Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5036-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СМЕСИ МЕТАФОСА, БАЙЛЕТОНА И ТИЛТА

В РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Краткая характеристика препаратов: метафоса - см. Унифицированную методику; байлетона - с. 453 (т. 1); тилта - с. 545 (т. 1).

Препараты рекомендуют применять в борьбе с возбудителями болезней и вредителями пшеницы при интенсивной технологии возделывания зерновых культур.

    Принцип  метода.  Метод основан на извлечении смеси соединений

хлороформом,   упаривании  экстракта  досуха,  растворении  сухого

остатка  водой  и  переэкстракции  препаратов  из водного раствора

хлороформом с последующим хроматографическим определением в тонком

слое на пластинках "Силуфол" УФ   .

                               254

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 168.

Таблица 168

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

┌───────────────────────────────┬─────────────┬─────────────┬─────────────┐

│           Параметры           │   Метафос   │  Байлетон   │    Тилт     │

├───────────────────────────────┼─────────────┼─────────────┼─────────────┤

│Минимально детектируемое       │0,1          │0,1          │0,1          │

│количество, мкг                │             │             │             │

│Нижний предел определения,     │0,01         │0,01         │0,01         │

│мг/кг                          │             │             │             │

│Варьирование, %                │70 - 90      │75 - 90      │75 - 95      │

│Среднее значение определения, %│81,0         │83,5         │85,7         │

│Стандартное отклонение, %      │+/- 8,8      │+/- 9,2      │+/- 7,9      │

│Доверительный интервал среднего│81,0 +/- 11,3│83,5 +/- 12,2│83,7 +/- 10,2│

│при p = 0,95 и n = 5           │             │             │             │

└───────────────────────────────┴─────────────┴─────────────┴─────────────┘

Избирательность метода. Метод специфичен, другие фосфорорганические соединения, применяемые при выращивании зерновых культур, определению байлетона, тилта и метафоса не мешают.

    Реактивы   и  материалы.  Ацетон  особой  чистоты.  Гексан  ч.

Хлороформ х.ч. Безводный сульфат натрия ч. Индикатор бромфеноловый

синий   ч.д.а.   Нитрат   серебра   ч.д.а.    Лимонная    кислота,

2,5-процентный раствор лимонной кислоты. Проявляющие реактивы: N 1

- 0,05-процентный  раствор бромфенолового синего  в  50-процентном

этаноле;  N 2  -  1-процентный  водный  раствор  нитрата  серебра.

Пластинки  "Силуфол"   УФ   .  Стандартные  растворы (0,1  мг/мл):

                         254

метафоса в ацетоне; байлетона в этаноле; тилта в этаноле.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Колбы круглодонные; мерные на 100 мл. Холодильник стеклянный для отгона растворителя. Баня водяная. Воронки химические; делительные. Цилиндры мерные. Пульверизатор стеклянный. Камера для хроматографирования (эксикатор). Капиллярные пипетки для нанесения проб. Микропипетки на 0,1 мл. Компрессорная установка УК-40-2.

    Ход  анализа.  Экстракция. Навеску измельченного образца (50 г

зеленого   растения  или  соломы)  помещают  в  коническую  колбу,

заливают  100  -  200  мл  хлороформа  до  полного покрытия пробы.

Экстрагируют  1 ч на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют

через  слой  безводного  сульфата  натрия,  пробу трижды промывают

хлороформом, экстракты объединяют. На водяной бане при температуре

40  - 50 °C под вакуумом отгоняют растворитель до объема 0,1 - 0,5

мл.  Остаток высушивают на воздухе. Высушенный остаток заливают 50

мл  дистиллированной  воды  и  оставляют  на  1 ч, фильтруют через

воронку  с  фильтром в делительную воронку. Колбу трижды промывают

дистиллированной   водой  и  присоединяют  к  водному  раствору  в

делительной  воронке. Из воды смесь препаратов экстрагируют трижды

хлороформом  порциями  по  100,  50,  50  мл, энергично встряхивая

воронку в течение 3 мин. Экстракты фильтруют через слой безводного

сульфата  натрия  в  круглодонную  колбу. Растворитель отгоняют на

водяной бане при температуре 40 - 50 °C под вакуумом до объема 0,1

- 0,2 мл. Остаток наносят на пластинку "Силуфол" УФ   .

                                                   254

    Хроматографирование  и  проявление  хроматограмм.  Пластинку с

нанесенной    пробой    и    серией    стандартов    помещают    в

хроматографическую  камеру. В качестве подвижной фазы используется

смесь н-гексана и ацетона в объемном соотношении 2,5:1. После того

как  подвижная фаза поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают

из  камеры  и  сушат на воздухе до полного испарения растворителя.

Опрыскивают   пластинку   проявляющими   реагентами  N  1  и  2  в

соотношении  1:1,  затем 2,5-процентным раствором лимонной кислоты

для  обесцвечивания фона.  При наличии  препаратов  в  исследуемой

пробе на пластинке проявляются пятна: метафоса - сине-фиолетовое с

R  0,48, байлетона - ярко-голубое с R  0,38 и  тилта  - синее с R

 f                                   f                           f

0,30.  Перед  проявлением  пластинку  просматривают   в   УФ-свете

спектроскопа.  Пятна  метафоса  и  тилта  не  светятся,  байлетона

светятся сиреневым цветом.

Обработка результатов анализа. Количественную оценку проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартов.

Содержание препарата в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                                  A

                              X = -,

                                  P

где:

A - количество препарата, найденное путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартных растворов, мкг;

P - масса исследуемой пробы, г.