Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5031-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ АЛАНАПА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ОГУРЦАХ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны А.А. Красных, Л.Г. Булавиной (ВНИИЗР).

    Краткая   характеристика препарата.  Аланап - N-(нафтил-1)-фталаминовая

кислота.  Брутто  формула  C  H  NO .  Молекулярная  масса 291,3. Синоним -

                            18 13  3

нафталам.  Химически  чистое вещество представляет собой кристаллы с т. пл.

185 °C. Растворимость в воде 200 мг/л при 20 °C, лучше растворим в бензоле,

ацетоне,  хлороформе  и других органических растворителях. Со щелочами дает

хорошо растворимые соли. Растворимость натриевой соли при 20 °C - 300 мг/л.

При   pH   более  9  легко  гидролизуется  с  расщеплением  амидной  связи.

Выпускается  в  виде  водного раствора натриевой соли. Применяют в качестве

предвсходового  гербицида  для борьбы с однолетними и двудольными сорняками

на   огурцах,  дыне,  картофеле  и  некоторых  других  культурах.  Препарат

малотоксичен для теплокровных животных, ЛД   для крыс 8200 мг/кг.

                                          50

Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из анализируемой пробы органическим растворителем, очистке экстракта путем перераспределения между двумя несмешивающимися жидкостями с последующим определением тонкослойной хроматографией.

Избирательность метода. Другие гербициды (пирамин, базагран, производные сульфанилмочевины) определению не мешают.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,5 - 10 мкг аланапа в анализируемой пробе. Нижний предел обнаружения 0,5 мкг или 0,0025 - 0,025 мг/кг (мг/л). Среднее значение определения 79,8 +/- 4,8%. Доверительный интервал среднего (при p - 0,95 и n = 10) +/- 5,7%.

Реактивы и растворы. Хлорид аммония х.ч. Ацетон ч.д.а. и водный раствор ацетона (1:1). н-Гексан х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Гидроксид натрия х.ч. Нитрит натрия х.ч. Сульфаниловая кислота х.ч. Хлороводородная кислота х.ч. Хлороформ х.ч. Уксусная кислота ледяная. Ортофосфорная кислота ч. Стандартный раствор аланапа в ацетоне с содержанием препарата 100 мкг/мл. Готовят растворением 10 мкг х.ч. аланапа в мерной колбе на 100 мл. Раствор устойчив в течение 2 мес. при хранении в холодильнике.

Приготовление проявляющего реагента. Раствор а: 0,24 г нитрита натрия растворяют в 100 мл 0,01 н гидроксида натрия. Раствор б: 1 г сульфаниловой кислоты растворяют при нагревании в 100 мл 30-процентной уксусной кислоты. Использовать нужно только прозрачный раствор. За 5 мин. до использования растворы а и б смешивают в соотношении 1:2 по объему. Смешанный реагент со временем медленно желтеет. Если желтый цвет не появляется через 5 мин., значит один из реактивов разложился. Исходные растворы можно хранить в течение 1 мес.

Приготовление коагулирующего раствора. Хлорид аммония (5 г) растворяют в 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и доводят объем раствора до 1 л дистиллированной водой.

Приборы и посуда. Пластинки "Силуфол". Ротационный испаритель. Шкаф вытяжной. Шкаф сушильный. Аппарат для встряхивания. Колбы конические с притертыми пробками на 100 и 250 мл. Воронки делительные и конические. Цилиндры мерные на 10; 50 и 100 мл. Пипетки. Микропипетки. Стаканы химические. Камеры хроматографические. Пульверизаторы стеклянные.

Хранение проб. Пробы хранят в холодильнике не дольше 2 недель.

Ход анализа. Экстракция. Пробу анализируемой воды (200 мл) помещают в делительную воронку, подкисляют 2 н раствором хлороводородной кислоты до pH 1. Аланап экстрагируют тремя порциями хлороформа по 50 мл в течение 5 мин. Экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре воды в бане около 50 °C. Остаток удаляют в токе воздуха.

Пробу почвы (50 г) помещают в коническую колбу на 250 мл. Аланап экстрагируют 150 мл водного ацетона путем встряхивания в течение 1 ч 30 мин. Экстракт отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр. Колбу и фильтр промывают тремя порциями водного ацетона, объединенный экстракт подкисляют 2 н хлороводородной кислотой до pH 1. Из водно-ацетоновой смеси препарат экстрагируют тремя порциями хлороформа по 50 мл в течение 5 мин. Экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре воды в бане около 50 °C. Остаток удаляют в токе воздуха.

Пробу измельченных огурцов (20 г) помещают в коническую колбу, заливают 80 мл хлороформа, препарат экстрагируют путем энергичного встряхивания в течение 1 ч 30 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр со слоем безводного сульфата натрия (8 - 10 г). Колбу и фильтр промывают двумя порциями хлороформа по 15 мл. Хлороформный экстракт концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Очистка экстракта. Сухой остаток растворяют в 5 мл охлажденного ацетона и приливают 50 мл охлажденной в холодильнике коагулирующей смеси. Колбу на 50 мин. ставят в морозильную камеру холодильника. После этого водно-ацетоновую смесь фильтруют через плотный бумажный фильтр. Аланап экстрагируют тремя порциями хлороформа по 40 мл. Объединенный экстракт концентрируют под вакуумом до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

    Хроматографирование.  Сухой  остаток  растворяют в небольшом количестве

хлороформа или ацетона  (0,1 - 0,2 мл) и наносят на пластинку  "Силуфол" на

расстоянии  2  см  от  ее  нижнего  края.  Стенки  колбы  тщательно смывают

несколькими  каплями  растворителя,  который  наносят в центр пятна. Справа

наносят  серию  стандартных  растворов.  После  этого  пластинку помещают в

камеру   для   хроматографирования  с  системой   подвижных   растворителей

гексан-ацетон  (1:1). После подъема фронта подвижного растворителя на 10 см

хроматограмму  вынимают  из  камеры,  подсушивают  на воздухе и помещают на

5 мин.  в  сушильный  шкаф,  предварительно  нагретый  до  150  °C.   После

охлаждения  пластинку опрыскивают проявляющим реагентом. Аланап проявляется

в   виде   розовых   пятен.   Величина  R   аланапа   в   данных   условиях

                                         f

хроматографирования составляет 0,62 +/- 0,03.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен проб и стандартных растворов. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

                                      A

                                  X = -,

                                      P

где:

A - количество препарата, найденное на хроматограмме путем сравнения со стандартом, мкг;

P - навеска или объем анализируемой пробы, г или мл.

Требования безопасности. Следует соблюдать правила безопасности, принятые при работе в химических лабораториях.