"Методические указания по определению суми-альфа в воде, плодовых и овощных культурах хроматографическими методами" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5007-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СУМИ-АЛЬФА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ

И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, Л.Е. Морару (ВНИИГИНТОКС).

Дополнение к N 2473-81 от 22.10.81.

Краткая характеристика препарата. Суми-альфа - фенвалерат-RS-альфа-циано-3-феноксибензил-(RS)-2-(4-хлорфенил)-3-метилбутират. Активный изомер рацемического фенвалерата (см. с. 297). Жидкость светло-желтого цвета. Растворим в ксилоле, ацетоне, циклогексаноне, этилацетате, спирте, хлороформе.

Принцип метода. Метод основан на определении суми-альфа газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения его из исследуемой пробы органическим растворителем, очистки от коэкстрактивных веществ в системе жидкость-жидкость.

Метрологическая характеристика методов. Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные параметры приведены в таблице 81.

Таблица 81

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУМИ-АЛЬФА

┌─────────────┬────────────────┬─────────────┬────────────────────┐

│Анализируемый│Среднее значение│ Стандартное │ Доверительный │

│ объект │ определения, % │отклонение, %│интервал среднего, %│

├─────────────┴────────────────┴─────────────┴────────────────────┤

│ ГЖХ │

│ │

│Вода │95,7 │+/- 4,3 │+/- 5,4 │

│Яблоки │80,0 │+/- 5,2 │+/- 6,0 │

│Картофель │85,6 │+/- 3,2 │+/- 4,9 │

│ │

│ ТСХ │

│ │

│Вода │80,0 │+/- 5,0 │+/- 7,1 │

│Яблоки │65,0 │+/- 6,0 │+/- 9,0 │

│Картофель │65,0 │+/- 5,0 │+/- 7,1 │

└─────────────┴────────────────┴─────────────┴────────────────────┘

Избирательность метода. При определении методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических пиретроидов; при использовании метода ТСХ могут мешать препараты, обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.

Реактивы и растворы. Для экстракции. Ацетон х.ч. Гексан ч. Сульфат натрия ч.

Для ГЖХ. 5% SE-30 на хроматоне N-AW (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор суми-альфа (2 мкг/мл). Хранят в холодильнике не более 5 дней.

Для ТСХ. Нитрат серебра. Пластинки "Силуфол". Подвижная фаза

гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент - раствор аммиаката серебра (0,5 г

AgNO растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 - 10 мл

22,5-процентного аммиака и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном).

Основной стандартный раствор суми-альфа (200 мкг/мл) в ацетоне. Хранят в

холодильнике не более 2 мес.

Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая. Пульверизаторы стеклянные. Испаритель ротационный ИР-1М. Хроматограф "Цвет" или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц МШ-10М на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм (заполненная носителем на 0,5 - 0,6 м).

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и дважды экстрагируют суми-альфа гексаном порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C до объема 0,3 - 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.

Навеску растительного материала (яблоки, картофель) массой 25 г помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси ацетон-вода (7:3), встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют ацетоновые экстракты, фильтруют и переносят в делительную воронку. Прибавляют 300 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и реэкстрагируют суми-альфа гексаном дважды порциями по 30 мл. Объединяют гексан, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее хроматографируют.

Газожидкостная хроматография. Применяют носитель хроматон N-AW

(0,16 - 0,20 мм). Неподвижная фаза 5% SE-30. Колонка стеклянная длиной 1 м,

заполненная носителем на 0,5 - 0,6 м. Скорость газа-носителя (азота)

-12

50 мл/мин. Шкала электрометра 20 x 10 А. Температура (°C): колонки -

220, испарителя - 240, детектора - 250. Вводимый объем 5 мкл. Время

удерживания 15 мин. 18 с, линейный диапазон детектирования 2 - 50 нг.

Минимально детектируемое количество 2 нг.

Тонкослойная хроматография. Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 - 0,2 мл, количественно наносят на пластинки "Силуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием суми-альфа 3; 5 и 10 мкг.

Хроматографируют в смеси растворителей гексан-ацетон (4:1). После

высушивания пластинку обрабатывают раствором аммиаката серебра и облучают

УФ-светом 30 мин. Суми-альфа обнаруживается в виде пятна серо-черного

цвета. Величина R 0,4 +/- 0,05.

Обработка результатов анализа. При использовании метода ГЖХ для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе в стандартном растворе (при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора). Содержание суми-альфа в пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

C V S

ст 2 пр

X = --------,

S V P

ст 1

где:

C - количество препарата во введенном в хроматограф стандартном

ст

растворе, мкг;

S - площадь пика исследуемого раствора, кв. мм;

пр

S - площадь пика стандартного раствора препарата, введенного в

ст

хроматограф, кв. мм;

V - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;

V - общий объем экстракта после упаривания, мл;

P - масса анализируемой пробы, г.

При использовании метода ТСХ содержание суми-альфа в пробе вычисляют по

формуле:

X = -,

где:

A - количество препарата, найденное на пластинке, в пробе, мкг;

P - навеска пробы, г или мл.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.