Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5008-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МАВРИКА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ

МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Д.Б. Гиренко (ВНИИГИНТОКС).

    Краткая    характеристика    препарата.     Маврик   -   (R)-3-метил-2-

(4-трифторметил-2-хлорфениламино)-бутановой кислоты  (R,S)-3-фенокси-альфа-

цианобензиловый эфир.  Брутто-формула  C  H  ClF N O .  Молекулярная  масса

                                        26 22   3 2 3

503. Общепринятое название - флувалинат. Вязкая жидкость желтоватого цвета.

Растворим в органических растворителях, практически нерастворим в воде.

Принцип метода. Метод основан на определении маврика газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения его из исследуемой пробы органическим растворителем, очистке от коэкстрактивных веществ в системе жидкость-жидкость.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные параметры приведены в таблице 68.

Таблица 68

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАВРИКА

(p = 0,95, n = 5)

┌───────────────┬──────────────────┬─────────────┬───────────────┐

│ Анализируемый │ Среднее значение │ Стандартное │ Доверительный │

│    объект     │ определения при  │ отклонение, │   интервал    │

│               │    n = 15, %     │      %      │  среднего, %  │

├───────────────┴──────────────────┴─────────────┴───────────────┤

│                              ГЖХ                               │

│                                                                │

│Вода           │85,6              │+/- 2,3      │+/- 2,8        │

│Яблоки         │76,0              │+/- 5,5      │+/- 6,6        │

│Картофель      │79,7              │+/- 2,1      │+/- 2,5        │

│                                                                │

│                              ТСХ                               │

│                                                                │

│Вода           │83,8              │+/- 2,6      │+/- 3,1        │

│Яблоки         │75,4              │+/- 2,4      │+/- 2,9        │

│Картофель      │78,8              │+/- 5,8      │+/- 7,0        │

└───────────────┴──────────────────┴─────────────┴───────────────┘

Избирательность метода. В условиях определения методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических пиретроидов, при определении методом ТСХ мешают препараты, обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.

Реактивы и растворы. Для экстракции. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Сульфат натрия ч.

Для ГЖХ. Неподвижная фаза 5% SE-30 на хроматоне N-AW (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор маврика (5 мкг/мл). Хранят в холодильнике не более 5 дней.

    Для  ТСХ.  Серебра  нитрат х.ч.  Пластинки "Силуфол". Подвижная фаза  -

гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент - раствор аммиаката серебра. 0,5 г

AgNO  растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 - 10 мл аммиака

    3

(22,5%)  и  доводят  объем  раствора до 200 мл ацетоном.  Основной  раствор

маврика  (200 мкг/мл)  в  ацетоне.  Хранят  в  холодильнике не более 2 мес.

Водный раствор йода 0,1 - 0,2-процентный.

Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая. Пульверизаторы стеклянные. Ротационный вакуумный испаритель. Хроматограф "Цвет" или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная носителем на высоту 0,5 - 0,6 м.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют маврик дважды н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C до объема 0,3 - 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.

Навеску 25 г растительного материала (яблок, картофеля) помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси ацетон-вода (7:3) и встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют ацетоно-водные экстракты, фильтруют и переносят в делительную воронку, прибавляют 300 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и экстрагируют маврик дважды гексаном порциями по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее хроматографируют.

Условия хроматографирования. При определении маврика методом ГЖХ используют стеклянную колонку длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненную носителем на 0,5 - 0,6 м.

    Носитель  хроматон  N-AW  (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.  Скорость потока

                                                                     -12

газа-носителя   (азота)   50 мл/мин.   Шкала  электрометра  20  x  10    А.

Температура  (°C):  колонки  -  220,  испарителя  -  240,  детектора - 240.

Вводимый  объем 5 мкл.  Время  удерживания  12 мин. 36 с. Линейный диапазон

детектирования 5 - 50 нг. Минимально детектируемое количество 5 нг.

    Метод тонкослойной хроматографии.  Пробу,  сконцентрированную до объема

0,1 - 0,2 мл,  количественно  наносят на пластинку  "Силуфол".  Параллельно

наносят  серию  стандартных  растворов с содержанием маврика 5; 10; 15 мкг.

Хроматографируют   в   смеси   растворителей  гексан-ацетон  (4:1).   После

высушивания  пластинку  обрабатывают  водным  раствором  йода (0,1 - 0,2%),

высушивают на воздухе,  затем  помещают в сушильный  шкаф  на  10 мин.  при

температуре  100 °C.  После  охлаждения  обрабатывают  пластинку  раствором

аммиаката  серебра и облучают УФ-светом. Маврик обнаруживается в виде пятна

серо-черного цвета. Величина R  составляет 0,45 +/- 0,05.

                              f

Обработка результатов анализа. Для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе и стандартного раствора (при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора).

При использовании метода ГЖХ содержание препарата в пробе (X, мг/кг, мг/л) рассчитывают по формуле:

                                   C  V S

                                    ст 2 пр

                               X = --------,

                                    S  V P

                                     ст 1

    где:

    C   - количество  препарата  во  введенном  в  хроматограф  стандартном

     ст

растворе, нг;

    S   - площадь пика исследуемого раствора, кв. мм;

     пр

    S   - площадь  пика  стандартного  раствора  препарата,   введенного  в

     ст

хроматограф, кв. мм;

    V  - объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;

     1

    V  - общий объем экстракта после упаривания, мл;

     2

    P - масса (объем) анализируемой пробы, г (мл).

    При  использовании  метода  ТСХ  содержание маврика в пробе  (X, мг/кг,

мг/л) вычисляют по формуле:

                                      A

                                  X = -,

                                      P

    где:

    A - количество препарата, найденное на пластинке в пробе, мкг;

    P - навеска пробы, г, л.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.