Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5014-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИТИОКАРБАМАТОВ В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ

ПАРОФАЗНЫМ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Н.Д. Дорошенко, И.Н. Похильченко (Крымский филиал ВНИИХСЗР).

Краткая характеристика препаратов. Настоящие Методические указания распространяются на определение дитиокарбаматов: цинеба, поликарбацина, полимарцина, ТМТД, тиазона, купрацина и других, физико-химические свойства которых описаны в книге "Методы определения микроколичеств пестицидов" (М.: Колос, 1977).

Продукт разложения дитиокарбаматов - сероуглерод. ДСД цинеба 0,02 мг/кг. МДУ цинеба, мг/кг: в картофеле 0,1; томатах, яблоках, грушах, абрикосах, персиках, сливах, вишне, черешне, винограде 0,6; рисе, зерне, горохе (кроме зеленого) 0,2; хмеле (сухом), табаке, розе эфиромасличной 1,0. Остаточные количества цинеба в смородине, крыжовнике, малине не допускаются. ДСД поликарбацина 0,05 мг/кг. МДУ, мг/кг: в картофеле 0,1 <**>, огурцах 0,5 <**>; рисе, зерне хлебных злаков 0,2 <**>; луке, сахарной свекле, томатах, яблоках, грушах, винограде, хмеле сухом 1,0; табаке, махорке 1,0 <**>.

--------------------------------

<**> Временный норматив.

Принцип метода. Метод основан на газохроматографическом определении сероуглерода, выделившегося в парогазовую фазу, в результате кислотного гидролиза пробы, помещенной в герметически закрытый сосуд, при 30 °C. Используется ДПР. Расчет хроматограмм проводят методом внешнего стандарта по высотам пиков. Время хроматографирования, в зависимости от состава анализируемой пробы, 3 - 10 мин. Сероуглерод, выделившийся при гидролизе пробы, определяют одновременно с сероуглеродом, образовавшимся в результате метаболизма препарата в исследуемом объекте. При необходимости учета свободного сероуглерода в исследуемой пробе его определяют в соответствии с методикой, исключив стадию гидролиза, заменив раствор кислоты дистиллированной водой.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,02 - 0,5 мг/кг. Предел обнаружения в пробе 1 мкг. При необходимости, за счет изменения навески и аликвоты парогазовой фазы, диапазон измеряемых концентраций может быть расширен до 0,005 - 10 мг/кг. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 89.

Таблица 89

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

(n = 5, p = 0,95)

┌────────┬────────────┬──────────────┬──────────────────────────┬──────────────────────────┐

│Анализи-│  Препарат  │   Среднее    │       Стандартное        │      Доверительный       │

│руемый  │            │   значение   │      отклонение, %       │   интервал среднего, %   │

│объект  │            │определения, %│                          │                          │

│        │            ├────┬────┬────┼────────┬────────┬────────┼────────┬────────┬────────┤

│        │            │ 1  │ 2  │ 3  │   1    │   2    │   3    │   1    │   2    │   3    │

├────────┼────────────┼────┼────┼────┼────────┼────────┼────────┼────────┼────────┼────────┤

│Яблоки  │Цинеб       │89,0│92,5│92,3│+/- 6,4 │+/- 10,7│+/- 3,3 │+/- 7,9 │+/- 13,3│+/- 10,9│

│        │Поликарбацин│91,4│88,5│90,0│+/- 11,2│+/- 7,3 │+/- 12,3│+/- 13,5│+/- 9,7 │+/- 15,4│

│Свекла  │Цинеб       │95,3│95,6│93,4│+/- 6,9 │+/- 6,4 │+/- 6,3 │+/- 8,6 │+/- 8,0 │+/- 7,9 │

│        │Поликарбацин│93,4│95,7│94,7│+/- 6,8 │+/- 8,8 │+/- 6,7 │+/- 8,4 │+/- 9,9 │+/- 8,3 │

│Томаты  │Цинеб       │85,6│89,1│93,0│+/- 4,6 │+/- 5,7 │+/- 5,9 │+/- 5,6 │+/- 7,1 │+/- 7,3 │

│        │Поликарбацин│90,7│87,3│87,7│+/- 6,3 │+/- 6,0 │+/- 5,2 │+/- 7,8 │+/- 7,5 │+/- 6,5 │

│Виноград│Цинеб       │74,4│74,5│32,0│+/- 6,7 │+/- 5,7 │+/- 3,9 │+/- 8,3 │+/- 7,0 │+/- 4,9 │

│        │Поликарбацин│73,2│81,3│50,6│+/- 4,4 │+/- 7,8 │+/- 5,6 │+/- 5,5 │+/- 9,6 │+/- 7,0 │

└────────┴────────────┴────┴────┴────┴────────┴────────┴────────┴────────┴────────┴────────┘

Примечание. 1 - концентрация препарата в пробе равна 0,5 МДУ; 2 - МДУ; 3 - 2 МДУ.

