"Временные методические указания по хроматографическому определению ивина и его метаболита 2,6-лутидина в воде, овощах (картофель, огурцы, томаты)" // Технорма.RU

Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6079-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИВИНА И ЕГО МЕТАБОЛИТА

2,6-ЛУТИДИНА В ВОДЕ, ОВОЩАХ (КАРТОФЕЛЬ, ОГУРЦЫ, ТОМАТЫ)

(Дополнение к "Методическим указаниям по хроматографическому

определению ивина в воде и овощах" N 4327-87 от 08.06.87)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика соединений

Ивин - N-окись 2,6-диметилпиридина

N-окись 2,6-лутидин

// \ C H NO.

// \ 7 9

│ ││

/\\ /\ М.м. 123,18.

H C \\N/ CH

3 \/ 3

│

Химически чистое вещество представляет собой бесцветную жидкость со слабым специфическим запахом с температурой кипения 240 °C. Легко растворяется в воде, спирте, хлороформе, ацетоне и других органических растворителях.

Ивин - малотоксичное соединение (ЛД для крыс составляет 1717

мг/кг, для мышей - 1497 мг/кг).

Препарат применяется в виде водных растворов для предпосевной обработки семян овощных культур или клубней картофеля.

ПДК в воде водоемов 0,02 мг/л, МДУ в овощах 0,04 мг/кг.

2,6-лутидин

2,6-диметилпиридин

//\

// \ C H N.

│ ││ 7 9

/\\ /\

H C \\/ CH М.м. 107,15.

3 │ 3

Химически чистое вещество представляет собой бесцветную жидкость с пиридиновым специфическим запахом. Температура кипения 144 °C. Растворим в спирте, ацетоне, воде, хлороформе, диэтиловом эфире.

ПДК в воде водоемов и МДУ в пищевых продуктах не установлены.

2. Методика определения ивина и его метаболита

2,6-лутидина в воде, овощах

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на извлечении ивина и 2,6-лутидина из подщелоченных проб органическим растворителем, концентрировании экстрактов, кислотной очистке (овощи) и хроматографировании в тонком слое силикагеля. Зоны локализации обнаруживаются раствором бромкрезолового пурпурного после ультрафиолетового облучения пластинок.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии близких по области применения и структуре следующих соединений: гидрела, дигидрела, хлорхолинхлорида, морфола, морфонола, алара, гибберелина и некоторых производных пиридина-нитрапирина, 6-хлорпиколиновой кислоты, 2-пиколиновой кислоты, 2,6-дипиколиновой кислоты.

2.1.3. Метрологическая характеристика методики (n = 5, p = 0,95)

┌─────────┬────────────────────────────────────────────────────────────────────┐

│Анализи- │ Метрологические параметры │

│руемый ├───────┬────────────┬───────────┬───────────┬─────────┬─────────────┤

│объект │предел │ диапазон │ средний % │стандартное│ доверит.│относительное│

│ │опред.,│определяемых│обнаружения│отклонение │ интервал│ стандартное │

│ │ мг/кг │ конц., │ _ │ _ │ │ отклонение │

│ │ │ мг/кг (л) │ с │ S │ E │ Sr, % │

├─────────┼───────┼────────────┼───────────┼───────────┼─────────┼─────────────┤

│ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │

├─────────┴───────┴────────────┴───────────┴───────────┴─────────┴─────────────┤

│ Ивин │

├─────────┬───────┬────────────┬───────────┬───────────┬─────────┬─────────────┤

│Вода │0,02 │0,02 - 0,1 │98,4 │+/- 2,78 │+/- 1,297│+/- 2,82 │

│Картофель│0,08 │0,08 - 0,1 │94,0 │+/- 3,08 │+/- 3,820│+/- 3,00 │

│Томаты │0,08 │0,08 - 0,1 │93,0 │+/- 2,25 │+/- 2,780│+/- 2,42 │

│Огурцы │0,08 │0,08 - 0,1 │94,0 │+/- 3,37 │+/- 4,170│+/- 3,58 │

│ 2,6-лутидин │

│Вода │0,04 │0,04 - 0,1 │97,0 │+/- 2,69 │+/- 3,78 │+/- 2,76 │

│Картофель│0,08 │0,08 - 0,1 │85,0 │+/- 1,69 │+/- 1,97 │+/- 1,88 │

│Томаты │0,08 │0,08 - 0,1 │81,0 │+/- 2,83 │+/- 1,17 │+/- 3,49 │

│Огурцы │0,08 │0,08 - 0,1 │83,0 │+/- 2,74 │+/- 1,13 │+/- 3,30 │

└─────────┴───────┴────────────┴───────────┴───────────┴─────────┴─────────────┘

2.2. Реактивы и материалы

Ивин, хч. Стандартный раствор в ацетоне, содержащий 100 мкг/мл, хранят в холодильнике не более 3-х месяцев.

