Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

12 декабря 1988 г. N 4873-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ СТРОФАНТИДИН-АЦЕТАТА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Аннотация

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для работников санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов системы здравоохранения России и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разработаны и утверждены с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны к их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам, утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих.

Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ", одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии", являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

                                O

                               / \  O

                      CH      /   \//

             H  O  /\ │ 3    ├─────┤

              \// /  \┌────┬─┴─────┴──                 М.м. 446,5.

               C │    │    │

            /\ │ /\  / \  /

           /  \ /  \/ │ \/

          │    │    │ OH

    CH COO \  / \  /

      3     \/ │ \/

               OH

Строфантидин-ацетат-3 бета, 5 бета (14-Триокси-19-оксо-5 бета, 14-кард-20(22)-енолид, 3 бета-ацетат) - белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок. При хранении на свету препарат желтеет. Растворим в хлороформе, бензоле; трудно растворим в метиловом спирте, малорастворим в этиловом спирте, практически нерастворим в воде. Т плавл. 235 °С.

В воздухе может находиться в виде аэрозоля.

Препарат обладает средней токсичностью. Кумулятивными свойствами не обладает.

ПДК в воздухе 0,05 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на хроматографическом выделении строфангидин-ацетата в тонком слое силикагеля с последующим проявлением 5-процентным раствором М-динитробензола в бензоле и 20-процентным раствором щелочи в этаноле.

Отбор проб воздуха проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 10 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,025 мг/куб. м (при отборе 400 л).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,025 до 0,25 мг/куб. м.

Определению не мешают наполнители технических продуктов, псоберан и дезоксипеганин гидрохлорид.

Суммарная погрешность измерения не превышает 14,7%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 60 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр.

Аспирационное устройство.

Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.

Фильтродержатели, ТУ 95.72.05-77.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10392-74.

Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-75.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50 и 100 мл.

Микропипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 0,1 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл.

Стаканы химические, ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 мл.

Реактивы, растворы, материалы

Строфантидин-ацетат, х.ч.

Бензол, ГОСТ 5955-75, х.ч.

Хлороформ, ГОСТ 215-74, х.ч.

М-динитробензол, ТУ 6-09-88-77, х.ч.

Натрия гидроокись, ГОСТ 4328-77, х.ч., 20-процентный раствор.

Спирт этиловый, ГОСТ 8314-77.

Стандартный раствор строфантидина-ацетата в бензоле с содержанием 1000 мкг/мл готовят растворением 100 мг строфантидина-ацетата в бензоле. N 2 с содержанием 100 мкг/мл готовят разбавлением стандартного раствора N 1 бензолом в 10 раз. Срок хранения растворов в холодильнике 30 дней.

Бумажные фильтры "синяя лента".

Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР), 15 х 15 см.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 20 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", укрепленный в фильтродержателе. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 400 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 5 суток.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в стаканчик и обрабатывают дважды по 10 мл бензола при перемешивании стеклянной палочкой. Фильтр отжимают, объединенный бензольный экстракт отгоняют на водяной бане при 80 °С до объема 0,2 мл и количественно наносят на пластинку при помощи микропипетки. Рядом слева и справа наносят на линию старта в качестве свидетеля стандартный раствор строфантидина-ацетата, содержащий 10 и 40 мкг вещества, таким образом, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см.

    После  испарения  растворителя  пластинку помещают в камеру с подвижной

фазой,  состоящей  из системы растворителей хлороформ-этанол (90:10). После

того, как линия растворителя достигнет 12 см высоты, пластинку извлекают из

камеры  и  сушат  на  воздухе  до  удаления растворителя. Пластинку орошают

5-процентным  М-динитробензолом  в  бензоле,  сушат  под  вытяжным шкафом и

обрабатывают  20-процентным раствором щелочи в этаноле. Строфантидин-ацетат

проявляется на хроматограмме в виде синих пятен. R  равно 0,6 +/- 0,05.

                                                  f

Количественное измерение содержания строфантидина-ацетата в пробе проводят по калибровочному графику, для построения которого наносят на пластинку стандартные растворы N 1 или N 2, содержащие 10, 20, 30, 40, 50, 100 мкг/мл строфантидина-ацетата, и обрабатывают аналогично пробам.

Образовавшиеся синие пятна по контуру обкалывают иглой, окрашенный слой сорбента количественно соскабливают в коническую пробирку, прибавляют 5 мл спирта, перемешивают 1 - 2 мин. и центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 3 мин.

Жидкость над осадком переносят с помощью пипетки в кювету и фотометрируют при 575 - 590 вм. Контролем служит спиртовый раствор, полученный после обработки слоя сорбента (равного по площади анализируемому пятну), снятого с любого участка пластинки.

Расчет концентрации

Концентрацию строфантидина-ацетата в воздухе в мг/куб. м "С" вычисляют по формуле:

С = (а х в) / (б х V),

где:

а - количество вещества, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

в - общий объем раствора пробы, мл;

V - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приложение 1

(справочное)

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

                              V  х (273 + 20) х Р

                               t

                          С = -------------------,

                              (273 + t°) х 101,33

    где:

    V  - объем воздуха, отобранный для анализа;

     t

    Р - барометрическое давление, кПа;

    (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

    t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

    Для удобства  расчета V  следует  пользоваться  таблицей  коэффициентов

                           t

(Приложение  2).  Для  приведения  объема  воздуха  к температуре 20 °С и к

давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V  на соответствующий коэффициент.

                                       t

Приложение 2

(справочное)

КОЭФФИЦИЕНТ К ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА

К УСЛОВИЯМ ПО ГОСТ 12.1.016-79

┌───┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────┐

│°С │                     Давление Р, кПа (мм рт. ст.)                    │

│   ├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┤

│   │97,33 │97,86 │ 98,4 │98,93 │99,46 │100,00│100,53│101,06│101,33│101,86│

│   │(730) │(734) │ 738) │(742) │(746) │(750) │(754) │(758) │(760) │(764) │

├───┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤

│-30│1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963│1,2026│1,2058│1,2122│

│-26│1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1763│1,1831│1,1862│1,1925│

│-22│1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581│1,1643│1,1673│1,1735│

│-18│1,1036│1,1097│1,1159│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399│1,1460│1,1490│1,1551│

│-14│1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224│1,1284│1,1313│1,1373│

│-10│1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053│1,1112│1,1141│1,1200│

│-06│1,0640│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887│1,0945│1,0974│1,1032│

│-02│1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726│1,0784│1,0812│1,0869│

│0  │1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648│1,0705│1,0733│1,0789│

│+02│1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571│1,0627│1,0655│1,0712│

│+06│1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419│1,0475│1,0502│1,0557│

│+10│0,9944│0,9990│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272│1,0326│1,0353│1,0407│

│+14│0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128│1,0183│1,0209│1,0263│

│+18│0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989│1,0043│1,0069│1,0122│

│+20│0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921│0,9974│1,0000│1,0053│

│+22│0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853│0,9906│0,9932│0,9985│

│+24│0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787│0,9839│0,9865│0,9917│

│+26│0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721│0,9773│0,9755│0,9851│

│+28│0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9955│0,9605│0,9657│0,9708│0,9734│0,9785│

│+30│0,9288│0,9339│0,9391│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594│0,9646│0,9670│0,9723│

│+34│0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468│0,9519│0,9544│0,9595│

│+38│0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347│0,9397│0,9421│0,9471│

└───┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┘