"Методические указания по измерению концентраций трифумина и его метаболитов в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 4990-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРИФУМИНА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Краткая характеристика препаратов приведена в Методических указаниях N 5026-89.

Принцип метода. Определение трифумина и его метаболитов

основано на хроматографическом разделении в тонком слое оксида

алюминия (пластинки "Алуфол") и обнаружении зон локализации после

термического разложения препаратов на пластинке до ароматического

амина; диазотирования последнего нитритом натрия и азосочетания

образовавшегося производного фенилдиазония с 1-нафтолом. Возможны

также хроматографирование в тонком слое силикагеля (пластинки

"Силуфол" УФ ) и обнаружение пятен под хроматоскопом. Для

254

обнаружения трифумина может быть применен бромфеноловый реагент.

Пробы отбирают с концентрированием (бумажный фильтр "синяя

лента").

Метрологическая характеристика метода. Предел измерения

трифумина и его метаболитов в анализируемом объеме пробы по

реакции азосочетания 0,2 мкг (на пластинках "Алуфол"), 3 мкг

("Силуфол"), под хроматоскопом 0,5 мкг ("Силуфол" УФ ). Предел

254

измерения трифумина по реакции с бромфеноловым реагентом 3 мкг

("Силуфол"). Предел измерения в воздухе трифумина и его

метаболитов 0,007 мг/куб. м (при отборе 30 л воздуха). Диапазон

измеряемых концентраций 0,007 - 2 мг/куб. м. Граница суммарной

погрешности измерения трифумина +/- 13,2%, метаболита ФМ-6-1 - +/-

14,5, метаболита ФД-1-1 - +/- 14,8%.

Избирательность метода. Трифумин и его метаболиты разделяются

на хроматограмме. Определению по реакции азосочетания мешают

гербициды из группы фенилмочевины, имеющие близкие величины R .

Определению с бромфеноловым реагентом мешают фосфорорганические и

другие пестициды, определяемые этим реагентом и имеющие близкие

величины R . Определению под хроматоскопом могут мешать пестициды

и другие коэкстрактивные вещества, видимые под хроматоскопом в

области 250 - 260 нм и имеющие близкие к трифумину и его

метаболитам величины R . Из трех способов обнаружения более

специфичен способ по реакции азосочетания. Сочетание трех способов

обнаружения позволяет надежно идентифицировать трифумин и его

метаболиты в присутствии пестицидов названных групп.

Время измерения (включая отбор проб) около 120 мин.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан х.ч. Безводный сульфат натрия ч. Фильтры бумажные "синяя лента". Нитрит натрия ч.д.а. Кислота хлороводородная х.ч. Кислота уксусная х.ч. Гидроксид калия ч. 1-Нафтол ч.д.а. Бромфеноловый синий, индикатор ч.д.а. Нитрат серебра ч.д.а. Стандартные пластинки "Алуфол", "Силуфол" (20 x 20 см), "Хемапол". Препарат трифумин. Метаболиты трифумина ФМ-6-1 и ФД-1-1 х.ч. Основные стандартные растворы трифумина и его метаболитов с концентрацией по 1000 мкг/мл готовят растворением н-гексаном навески каждого вещества 25 мг (0,025 г) х.ч. в мерных колбах вместимостью 25 мл. Трифумин в растворе устойчив при хранении в холодильнике в течение 1 мес., метаболиты - 3 мес. Рабочий стандартный раствор (смесь трифумина и его метаболитов) готовят внесением 2,5 мл основного стандартного раствора каждого вещества в мерную колбу на 50 мл и доведением н-гексаном объема раствора до метки. Концентрация каждого вещества в смеси 50 мкг/мл. Растворы устойчивы в холодильнике в течение 10 дней.

Проявляющие реагенты:

N 1: а - к смеси из 46 мл воды и 4 мл концентрированной хлороводородной кислоты прибавляют 1 г нитрита натрия; б - к раствору 2,8 г гидроксида калия в 50 мл воды прибавляют 0,1 г 1-нафтола. Проявляющие реагенты применяют свежеприготовленными.

N 2: а - растворяют 0,05 г бромфенолового синего в 10 мл ацетона и доводят объем раствора до 100 мл 1-процентным водно-ацетоновым (1:3) раствором нитрата серебра; б - 5-процентный водный раствор уксусной кислоты. Реактивы устойчивы в течение 2 мес.

