-74

2.4. Отбор пробы воздуха

Способ 1. Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенный бумажный фильтр "синяя лента" и склянку Дрекселя, содержащую 70 мл хлороформа и помещенную в охлаждающую смесь льда и хлорида натрия. Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 4 л воздуха.

Способ 2. При использовании полисорба для поглощения АДХТ воздух с объемным расходом 3 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтродержатель и концентрационную гофрированную трубку из стекла, содержащую 5 г полисорба.

Пробы можно хранить в холодильнике в течение двух недель.

2.5. Подготовка к измерению

2.5.1. Приготовление пластинок с тонким слоем силикагеля для ТСХ

35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100/120 меш, смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды в фарфоровой ступке или на аппарате для встряхивания в течение 15 минут. Около 10 г сорбционной массы наносят на стеклянную пластинку 15 x 15 см и, покачивая, равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат на воздухе в горизонтальном положении при комнатной температуре 12 часов и затем активируют в сушильном шкафу при 190 °C в течение 30 минут. Хранят в эксикаторе над слоем хлористого кальция. При использовании для приготовления пластинок силикагеля ЛС 14 г этого силикагеля смешивают с 38 мл дистиллированной воды. На одну пластинку наносят 5 - 7 г сорбционной массы и далее поступают так, как это описано выше.

2.5.2. Приготовление проявляющих реактивов для ТСХ

Проявляющий реактив N 1:

раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,25 г йодистого калия и доводят до метки дистиллированной водой;

раствор N 2 - 0,75 г растворимого крахмала заваривают в 25 мл дистиллированной воды и затем охлаждают;

пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2. Реактив готовят перед употреблением.

Проявляющий реактив N 2:

раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,4 г бромфенолового синего и доводят до метки дистиллированной водой;

раствор N 2 - в мерную колбу на 100 мл помещают 2 г азотнокислого серебра и доводят до метки дистиллированной водой; пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2 и затем 4-процентным водным раствором лимонной кислоты.

Проявляющие растворы при хранении в плотно закрытых склянках без доступа света годны для применения в течение месяца.

2.5.3. Приготовление стандартного раствора

Стандартный раствор АДХТ в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг вещества в мерной колбе на 100 мл.

2.5.4. Приготовление хроматографической колонки

Стеклянную спиральную хроматографическую колонку (длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм) заполняют хромосорбом W-HP с 3% OV-17 под вакуумом и кондиционируют при 180 °C в течение 8 - 10 часов в токе азота.

2.5.5. Построение градуировочного графика для определения АДХТ методом ГЖХ

Количественный анализ с помощью газовой хроматографии АДХТ проводят методом абсолютной калибровки. Для этого градуировочные растворы с содержанием АДХТ 3, 4, 10 и 15 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора ацетоном. Градуировочные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в холодильнике.

2 мкл каждого градуировочного раствора вводят в хроматограф и

хроматографируют при следующих условиях (хроматограф "Цвет-106" с

пламенно-ионизационным детектором): температура термостата колонок 150 °C,

температура термостата испарителя 260 °C, скорость потока газа-носителя

-12

(азот особой чистоты) 40 мл/мин., шкала электрометра 10 x 10 А,

скорость диаграммной ленты потенциометра 240 мм/час. Время удерживания АДХТ

в этих условиях 6 мин.

Хроматографирование одного стандартного раствора производят трижды. Измеряют на хроматограммах высоты пика (мм) АДХТ и строят график зависимости высоты пика АДХТ от его концентрации (мкг/мл). Полученные данные обрабатывают по методу наименьших квадратов и получают уравнение калибровочного графика в виде:

H = A + B x X,

где:

H - высота пика АДХТ на хроматограмме, мм;

X - содержание АДХТ в ацетоне, мкг/мл;

A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов.

2.6. Описание измерения

2.6.1. Измерение АДХТ с помощью тонкослойной хроматографии

При отборе пробы воздуха по способу 1 фильтр извлекают из

фильтродержателя, переносят в стакан на 100 мл, заливают 30 мл хлороформа и

оставляют на 10 минут, периодически перемешивая стеклянной палочкой.

