Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

12 декабря 1988 г. N 4766-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ О-ФЕНИЛЕНДИАМИНА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов Министерства здравоохранения СССР и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля соответствия физических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам, утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.

Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии". Методические указания являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

     // \ --NH

    │   ││    2                                        М.м. 108,0.

     \\ / --NH

              2

Ортофенилендиамин (ОФДА) - кристаллы светло-желтого цвета без запаха. Т. пл. - 101 - 103 °C. Упругость насыщенного пара при 20 °C - 0,018 мм рт. ст., при 40 °C - 0,08 мм рт. ст. Вещество хорошо растворимо в спиртах, эфире, хлороформе, плохо растворяется в воде.

В воздухе находится в виде паров и аэрозоля.

ОФДА обладает специфическим гонадотропным и эмбриотропным действием.

ПДК вещества в воздухе - 0,5 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на хроматографическом выделении о-фенилендиамина в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм в виде желтых пятен на белом фоне.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и хлороформ.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме пробы - 2 мкг.

Предел измерения вещества в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,05 до 5,0 мг/куб. м.

Измерению не мешают п- и м-фенилендиамины.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 1 часа 40 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Фотоэлектроколориметр.

Аспирационное устройство.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Хроматографическая камера, ГОСТ 2065-78.

Микропипетки для нанесения проб, ТУ 64-1-862-77.

Колбы круглодонные, ГОСТ 8613-75.

Склянка для промывки и очистки газов (склянка Дрекселя), ТУ 25-11-1062-75.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Колбы конические, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75, диаметром 6 см.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Стеклянный фильтр с пористой пластинкой.

Реактивы, растворы и материалы

о-Фенилендиамин, ТУ 6-09-08-1127-76, хч.

Хлороформ, ГОСТ 3160-75, хч.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, хч.

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол-254" размером 150 x 150 мм (ЧССР).

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67, 95-процентный.

Подвижный растворитель: ацетон - вода (1:1) по объему.

Стандартный раствор о-фенилендиамина с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг препарата хлороформом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Стандартный раствор может храниться в холодильнике в течение 2-х месяцев.

Фильтры АФА-ВП-20.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют последовательно через фильтр АФА-ВП-20 и для поглощения паров через склянку Дрекселя, содержащую 100 мл хлороформа.

Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 8 л воздуха. Пробы могут храниться в холодильнике в течение 2 дней.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в коническую колбу и заливают 30 мл хлороформа. Экстрагируют в течение 30 минут. Экстракцию повторяют дважды. Экстракт сливают в колбу для отгонки растворителя. Хлороформ из поглотителя переносят в ту же колбу. Отгоняют растворитель под вакуумом до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре 40 °C.

    Пробу   количественно   наносят   при  помощи  капиллярной  пипетки  на

хроматографическую  пластинку  так,  чтобы  диаметр пятна не превышал 1 см.

Расстояние  центра  пятна  от  нижнего  края  пластинки  -  1,5 см. Колбу с

экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими порциями хлороформа, который также

наносят  в  центр  пятна.  Справа  и  слева  от  пробы  наносят стандартные

растворы,  содержащие  2,  4,  8,  16,  32,  64  мкг препарата. Пластинку с

нанесенными растворами помещают  в  хроматографическую камеру, в которую за

30 минут до хроматографирования залита смесь ацетон - вода (1:1) по объему.

После  поднятия  фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают

из   камеры  и  оставляют  на  несколько  минут  на  воздухе  до  испарения

растворителя,  затем  переносят  в сушильный шкаф и выдерживают в течение 5

минут  при  температуре 100 °C. Исследуемое вещество дает желтую окраску на

белом фоне. Значение R  для о-фенилендиамина составляет 0,6.

                      f

Окрашенную зону локализации о-фенилендиамина (с помощью соскоба) лопаткой переносят в стеклянный фильтр N 4 и элюируют 2 мл этилового спирта. Измеряют оптическую плотность окрашенных растворов на фотоэлектроколориметре со светофильтром N 3 (зеленый) в кювете 2,0 мм против раствора этилового спирта. По данным фотометрирования строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей стандартных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им значения содержания вещества в растворе (в мкг).

Количественное измерение содержания о-фенилендиамина в анализируемом объеме пробы находят по градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию вещества в воздухе в мг/куб. м (C) вычисляют по формуле:

                                    а x в

                                C = -----,

                                    б x V

где:

а - количество о-фенилендиамина, найденное по градуировочному графику в анализируемом объеме пробы, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. проводят по следующей формуле:

                              V  x (273 + 20) x P

                               t

                         20 = -------------------,

                              (273 + t°) x 101,33

    где:

    V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

     t

    P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

    t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета 20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. надо умножить на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

КОЭФФИЦИЕНТ K ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА

К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ

┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐

│ °C │                        Давление P, кПа/мм рт. ст.                       │

│    ├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬───────┬───────┬───────┬───────┤

│    │97,33/│97,86/│98,4/ │98,93/│99,46/│ 100/ │100,53/│101,06/│101,33/│101,86/│

│    │ 730  │ 734  │ 738  │ 742  │ 746  │ 750  │  754  │  758  │  760  │  764  │

├────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼───────┼───────┼───────┼───────┤

│-30 │1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963 │1,2026 │1,2058 │1,2122 │

│-26 │1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1768 │1,1831 │1,1862 │1,1925 │

│-22 │1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581 │1,1643 │1,1673 │1,1735 │

│-18 │1,1036│1,1097│1,1158│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399 │1,1400 │1,1490 │1,1551 │

│-14 │1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224 │1,1284 │1,1313 │1,1373 │

│-10 │1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053 │1,1112 │1,1141 │1,1200 │

│-6  │1,0540│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887 │1,0945 │1,0974 │1,1032 │

│-2  │1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726 │1,0784 │1,0812 │1,0869 │

│0   │1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648 │1,0705 │1,0733 │1,0789 │

│+2  │1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571 │1,0627 │1,0655 │1,0712 │

│+6  │1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419 │1,0475 │1,0502 │1,0557 │

│+10 │0,9944│0,9999│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272 │1,0326 │1,0353 │1,0407 │

│+14 │0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128 │1,0183 │1,0209 │1,0263 │

│+18 │0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989 │1,0043 │1,0069 │1,0122 │

│+20 │0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921 │0,9974 │1,0000 │1,0053 │

│+22 │0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853 │0,9906 │0,9932 │0,9985 │

│+24 │0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787 │0,9839 │0,9865 │0,9917 │

│+26 │0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721 │0,9773 │0,9799 │0,9851 │

│+28 │0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9555│0,9605│0,9657 │0,9708 │0,9734 │0,9785 │

│+30 │0,9288│0,9339│0,9891│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594 │0,9645 │0,9670 │0,9723 │

│+34 │0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468 │0,9519 │0,9544 │0,9595 │

│+38 │0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347 │0,9397 │0,9421 │0,9471 │

└────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴───────┴───────┴───────┴───────┘