"Методические указания по определению корбеля в воде, почве и растениях пшеницы методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5037-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОРБЕЛЯ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Краткая характеристика препарата. Корбель - 4-[3(4-

(1,1-диметилэтил)-фенил)]-[2-метил]пропил-2,6цис-диметил-морфолин.

Брутто-формула C H NO. Молекулярная масса 303,5. Общепринятое

20 33

название - фенпропиморф. Агрегатное состояние - жидкое.

Выпускается в виде концентрата эмульсии желтоватого цвета со

слабым ароматическим запахом. Плотность 0,943 при 20 °C, довольно

легко воспламеняется, горюч. Содержание действующего вещества

составляет 750 г/л. Растворим во многих органических

растворителях, плохо растворим в воде. Стабилен в воде, слабых

растворах кислот и щелочей до 24 ч.

Применяется для борьбы с болезнями на озимой и яровой пшенице, яровом ячмене. МДУ в ФРГ на зерновых 0,5 мг/кг. Срок ожидания - 35 дней.

Принцип метода. Метод основан на извлечении корбеля из растительной пробы, почвы или воды экстракцией: из воды - органическим растворителем, из почвы и растений - смесью вода - ацетон (20:1) или подкисленной водой с pH 2 - 3. Переэкстракцию проводят хлороформом или смесью гексан - ацетон (4:1). Определение проводят методом ТСХ.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 147.

Таблица 147

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА (P = 0,95, N = 5)

┌───────────┬─────────────┬────────────┬─────────┬───────────┬────────────┐

│Анализируе-│ Диапазон │ Предел │Среднее │Стандартное│Доверитель- │

│мый объект │определяемых │обнаружения,│значение │отклонение,│ный интер- │

│ │концентраций,│ мг/кг или │определе-│ % │вал, % │

│ │ мкг │ мг/л │ния, % │ │ │

├───────────┼─────────────┼────────────┼─────────┼───────────┼────────────┤

│Вода │10 - 50 │0,04 │86 │+/- 5,8 │+/- 7,2 │

│Почва │10 - 100 │0,1 │82 │+/- 5,3 │+/- 13,3 │

│Растения │10 - 100 │0,2 │72 │+/- 7,5 │+/- 9,4 │

└───────────┴─────────────┴────────────┴─────────┴───────────┴────────────┘

Реактивы и растворы. Ацетон особой чистоты. Вода

дистиллированная. Хлороформ х.ч. н-Гексан х.ч. Этанол

96-процентный, ректиф. Бромфеноловый синий, водорастворимый

индикатор, ч.д.а. Лимонная кислота ч.д.а., 1-процентный раствор.

Конго красный. Нитрат серебра ч.д.а. Сульфат натрия безводный х.ч.

Уксусная кислота ч.д.а., 5-процентный раствор. Пластинки "Силуфол"

УФ . Стандартный раствор корбеля (0,1 мг/мл в этаноле или

254

ацетоне). Проявляющий реагент: N 1 - 0,4-процентный раствор конго

красного в 50-процентном этаноле; N 2 - 0,4-процентный раствор

бромфенолового синего в ацетоне и 3-процентный водный раствор

нитрата серебра в соотношении 1:1.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Колбы: круглодонные на 250 мл; мерные на 100 мл. Холодильник стеклянный для отгонки растворителя. Баня водяная или ротационный испаритель. Воронки химические и делительные на 500 мл. Цилиндры мерные. Пульверизатор стеклянный. Камера для хроматографирования (эксикатор). Капиллярные пипетки для нанесения проб. Микропипетки на 0,1 мл конические; плоскодонные на 250 мл. Компрессорная установка УК-40-2.

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом или смесью гексана с ацетоном в соотношении 4:1 порциями по 100, 50, 50 мл в течение 5 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (15 г), концентрируют на водяной бане или ротационном испарителе до 0,3 - 0,5 мл.

Навеску воздушно-сухой почвы (100 г) или измельченных растений

(50 г) помещают в колбу для экстракции, приливают 100 мл

водно-ацетоновой смеси (20:1) или дистиллированной воды,

подкисленной хлороводородной кислотой до pH 2 - 3, и экстрагируют

корбель на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Затем

экстракт фильтруют, экстракцию повторяют дважды. Объединенный

экстракт помещают в делительную воронку на 500 мл. Если экстракцию

проводят подкисленной водой, то в экстракт добавляют несколько

капель 1 н раствора KOH до pH 8 - 9, добавляют 100 мл смеси

гексан - ацетон (4:1) или хлороформа и встряхивают в течение 3

мин. Переэкстракцию таким же объемом растворителя повторяют еще

дважды. Экстракт собирают в круглодонную колбу через воронку с 15%

безводного сульфата натрия. Растворитель отгоняют на водяной бане

или ротационном испарителе до объема 0,5 мл. Остаток наносят на

тонкий слой пластинок "Силуфол" УФ . Справа от пятна исследуемой

254

пробы наносят стандарт с известной концентрацией корбеля. Диаметр

нанесенного пятна не должен превышать 1 - 1,5 см.

Хроматографирование. Пластинку с нанесенными пробами помещают

в хроматографическую камеру с системой растворителей гексан -

ацетон (1:1) или гексан - ацетон - 0,5 н уксусная кислота

(1:2:0,1). Когда фронт растворителя поднимется до 10 см, пластинку

вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе до полного

испарения подвижного растворителя. Пластинку опрыскивают одним из

проявляющих реагентов. После опрыскивания пластинку помещают под

источник УФ-света - лампу ПРК-4. На светло-сером фоне проявляются

малиновые пятна корбеля с R 0,87. Для большей контрастности

пластинку можно оросить 1-процентным раствором лимонной кислоты,

после чего на сине-сером фоне четко проявятся малиновые пятна

корбеля. После опрыскивания бромфеноловым реагентом и обработки

5-процентным раствором уксусной кислоты на желтом фоне пластинки

проявляются пятна корбеля синего цвета.

Обработка результатов анализа. Количественное определение

проводят путем сравнения интенсивности окраски и размеров пятен

пробы и стандартных растворов. Содержание препаратов в пробе (X,

мг/кг) рассчитывают по формуле:

X = -,

где:

A - найденное количество корбеля в пробе, мкг;

P - навеска пробы, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать меры безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и ядовитыми веществами.