"Методические указания по определению промета в растениях, почве и воде методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

4 октября 1989 г. N 4698-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРОМЕТА В РАСТЕНИЯХ, ПОЧВЕ

И ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Л.И. Бублик, Н.В. Федоренко (УкрНИИЗР). Рекомендованы группой экспертов.

Краткая характеристика препарата. Действующее вещество

промета - N-(N-бутоксикарбонил-N-метиламиносульфенил)-O-(2,3-дигидро-2,2-

диметилбензофурил-7)-N-метилкарбамат. Брутто-формула C H N O S.

18 26 2 5

Молекулярная масса 382,5. Общепринятое название - фуратиокарб.

Растворимость в воде при 20 °C - 10 мг/л. Растворим в метаноле,

изопропаноле, н-октаноле, ацетоне, циклогексане, метиленхлориде, толуоле,

гексане, хлороформе.

Промет - экспериментальный системный почвенный инсектицид контактного и кишечного действия против комплекса почвообитающих вредителей кукурузы, картофеля и других культур. Обладает нематоцидными свойствами. Промет разлагается в растениях и почве с образованием карбофурана.

Принцип метода. Метод основан на извлечении промета и его метаболитов из исследуемой пробы хлороформом, гексаном или водой, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3; очистке экстракта путем перераспределения в двух несмешивающихся растворителях и определении препарата методом хроматографии в тонком слое.

Метрологическая характеристика метода. Минимальное детектируемое количество фуратиокарба и карбофурана 0,1 мкг. Предел обнаружения в воде 0,0004 мг/л, почве - 0,001 мг/кг, свекле, озимой пшенице (зеленая масса), зерне - 0,03 мг/кг, картофеле (клубни) - 0,05 мг/кг, свекле (обработанные семена) - 0,5 мг/кг. Среднее значение определения 82 - 95%.

Избирательность метода. Метод специфичен.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Этиловый спирт ректиф.

Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота. Уксусная кислота. Вода

дистиллированная. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Гидроксид калия х.ч.

Йодид калия х.ч. Перманганат калия ч.д.а. п-Нитроанилин ч.д.а. Нитрит

натрия х.ч. Соли диазония: прочный синий Б, прочный красный Б, прочный

голубой Б (бис-диазотированный о-дианизидин). о-Толидин х.ч.

2,6-Дибром-N-хлорхинонимин. Пластинки "Силуфол" УФ . Бумага

254

фильтровальная. Фуратиокарб 99,8-процентный. Карбофуран 99,8-процентный.

Промет 40-процентный с.п. Стандартные растворы для приготовления

стандартных растворов (0,1-процентный) 0,025 г 99,8-процентных препаратов

или 0,063 г 40-процентного с.п. растворяют в 25 мл ацетона. В мерную колбу

на 100 мл переносят 10 мл полученного раствора и ацетоном доводят до метки.

Хранят растворы в темных склянках с притертыми пробками в холодильнике

2 мес. Проявляющие реагенты: 15-процентный спиртово-водный раствор

гидроксида калия (15 г KOH растворяют в 60 мл этанола и 40 мл воды);

0,01-процентный раствор соли диазония в ацетоне (0,01 г соли диазония

растворяют в 100 мл ацетона). Хранят в темной склянке 3 сут.;

0,5-процентный раствор 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в гексане (0,5 г

2,6-дибром-N-хлорхинонимина растворяют в 100 мл гексана); 0,1-процентный

раствор п-нитроанилина в 0,1 н хлороводородной кислоте (0,1 г

п-нитроанилина растворяют в 100 мл 0,1 н раствора хлороводородной

кислоты); 4-процентный водный раствор нитрита натрия (4 г NaNO растворяют

в 100 мл дистиллированной воды); раствор для хлорирования (смешивают равные

объемы 3-процентного раствора перманганата калия и хлороводородной

кислоты). Хранят в холодильнике; 0,2 г о-толидина растворяют в 2 мл

уксусной кислоты, 0,8 г йодида калия - в 2 мл дистиллированной воды.

Растворы смешивают и доводят водой до 200 мл.

Приборы и посуда. Весы аналитические и технические. Аппарат для

встряхивания. Вакуумный насос. Хроматоскоп. Электроплитка. Водяная баня.