Избирательность метода. Пестициды других групп не мешают определению дитиокарбаматов. Внутри группы диокарбаматов метод не селективен.

Реактивы и материалы. Сероуглерод ч. Цинеб ч. Поликарбацин ч. Кислота хлороводородная. Вода дистиллированная, свежеприготовленная. Гидроксид натрия ч., 0,1 н раствор (хранится не более 2 недель). Стандартные растворы дитиокарбаматов в 0,1 н растворе гидроксида натрия. Стандартные растворы сероуглерода в бензоле. Хлорид олова двухводный, ч., 1,5-процентный раствор в 1 н хлороводородной кислоте (срок хранения 2 недели, расход на одно определение 50 мл). Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 5% OV-1. Азот особой чистоты.

Приборы, аппаратура, посуда. Хроматограф "Цвет-106" или аналогичный прибор, снабженный ДПР. Баня водяная с терморегулятором. Флаконы стеклянные цилиндрические на 250 мл с эластичной пробкой и завинчивающейся крышкой с отверстием. Шприц медицинский на 1 или 2 мл. Пипетки мерные на 1; 2 и 5 мл. Стеклянная колонка для газовой хроматографии длиной 2 м, внутренним диаметром 3,5 мм. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Колбы мерные на 100 и 1000 мл. Весы аналитические технические.

Подготовка к определению. Приготовление основного стандартного раствора. Основной стандартный раствор с содержанием 100 мкг/мл дитиокарбамата готовят растворяя 0,01 г чистого препарата в 0,1 н растворе едкого натра в мерной колбе на 100 мл. Стандартный раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике. Для приготовления рабочих растворов с содержанием 5 и 10 мкг/мл препарата вносят 5 и 10 мл основного стандартного раствора в мерные колбы на 100 мл и доводят раствор дистиллированной водой до метки. Готовят в день определения.

Приготовление стандартных растворов сероуглерода. Для приготовления основного стандартного раствора сероуглерода в мерную колбу на 25 мл наливают около 20 мл бензола, колбу закрывают и взвешивают на аналитических весах. Затем прибавляют 1 - 2 капли сероуглерода и вторично взвешивают. Содержимое колбы доводят до метки, тщательно перемешивают и рассчитывают содержание сероуглерода в 1 мл бензола. Затем, соответственным разбавлением, получают стандартный раствор с содержанием 1000 мкг/мл сероуглерода. Раствор хранится в холодильнике в плотно укупоренной склянке не более месяца. Для приготовления рабочих стандартных растворов с содержанием 1; 2; 5; 10 и 20 мкг/мл сероуглерода вносят 0,1; 0,3; 0,5; 1,0; 2,0 мл основного стандартного раствора в мерные колбы на 100 мл и доводят бензолом до метки. Растворы используют в течение недели.

Приготовление раствора хлорида олова. Хлорид олова (15 г) растворяют в 100 мл концентрированной хлороводородной кислоты при нагревании на водяной бане. Остывший раствор переносят в мерную колбу на 1000 мл и доводят до метки дистиллированной водой.

Приготовление проб. Лабораторные пробы массой не менее 0,5 кг выделяют из средней непосредственно перед анализом. Пробы составляют быстро, дальнейшее их измельчение сводят до минимума, так как при этом дитиокарбаматы разлагаются. Из измельченной, тщательно перемешанной лабораторной пробы отбирают в стеклянные флаконы аналитические пробы по 50 г.

