Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

В.И.ЧИБУРАЕВ

28 сентября 1989 г. N 5102-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ФЛУОРИМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ

4-ХЛОР-N(2-ФУРИЛМЕТИЛ)-5-СУЛЬФАМОИЛАНТРАНИЛОВОЙ КИСЛОТЫ

(ФУРАСЕМИДА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 26) предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также НИИ Министерства здравоохранения Российской Федерации и других заинтересованных министерств и ведомств. Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ", одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профпатологии", утверждены МЗ СССР 28.09.1989.

Методические указания разработаны и утверждены с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания являются действующими в соответствии с Постановлением Госкомитета РСФСР санэпиднадзора от 06.02.92 N 1 "О порядке действия на территории Российской Федерации нормативных актов бывшего Союза ССР в области санэпидблагополучия населения".

                   O

                  //

    H N-O S      C

     2   2 \// \/ \

           │   ││  OH

           /\\ /\          ┌┬─┬┐

         Cl      N-CH ─────││ ││

                 │   2      \ /

                 H           O

Фурасемид - 4-хлор-N(2-фурилметил)-5-сульфамоилантраниловая кислота - представляет собой кристаллический порошок белого или белого с кремовым оттенком цвета (Т пл. 204 - 209 °C с разл.). Практически нерастворим в воде, растворим в 95% спирте, легко растворим в 1 н растворе едкого натра.

Обладает общетоксическим действием.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Рекомендуемая ПДК в воздухе - 0,01 мг/куб. м.

Характеристика метода

Определение основано на реакции взаимодействия фурасемида с солями скандия и последующем флуориметрировании образовавшегося флуоресцирующего соединения при длине возбуждающего света 355 нм и регистрации излучения флуоресценции при 420 нм.

Отбор проб с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в анализируемом растворе 0,5 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе 0,005 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,005 до 0,045 мг/куб. м.

Метод специфичен в условиях производства на стадиях сушки, просеивания и фасовки.

Суммарная погрешность не превышает +/- 20%.

Приборы, аппаратура, посуда

Аспирационное устройство.

Фильтродержатели.

Пипетки мерные на 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74Е.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пробирки с притертыми пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-73.

Флуориметр с первичным светофильтром с областью пропускания от 320 до 370 нм и вторичным с областью пропускания от 410 до 440 нм.

Реактивы, растворы и материалы

Фурасемид фармакопейный.

Стандартный раствор N 1, содержащий 100 мкг/мл фурасемида, готовят растворением 0,01 г фурасемида в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл. Срок хранения раствора в холодильнике при температуре 4 °C - 15 дней.

Стандартный раствор N 2 с содержанием 0,5 мкг/мл готовят соответствующим разведением дистиллированной водой стандартного раствора N 1. Для этого в мерную колбу вместимостью 100 мл прибавляют 0,5 мл раствора N 1 и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.

Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5963-67.

Скандия хлорид, ч, ТУ 6-09-04-74-74.

Фильтры АФА-ВП-10.

Отбор пробы воздуха

Воздух со скоростью 20 л/мин. аспирируют через фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 200 л воздуха.

Подготовка к измерению

Градуировочные растворы готовят согласно таблице.

┌─────────┬───────────────┬────────────────┬────────────────────────┐

│  Номер  │  Стандартный  │Дистиллированная│Содержание фурасемида в │

│стандарта│раствор N 2, мл│    вода, мл    │градуировочном р-ре, мкг│

├─────────┼───────────────┼────────────────┼────────────────────────┤

│    1    │       0       │       9        │            0           │

│    2    │       1       │       8        │           0,5          │

│    3    │       2       │       7        │            1           │

│    4    │       4       │       5        │            2           │

│    5    │       6       │       3        │            3           │

│    6    │       8       │       1        │            4           │

│    7    │       9       │       0        │           4,5          │

└─────────┴───────────────┴────────────────┴────────────────────────┘

Во все пробирки шкалы приливают по 1 мл 2-процентного раствора хлорида скандия и измеряют интенсивность флуоресценции полученных растворов на флуориметре с возбуждением флуоресценции в области 365 нм и излучением флуоресценции 440 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему фурасемид (раствор N 1 по таблице). Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения интенсивности флуоресценции градуировочных растворов (%), на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания фурасемида в растворах (мкг).