Колбы: мерные на 100 мл; плоскодонные на 250 мл; круглодонные на 250 мл.

Мерные цилиндры на 50 мл. Микропипетки на 0,1 мл. Воронки делительные на

200; 500 мл. Эксикатор. Камера для хроматографирования. Пульверизатор

стеклянный для обработки пластинок. Пластинки "Силуфол" УФ .

254

Ход анализа. Экстракция. В делительную воронку помещают 250 мл воды. Экстрагируют промет и его метаболиты хлороформом (2 раза порциями по 50 мл) или гексаном (3 раза по 50 мл), встряхивая каждый раз по 5 мин. Растворитель сливают через фильтр с 15 г безводного сульфата натрия в круглодонную колбу и отгоняют на ротационном испарителе или водяной бане при температуре воды в ней 30 °C до объема 0,2 - 0,5 мл.

Почва (чернозем). Навеску (50 г) воздушно-сухой почвы (чернозема) растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 100 мл воды, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку и дважды проводят реэкстракцию хлороформом порциями по 50 мл или трижды гексаном порциями по 50 мл. Далее поступают так же, как и при экстракции воды.

В коническую колбу помещают 20 г измельченного образца сахарной или кормовой свеклы (зеленая масса, корнеплоды), озимой пшеницы (зеленая масса, зерно урожая) и заливают 200 мл воды, подкисленной до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают в делительную воронку. Проводят реэкстракцию, как описано выше. Экстрагируемые примеси не мешают определению.

В коническую колбу помещают 0,2 г обработанных семян сахарной или кормовой свеклы и заливают 20 мл хлороформа. Встряхивают 20 мин. Экстракт переносят через воронку с бумажным фильтром с 10 г безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу и отгоняют хлороформ на ротационном испарителе или на водяной бане до 0,2 - 0,5 мл. Остаток переносят через воронку в мерную пробирку, промывают колбу хлороформом и доводят объем экстракта до 5 мл. Аликвоту наносят капилляром (5 - 10 мкл) на пластинку.

В коническую колбу переносят 50 г измельченного образца клубней картофеля, заливают 100 мл хлороформа или гексана (2 x 100 мл), экстрагируют при встряхивании 20 мин. Полученный экстракт переносят через воронку с бумажным фильтром и 15 г безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу, отгоняют растворитель на водяной бане и остаток сушат досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, переносят в делительную воронку и проводят реэкстракцию дважды по 30 мл хлороформа. Дальнейшие операции проводят, как описано выше.

Хроматографирование. После отгонки растворителя остаток наносят

капилляром в центр пластинки с силуфолом на расстоянии 1,5 см от нижнего

края. Слева и справа микрошприцем или микропипеткой наносят стандартные

растворы промета с содержанием 0,5 - 20 мкг. Затем пластинку помещают в

хроматографическую камеру с подвижной фазой, которой служит смесь н-гексана

с ацетоном в соотношении 3:2 или хлороформ. Когда фронт растворителя

поднимается на высоту 10 см, пластинку вынимают и сушат на воздухе.

Пластинку облучают УФ-светом 2 - 3 мин., после чего на белом фоне сорбента

проявляются желтые пятна промета и метаболитов, затем опрыскивают

проявляющим реагентом N 1, подсушивают на воздухе и опрыскивают реагентом

N 2 (цвет пятен малиновый) или N 3 (цвет пятен синий) либо смесью

реагентов N 4 и N 5 в соотношении 10:1 (цвет пятен бордовый). Обработав

пластинку парами хлора (реагент N 6), проветрив ее, опрыскивают реагентом

N 7. Промет и карбофуран при этом проявляются в виде сине-фиолетовых пятен

на сером фоне. В подвижной фазе гексан-ацетон (3:2) для промета R 0,65,

для карбофурана R 0,50. В хлороформе R промета 0,50, а карбофурана 0,30.

f f

Обработка результатов анализа. Содержание промета (X, мг/кг или мг/л)

определяют сравнением площади пятен стандартов и проб и рассчитывают по

формуле:

X = ---,

где:

A - количество препарата в анализируемой пробе, мкг;

P - масса анализируемой пробы, г;

S и S - площади пятен соответственно стандартного и анализируемых

1 2

растворов, кв. мм.

Требования безопасности. Необходимо выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами и щелочами.