Приборы и посуда. Электроаспиратор для отбора проб воздуха. Фильтродержатели. Ротационный вакуумный испаритель. Баня водяная. Колбы: мерные на 25, 50 и 100 мл; конические на 100 мл; грушевидные на шлифах вместимостью 50 мл. Стаканы химические на 50 и 100 мл. Пипетки вместимостью 0,1; 1,5; 10 мл. Хроматографическая камера. Пульверизаторы стеклянные. Лампа УФ-света типа "Хроматоскоп" или аналогичная с диапазоном светового излучения 250 - 260 нм.

Отбор проб. Воздух со скоростью 1 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", вложенный в фильтродержатель. Рекомендуется отбирать три параллельные пробы. Максимально отбираемый объем воздуха 30 л (в течение 30 мин.). Отобранные пробы хранить в холодильнике не более 3 дней.

Ход анализа. Бумажный фильтр помещают в стакан и заливают 20 мл н-гексана (ацетона). Экстрагируют, перемешивая стеклянной палочкой в течение 5 мин., сливают растворитель через слой безводного сульфата натрия в колбу для отгонки, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Экстракцию повторяют, экстракты объединяют. Упаривают растворитель под вакуумом на ротационном испарителе (температура бани 45 °C) до объема около 0,3 мл и хроматографируют. При использовании в качестве экстрагента ацетона остаток экстракта упаривают при комнатной температуре досуха, растворяют в 0,3 мл н-гексана и хроматографируют.

Определение методом ТСХ. На пластинку "Алуфол" с помощью

капилляра или микропипетки наносят пробу, ополаскивая колбу 3 - 4

раза небольшими количествами (около 0,1 мл) н-гексана. На эту же

пластинку наносят 0,05 - 0,2 мл рабочего стандартного раствора

смеси трифумина и его метаболитов. Пластинку хроматографируют в

подвижной фазе гексан - ацетон (2:1). После подъема фронта

растворителя на 10 см пластинку вынимают из камеры, отмечают линию

фронта и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения

растворителя. Затем пластинку помещают в сушильный шкаф с

температурой 160 - 170 °C и выдерживают в течение 1 ч. После

охлаждения пластинку помещают в камеру для опрыскивания и

опрыскивают проявляющим реагентом N 1: сначала реактивом а и сразу

же реактивом б. Трифумин и его метаболиты проявляются в виде

красных пятен. Величины R трифумина, ФМ-6-1 и ФД-1-1

соответственно 0,23; 0,49; 0,82. Для этой реакции можно также

использовать пластинки "Силуфол".

Для обнаружения трифумина и его метаболитов под хроматоскопом

используют пластинки "Силуфол" УФ . В этом случае пробу с

254

н-гексаном наносят на пластинку "Силуфол" УФ . Развивают

254

хроматограмму в подвижной фазе гексан - ацетон (2:1), дают

растворителю испариться с пластинки и рассматривают ее под

хроматоскопом. Величины R трифумина, ФМ-6-1 и ФД-1-1

соответственно 0,35; 0,61; 0,93. Далее эту же хроматограмму можно

проявить бромфеноловым реагентом (реагент N 2). Сначала

опрыскивают реактивом а, затем 5 мин. прогревают при 100 °C и

опрыскивают реактивом б. Бромфеноловым реагентом обнаруживается

только трифумин, метаболиты не обнаруживаются.

Количественное определение трифумина и его метаболитов проводят путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы с пятнами стандартных растворов на одной пластинке. Площадь пятна измеряют планиметром или с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Прямая пропорциональная зависимость площади пятен от концентрации препаратов наблюдается в пределах 0,2 - 15 мкг (проявляющий реагент N 1), 0,5 - 20 мкг (обнаружение под хроматоскопом), 3 - 25 мкг (проявляющий реагент N 2). При больших концентрациях анализируют аликвотную часть экстракта (0,1 - 0,2 мл) параллельной пробы.

Обработка результатов анализа. Концентрацию трифумина в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

X = -----,

V V

1 20

где:

G - количество пестицида в хроматографируемом объеме пробы,

мкг;

V - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V - общий объем пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к

стандартным условиям, л.

Требования безопасности. Следует соблюдать правила безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями, кислотами и щелочами.