2,6-лутидин, хч. Стандартный раствор в ацетоне, содержащий 100 мкг/мл, хранят в холодильнике не более одного месяца.

Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74.

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.

Натр едкий, хч, ГОСТ 4328-77, 15-процентный водный раствор.

Хлористоводородная кислота конц., ч, ГОСТ 3118-77, 1М водный раствор.

Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-76.

Бромкрезоловый пурпурный, чда, ТУ 6-09-1386-76, 0,3% раствор в 80% этиловом спирте с добавлением на 100 мл 1,5 мл 15% раствора натра едкого.

Этиловый спирт, хч, ТУ 6-1710-77.

Бутиловый спирт, чда, ГОСТ 6006-78.

Муравьиная кислота, чда, ГОСТ 5848-73.

Пластинки хроматографические "Силуфол" UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15.

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.

Прибор для отгонки растворителей, ТУ 25-11-917-76, тип ИР-1М.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

Колбы конические, ГОСТ 20292-74, на 250 мл.

Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на 100 мл.

Воронки делительные, ГОСТ 23932-79, вместимостью 500 мл.

Воронки химические, ГОСТ 23932-79.

Микропипетки на 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.

Цилиндры мерные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-79.

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79). Отобранные пробы анализировать сразу.

2.5. Описание определения

2.5.1. Экстракция

Вода. 50 мл воды помещают в коническую колбу, добавляют 2 мл 15-процентного раствора натра едкого и экстрагируют хлороформом (30 мл) на аппарате для встряхивания в течение 1 часа. Экстракцию повторяют еще дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт высушивают безводным сернокислым натрием и отгоняют растворитель на ротационном испарителе досуха при температуре 30 °C. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку при помощи ацетона (3 x 0,5 мл) и хроматографируют.

Овощи (картофель, огурцы, томаты). 25 г пробы измельчают, помещают в плоскодонную колбу, добавляют 2 мл 15-процентного раствора натра едкого, заливают 30 мл хлороформа и оставляют на 2 часа, периодически интенсивно встряхивая. Экстракцию повторяют еще дважды хлороформом по 30 мл. Объединенные экстракты отфильтровывают через фильтр с безводным сернокислым натрием в круглодонную колбу. Растворитель отгоняют на ротационном испарителе досуха при температуре 30 °C. К сухому охлажденному остатку прибавляют 10 мл раствора 1М хлористоводородной кислоты, тщательно ополаскивают колбу и переносят через фильтр в делительную воронку. Колбу еще дважды (по 5 мл) промывают раствором хлористоводородной кислоты и сливают в ту же делительную воронку. Объединенный экстракт нейтрализуют раствором натра едкого, затем добавляют еще 2 мл 15-процентного раствора натра едкого (pH раствора 11) и экстрагируют хлороформом. Далее поступают аналогично анализу воды.

2.5.2. Условия хроматографирования

Хроматографирование проводят в системе бутиловый

спирт - муравьиная кислота - вода в соотношении 7:3:1. После

хроматографирования пластинку высушивают и выдерживают под

ртутно-кварцевой лампой в течение 25 минут на расстоянии 15 - 20

см. Затем пластинку опрыскивают раствором бромкрезолового

пурпурного. При этом пластинка окрашивается в фиолетовый цвет без

видимых зон локализации соединений. Затем пластинку оставляют на

воздухе на 2 - 3 мин., фон пластинки становится желтым, а зоны

локализации соединений проявляются в виде серых пятен. Далее пятна

закрепляют на пластинке путем обработки 15% раствором натра

едкого. Ивин и 2,6-лутидин при этом проявляются в виде фиолетовых

пятен на сером фоне с величиной R 0,60 и 0,25 соответственно.

2.6. Обработка результатов анализа

Количественная оценка проводится путем сравнения площадей и интенсивности окраски пятен проб и стандартных растворов.

Содержание ивина и 2,6-лутидина в пробе определяют по следующей формуле:

A x S

X = ------,

P x S

где:

X - содержание соединений в пробе, мг/кг (л);

A - количество соединений в пятне стандартного раствора, мкг

(в диапазоне линейности);

S - площадь стандартного раствора, кв. мм;

S - площадь пятна пробы, кв. мм;

P - количество анализируемой пробы, мл (г).

3. Требования техники безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N 2455-81 от 20.10.81).