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в пробирку, прибавляют 4 мл этанола и оставляют на 5 минут, периодически встряхивая для лучшего растворения вещества. Коэффициент десорбции фурасемида составляет 0,94. К 2 мл раствора прибавляют 7 мл дистиллированной воды, 1 мл 2% водного раствора хлорида скандия, перемешивают и флуориметрируют относительно стандартных растворов. Интенсивность флуоресценции полученного анализируемого раствора пробы измеряют аналогично градуировочным растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробе.

Количественное определение фурасемида (мкг) в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Содержание фурасемида (мг/куб. м) в воздухе вычисляют по формуле:

                                    а x в

                             C = ------------,

                                 V x б x 0,94

где:

а - содержание фурасемида в анализируемом растворе пробы, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

0,94 - степень десорбции;

V - объем воздуха, л, взятый для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °C и давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

                              V  x (273 + 20) x p

                               t

                        V   = -------------------,

                         ст   (273 + t°) x 101,33

    где:

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

     ст

    p - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

    t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

    Для   удобства  расчета V   следует пользоваться таблицей коэффициентов

                             ст

(см.   Приложение   2).  Для  этого  надо  умножить  V  на  соответствующий

                                                      t

коэффициент.

Приложение 2

КОЭФФИЦИЕНТ K ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА

К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ

┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐

│ T, │                        Давление P, кПа/мм рт. ст.                       │

│ °C ├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬───────┬───────┬───────┬───────┤

│    │97,33/│97,86/│98,4/ │98,93/│99,46/│ 100/ │100,53/│101,06/│101,33/│101,86/│

│    │ 730  │ 734  │ 738  │ 742  │ 746  │ 750  │  754  │  758  │  760  │  764  │

├────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼───────┼───────┼───────┼───────┤

│-30 │1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963 │1,2026 │1,2058 │1,2122 │

│-26 │1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1768 │1,1831 │1,1862 │1,1925 │

│-22 │1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581 │1,1643 │1,1673 │1,1735 │

│-18 │1,1036│1,1097│1,1158│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399 │1,1400 │1,1490 │1,1551 │

│-14 │1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224 │1,1284 │1,1313 │1,1373 │

│-10 │1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053 │1,1112 │1,1141 │1,1200 │

│-6  │1,0540│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887 │1,0945 │1,0974 │1,1032 │

│-2  │1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726 │1,0784 │1,0812 │1,0869 │

│0   │1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648 │1,0705 │1,0733 │1,0789 │

│+2  │1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571 │1,0627 │1,0655 │1,0712 │

│+6  │1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419 │1,0475 │1,0502 │1,0557 │

│+10 │0,9944│0,9999│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272 │1,0326 │1,0353 │1,0407 │

│+14 │0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128 │1,0183 │1,0209 │1,0263 │

│+18 │0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989 │1,0043 │1,0069 │1,0122 │

│+20 │0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921 │0,9974 │1,0000 │1,0053 │

│+22 │0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853 │0,9906 │0,9932 │0,9985 │

│+24 │0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787 │0,9839 │0,9865 │0,9917 │

│+26 │0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721 │0,9773 │0,9799 │0,9851 │

│+28 │0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9565│0,9605│0,9657 │0,9708 │0,9734 │0,9785 │

│+30 │0,9288│0,9339│0,9891│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594 │0,9645 │0,9670 │0,9723 │

│+34 │0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468 │0,9519 │0,9544 │0,9595 │

│+38 │0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347 │0,9397 │0,9421 │0,9471 │

└────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴───────┴───────┴───────┴───────┘