"Временные методические указания по определению набу в эфирных маслах методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6110-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НАБУ В ЭФИРНЫХ МАСЛАХ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

(В дополнение к N 3880-85)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

1.1. Химическое название: 3-гидроокси-5-(2-этилтиопропил)-2-/1-(этоксиимино)бутил/-циклогексен-2-он-1.

Структурная формула:

/NOC H

C/ 2 5

/ \

OH / C H

\_____/ 3 7 C H NO .

// \\=O 17 29 2

\ ___ /

C H S / --- М.м. 327,5 г/моль.

2 5 \CH-CH

/ 2

1.2. Синонимы: сетоксидим, поаст.

1.3. В чистом виде маслянистая жидкость без запаха,

-2

температура кипения 90 °C при 5,3 x 10 Па, растворим в

органических растворителях, растворимость в воде 25,0 мг/л при 25

°C и pH 4. Устойчив в щелочных средах. ЛД для крыс 3200 - 3500

мг/кг. Рекомендуется для борьбы с сорняками на розе, мяте, шалфее,

лаванде.

2. Методика определения набу в эфирных маслах

методом тонкослойной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении набу из растворов эфирных масел в н-гексане ацетонитрилом, промывке экстракта смесью растворителей н-гексан - диэтиловый эфир, реэкстракции из разбавленного ацетонитрильного раствора в диэтиловый эфир и определении методом тонкослойной хроматографии на пластинках "Силуфол".

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Минимально определяемое количество набу: 1 мкг.

Нижний предел определения в эфирном масле: 0,1 мг/кг.

Среднее значение определения при n = 5, a = 0,95: 65,3%.

Стандартное отклонение: +/- 3,4%.

Доверительный интервал среднего при n = 5, a = 0,95: +/- 8,5%.

Размах варьирования: 53,7 - 87,9%.

2.1.3. Избирательность метода

Метод селективен в присутствии хлор- и фосфороорганических пестицидов, определению не мешают фенилзамещенные мочевины, нитрофениловые эфиры.

2.2. Реактивы и растворы

Гексан, ТУ 6-09-3375-78, ч, CH (CH ) CH .

3 2 4 3

Ацетонитрил, МРТУ 6-09-3534-74, ч, CH CN.

Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76, хч, Na SO .

2 4

Диэтиловый эфир, ГОСТ 6262-79, ч, (C P ) O.

2 5 2

Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-76, ч.

Лимонная кислота, ГОСТ 3652-69, чда.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, хч, (CH ) CO.

3 2

Толуол, ГОСТ 5789-69, чда, C H CH .

6 9 3

Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-75, хч, AgNO .

Этилацетат, ТУ 6-09-6515-70, хч.

Стандартные растворы набу в ацетоне с содержанием 1 мкг/мл и 10 мкг/мл.

Для приготовления стандартного раствора взвешивают на аналитических весах навеску набу 10 мг +/- 0,62 мг, помещают в мерную колбу емкостью 100 мл. Навеску растворяют в 10 - 15 мл ацетона и доводят до метки тем же растворителем. Раствор содержит 100 мкг/мл набу. Из раствора пипеткой переносят в две мерные колбы на 100 мл 10 мл и 1 мл раствора соответственно и доводят до метки ацетоном. Растворы содержат 10 мкг/мл и 1 мкг/мл набу соответственно. Растворы стабильны при хранении в холодильнике не более месяца, т.к. при более длительном хранении на хроматографической пластинке образуются дополнительно еще два пятна.

Проявляющие реактивы.

1. Водный раствор азотнокислого серебра с массовой долей 2%; 2. Ацетоновый раствор бромфенолового синего с массовой долей 0,4%; 3. Водный раствор лимонной кислоты с массовой долей 2%.

2.3. Приборы и посуда

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Воронка ВД-2-500-29/32, хс, ГОСТ 25336-82.

Воронки химические типа В, ГОСТ 25336-82.

Колбы плоскодонные типа КНКШ, ГОСТ 25336-82.

Колбы Кьельдаля 1-250-29/32 ТС, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл и 1000 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 1 и 10 мл.

Цилиндр мерный 1-100, ГОСТ 1770-74.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.

Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.

Весы ВЛР-200, ГОСТ 24104-80, 2-й класс.

Весы ВЛК-500, ГОСТ 24104-80.

Гири Г-2-210, ГОСТ 7328-82.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.

Пластинки "Силуфол", производство ЧССР.

Пластинки для ВЭТСХ.

Допускается применение аппаратуры и посуды с аналогичными техническими и метрологическими характеристиками не ниже указанных в стандарте.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор, хранение и доставка проб

Отбор, хранение и доставку проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР N 2051-79 от 21.08.1979. Для анализа отбирают среднюю пробу эфирного масла 10 г.

2.4.2. Подготовка и очистка реактивов

Органические растворители перед началом работы очистить по соответствующим методикам и перегнать (2), сульфат натрия прокалить при 300 - 400 °C. Пластинки для ТСХ и "Силуфол" активировать в термостате при 100 °C в течение 1 часа или под УФ-лампой в течение 10 мин.

2.5. Проведение определения

Навеску массой 10 г с записью результатов взвешивания до первого десятичного знака, берут на технических весах 10 г эфирного масла мяты, лаванды, розы, шалфея, помещают в делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана, выдерживают 10 мин. Прибавляют 50 мл ацетонитрила, встряхивают и отбрасывают верхний слой. Оставшийся раствор промывают смесью растворителей: н-гексан - диэтиловый эфир (7:1), 3 x 50 мл, отбрасывая верхний слой. В делительную воронку на 500 мл помещают 200 мл 10-процентного сульфата натрия и переносят оставшийся после промывки раствор. Реэкстрагируют набу диэтиловым эфиром, 3 x 50 мл, собирая верхний слой и пропуская его через 50 г безводного сульфата натрия. Объединенные экстракты концентрируют досуха на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. К сухому остатку добавляют 0,5 мл н-гексана и микрошприцем наносят пробу на хроматограмму.

2.5.2. Хроматография в тонком слое сорбента

Анализируемую пробу количественно переносят на

хроматографические пластинки "Силуфол" или для ТСХ, рядом наносят

стандартные растворы набу (3 - 7 - 15 мкг). Затем пластинки

помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную

подвижной фазой. В качестве основной подвижной фазы используется

смесь ацетон - гексан - этилацетат (22,6:66,6:11,2). R = 0,46. С

целью увеличения надежности идентификации набу предлагается

использовать альтернативные фазы: ацетон - гексан - уксусная

кислота (19,5:20,0:0,5), R = 0,30, ацетон - толуол (5 - 95), R =

f f

0,30.

После поднятия фронта подвижной фазы до 10 см пластинку из камеры извлекают, высушивают на воздухе до полного удаления растворителей.

Обрабатывают проявляющим раствором N 1, затем N 2. Набу проявляется в виде темно-синего пятна на светло-желтом фоне.

2.6. Обработка результатов

Содержание набу в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

A x K

X = -----,

где:

A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

P - навеска, мл;

X - содержание набу в пробе, мг/л;

K - поправочный коэффициент, учитывающий потери набу в процессе анализа (K = 165). Содержание микроколичеств набу в пробе вычисляют как среднее трех параллельных определений.

3. Техника безопасности

При выполнении операций по определению набу в эфирных маслах следует руководствоваться требованиями при работе с соединениями третьего класса токсичности и легколетучими растворителями.