Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6070-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИЗАТРИНА В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

                    O                                  C  H  O .

    H C-C=CH───┤\  ││                                   22 26 3

     3  │      │ \_C _O_CH ─┬┬─┬┐      _____

       CH  H C-│ /        2 ││ ││_CH _//   \\          М.м. 338,4.

         3  3  │/            \ /    2 \ ___ /

               CH             O         ---

                 3

Изатрин (ресметрин, бензилфурон).

Действующее начало препарата - (+)-цис,транс(2-бензилфурил-4-метил)хризантемат. Полностью растворяется в 10% спирте этиловом с образованием бесцветной жидкости.

Внешний вид: воскоподобная масса, соломенно-желтого цвета, с резким запахом. Т. пл. 43 - 46 °C, Т. кип. 180 °C. Легко гидролизуется при действии кислот и щелочей. Препарат эффективен в малых дозировках (0,0025 - 0,01% действующего начала) в борьбе с широким рядом вредителей - инсектицид контактного действия.

    ЛД    для  белых  крыс при внутрижелудочном введении равна 840

      50

мг/кг, при ингаляционном - 3650 мг/куб. м.

2. Методика определения

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции изатрина органическим растворителем, очистке экстракта и последующем хроматографировании.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций - 0,02 - 0,4% мг/кг.

Предел обнаружения - 1 мкг.

Число параллельных определений - 5.

                                  _

    Среднее значение определения (x) - 87%.

Стандартное отклонение (S, %) - +/- 8,5%.

Доверительный интервал определения при p = 0,95 и n = 5 87 +/- 10,5%.

2.2. Реактивы и материалы

Изатрин хч.

Бензол хч, ГОСТ 5955-81.

Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Фосфорно-молибденовая кислота, ТУ 6-09-3540-78, 5% водный раствор.

Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Систему подвижных растворителей готовят за 20 минут до хроматографирования: гексан - бензол в соотношении 1:1.

Стандартный раствор изатрина в хлороформе, содержащий 100 мкг/мл, готовили в мерной колбе из рабочего раствора.

Рабочий раствор готовят следующим образом: в мерную колбу (25 или 50 мл) со шлифом наливают 10 - 15 мл хлороформа, взвешивают, добавляют 1 - 2 капли изатрина, взвешивают и доводят объем до метки. По разнице весов между вторым и первым взвешиванием находят навеску пестицида, рассчитывают концентрацию его. Рабочие и стандартные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в темном и прохладном месте.

2.3. Приборы и посуда

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.

Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР).

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.

Аппарат для встряхивания, ТУ 25-11-917-79.

Посуда лабораторная, ГОСТ 25336-82.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.

Сушильный шкаф.

2.4. Отбор, хранение и доставка проб

2.4.1. Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, от 21.08.1979, за N 2051-79.

2.5. Проведение определения

Навеску 25 - 40 г измельченного растительного материала помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 80 мл смеси ацетон - вода в соотношении 1:1 по объему. Экстрагирование проводят встряхиванием в течение 30 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр. Экстракцию повторяют еще два раза. Объединяют экстракты и переносят в делительную воронку. Прибавляют 200 мл дистиллированной воды, перемешивают и реэкстрагируют изатрин дважды по 30 мл гексаном. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °C до объема 0,2 - 0,5 мл.

2.5.1. Условия хроматографирования

Сконцентрированную пробу количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Справа и слева от пробы наносят стандартные растворы пестицида, содержащие 1, 2, 5, 10 мкг препарата.

    Пластинку     с     нанесенными    растворами    помещают    в

хроматографическую    камеру,    в   которую   за   30   мин.   до

хроматографирования  залита смесь бензол - гексан (1:1 по объему).

После  поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см  пластинку

вынимают  и  оставляют на несколько минут на воздухе для испарения

подвижного  растворителя.  После  этого  пластинку обрабатывают из

пульверизатора раствором фосфорно-молибденовой кислоты и нагревают

в  сушильном  шкафу  при  температуре 60 °C в течение 5 - 7 минут.

Препарат  проявляется  в  виде  пятен синего цвета на желтом фоне.

Величина R  = 0,36 +/- 0,05.

          f

2.6. Обработка результатов анализа

Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора.

Измерение площади проводится с помощью миллиметровой бумаги. Строится калибровочный график зависимости препарата в мкг от площади пятен. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пробе соблюдается в интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть пробы (0,1 - 0,2 мл) параллельной пробы. Содержание препарата в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:

                               A x S

                                    2

                           X = ------,

                               P x S

                                    1

    где:

    X - содержание изатрина в анализируемой пробе;

    A - содержание препарата в стандартном растворе, мг/кг;

    S  - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;

     1

    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;

     2

    P - вес пробы, взятой на анализ, г.

3. Требования безопасности

Соблюдать все требования безопасности, рекомендованные для работы с летучими органическими растворителями и со среднетоксичными пестицидами.