Ход анализа. Гидролиз дитиокарбаматов до сероуглерода. Во флаконы с отобранными аналитическими пробами немедленно добавляют 1,5-процентного раствора двухлористого олова в хлороводородной кислоте до объема 100 мл, закрывают силиконово-резиновой пробкой и завинчивают крышкой с отверстием. Герметизированные флаконы помещают на водяную баню при 30 °C. Пробы периодически, через 15 мин., энергично встряхивают в течение 2 мин. Гидролиз проводят до получения в реакционном сосуде однородной массы, но не менее 1 ч. Затем, не вынимая проб из водяной бани, отбирают нагретым до 60 °C шприцем 0,5 мл парогазовой фазы и вводят в испаритель хроматографа.

    Условия  хроматографирования. Длина  колонки  2 м,  внутренний  диаметр

3,5 мм. Расход газа-носителя (азота) 20 мл/мин. Температура, °C:  колонки -

60, испарителя - 100, детектора -  140. Твердый носитель - хроматон N-супер

(0,16  -  0,20  мм)  с 5% QF-1. Абсолютное время удерживания 67 с. Скорость

                                                                     -12

протяжки ленты самописца 600 мм/ч. Рабочая шкала электрометра 20 x 10    А.

Минимально  детектируемое  количество  сероуглерода  1 нг, что эквивалентно

содержанию  дитиокарбамата  в  аналитической  пробе  около  1 мкг. Линейный

динамический   диапазон   детектирования   1   -   20   нг.   Идентификацию

хроматографического  пика сероуглерода и его количественную оценку проводят

методом  внешнего стандарта относительно стандартного раствора сероуглерода

в бензоле.

Обработка результатов анализа. При использовании в качестве стандарта раствора сероуглерода в бензоле содержание пестицида в анализируемом объекте (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                              1,8A (H  - H ) V

                                     1    2   1

                          X = -----------------,

                                  10H V CKP

                                     3 2

    где:

    A  -  количество  сероуглерода  во  введенном в хроматограф стандартном

растворе, нг;

    C  -  коэффициент  пересчета  содержания  сероуглерода на анализируемый

препарат: поликарбацин - 58,5; цинеб,- 55,1; ТМТД - 63,2;

    H ,  H   -  высоты  хроматографических  пиков аликвоты парогазовой фазы

     1    2

соответственно  исследуемой  и  контрольной  (не  обработанной  пестицидом)

пробы, мм;

    H    -  высота  хроматографического  пика  сероуглерода,  введенного  в

     3

хроматограф со стандартным раствором, мм;

    V   -  объем  парогазовой  фазы  флакона, в котором происходит гидролиз

     1

пробы, мл;

    V  - объем аликвоты парогазовой фазы, вводимой в хроматограф, мкл;

     2

1,8 - коэффициент пересчета, учитывающий изменение концентрации сероуглерода в шприце при отборе аликвоты парогазовой фазы из нагретого до 30 °C сосуда с повышенным давлением;

K - степень определения стандартного количества препарата в исследуемой культуре, учитывающая его разложение при подготовке проб;

P - масса анализируемой пробы, г;

10 - постоянный коэффициент при переходе к размерности, мг/кг.

При замене постоянных коэффициентов их значениями, рекомендованными в методике, формула принимает вид:

                               1,8A (H  - H )

                                      1    2

                           X = --------------.

                                    H KC

                                     3

При отсутствии сероуглерода в качестве внешнего стандарта используют аликвоты парогазовой фазы подвергнутых гидролизу стандартных количеств пестицида, а содержание препарата в анализируемом объекте (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                A (H  - H ) V

                                    1    2   3

                            X = --------------,

                                H KP (V  - V )

                                 3     1    2

    где:

    A  -  содержание  пестицида в пробе, используемой в качестве стандарта,

мкг;

    H ,  H   -  высоты  хроматографических  пиков аликвоты парогазовой фазы

     1    2

соответственно исследуемой и контрольной пробы, мм;

    H   -  высота хроматографического пика аликвоты парогазовой фазы пробы,

     3

содержащей стандартное количество пестицида, мм;

    K - степень  определения  препарата  в данном  растительном  материале,

учитывающая его разложение при подготовке проб;

    P - масса аналитической пробы, г;

    V  - V  - объем парогазовой фазы исследуемой и контрольной проб, взятых

     1    2

для хроматографии, мл;

    V   -  объем  парогазовой  фазы,  введенной  в  хроматограф  из  пробы,

     3

содержащей стандартное количество препарата.

Требования безопасности. Соблюдать требования безопасности, рекомендуемые для работы в химических лабораториях с пестицидами, легковоспламеняющимися веществами, электроприборами и сосудами под давлением.