Хлороформ сливают в круглодонную колбу со шлифом на 250 мл через слой

безводного сульфата натрия (10 г), помещенного в воронку, а фильтр

промывают двумя порциями хлороформа по 10 мл, сливая эти порции и хлороформ

из склянки Дрекселя в ту же колбу, упаривают растворитель на ротационном

испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 1 мл. Остаток

количественно наносят на хроматографическую пластинку с тонким слоем

силикагеля (могут быть использованы пластинки, приготовленные в

лабораторных условиях, и пластинки "Силуфол R"). На эту же пластинку

наносят стандартные количества (1 и 2 мкг) АДХТ в виде раствора в ацетоне и

проводят хроматографирование в системе растворителей этилацетат - хлороформ

(1:1) в хроматографической камере, насыщенной в течение 2 часов парами

подвижных растворителей. Для насыщения стенки камеры обкладываются

фильтровальной бумагой, которая пропитывается смесью подвижных

растворителей. После окончания процесса хроматографирования пластинку

извлекают из камеры и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Для обнаружения

АДХТ пластинку обрабатывают смесью N 1 и N 2 (1:1) проявляющего реактива N

2 и затем 4-процентным водным раствором лимонной кислоты. АДХТ

обнаруживается в виде синих пятен на желтом фоне с величиной R = 0,61

+/- 0,05.

Для повышения надежности идентификации АДХТ хроматографирование может

быть также проведено в системе растворителей ацетон - бензол (3:2). Для

обнаружения АДХТ пластинку предварительно помещают в эксикатор (камера для

хлорирования) на 2 минуты, на дне которого наливают смесь (1:1)

3-процентного водного раствора марганцовокислого калия и 12-процентного

водного раствора хлористоводородной кислоты (камера насыщается парами хлора

через 5 - 10 минут после помещения в нее растворов марганцовокислого калия

и хлористоводородной кислоты). Затем пластинку вынимают из эксикатора,

помещают в вытяжной шкаф на 40 минут для удаления паров хлора и

обрабатывают проявляющим реактивом N 1. АДХТ обнаруживается в виде синих

пятен на светло-голубом фоне с величиной R = 0,82 +/- 0,05 (пластинки

"Силуфол R").

При отборе пробы воздуха по способу 2 полисорб из концентрационной гофрированной трубки из стекла помещают в бюретку на 25 мл (диаметр 10 мм) с краном на конце и АДХТ элюируют 60 мл ацетона со скоростью 1 - 2 мл/мин. Элюат сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1,0 часа при периодическом помешивании, удаляют растворитель на ротационном испарителе до объема ~ 1 мл и далее поступают так, как описано выше.

2.6.2. Измерение АДХТ с помощью газожидкостной хроматографии

Подготовка проб для измерения проводится так же, как это описано для тонкослойной хроматографии (п. 2.6.1).

При отборе пробы воздуха по способу 1 объединенный хлороформный раствор сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1,0 часа при периодическом перемешивании и удаляют растворитель на ротационном испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 0,5 мл. Остаток растворителя током теплого воздуха удаляют досуха и сухой остаток количественно переносят ацетоном (~ 1 мл) в градуировочную центрифужную пробирку на 10 мл. Током теплого воздуха упаривают содержимое пробирки до 0,2 мл и 2 мкл вводят в хроматограф. Хроматографирование одной пробы проводят дважды, измеряют среднее значение высоты пика АДХТ и по калибровочному графику находят содержание АДХТ. При отборе пробы воздуха по способу 2 остаток ацетона (~ 1 мл) из круглодонной колбы на 250 мл количественно переносят в градуировочную центрифужную пробирку на 10 мл и током теплого воздуха упаривают содержимое до 0,2 мл. 2 мкл ацетонового раствора вводят в хроматограф и далее поступают так, как это описано выше.

2.7. Обработка результатов анализа

2.7.1. Метод ТСХ

Концентрацию АДХТ в воздухе C в мг/куб. м при измерении с помощью тонкослойной хроматографии вычисляют по формуле:

A x 10

C = -------,

где:

A - количество АДХТ в анализируемом объеме пробы, мг;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

условиям, л.

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей

формуле:

V x (273 + 20) x P

V = -------------------,

20 (273 + t) x 101,33

где:

V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Количественную оценку АДХТ на хроматограммах проводят путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартных растворов АДХТ или по величине площади пятен по формуле:

A - A

2 1

A = A - ------- x (S - S),

2 S - S 2

2 1

где:

A, S - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятна АДХТ в анализируемой

пробе;

A , A , S , S - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятен стандартных

1 2 1 2

растворов АДХТ с большим и меньшим содержанием по сравнению с анализируемой

пробой.

Величину площади пятен определяют, накладывая на пластинку прозрачную бумагу или кальку, - очерчивают контур пятна, переносят его на миллиметровку и подсчитывают число кв. мм, входящих в контур.

2.7.2. Метод ГЖХ

Концентрацию АДХТ в воздухе C в мг/куб. м при измерении газожидкостной хроматографией вычисляют по формуле:

(H - A) x 10 x V

C = -----------------,

B x V

где:

H - высота пика АДХТ на хроматограмме анализируемой пробы, мм (среднее значение из двух параллельных определений);

V - общий объем ацетонового раствора пробы АДХТ, мл;

A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов.

3. Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые при работе в химических лабораториях.