Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

12 декабря 1988 г. N 4742-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЕНАМИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов Министерства здравоохранения СССР и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля соответствия физических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам, утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.

Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии". Методические указания являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

                          O

                         //

    C H  N-CO-NH-C = C--C

     6 11        │   │   \

               H C   CH   O H                         М.м. 308,41.

                2 \ /  2   4 9

                  CH

                    2

Енамин (2-/3-циклогексилуреидо/-циклопентен-1,2-карбоксибутан-1) - белое кристаллическое вещество, Т. пл. 108 - 109 °C. Растворим в ацетоне, толуоле, хлороформе, бутаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Енамин относится к классу малотоксичных соединений.

ПДК вещества в воздухе - 1,0 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на хроматографическом выделении енамина в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм спиртовым раствором йода.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр АФА-ВП-20.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме - 1 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе - 0,5 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,1 до 5,0 мг/куб. м.

Измерению не мешают полупродукты производства ленацила (кетоэфир, циклогексилмочевина, дибутиладипинат, мочевина, циклогексиламин, аммиак).

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 25%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 60 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Аспирационное устройство.

Стаканы химические, ТУ 25-11-944-74, вместимостью 50 мл.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Камера хроматографическая типа СЦ, ГОСТ 25336-82Е.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Микрошприц МШ-10, ГОСТ 8043-75, вместимостью 10 мкл.

Микропипетка, ГОСТ 20202-77, вместимостью 0,1 мл.

Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, различной вместимости.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.

Реактивы, растворы и материалы

Енамин, 99,5-процентный.

Этиловый спирт, ГОСТ 18300-72, технический, ректификат.

н-Гексан, ТУ 6-09-3375-78, ч.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, чда.

Йод, ГОСТ 4159-79, чда.

Подвижный растворитель: н-гексан - ацетон (5:3) по объему. Готовят за 30 минут до хроматографирования.

Проявляющий реактив: 0,1 н спиртовой раствор йода. Раствор готовят перед употреблением.

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол" размером 150 x 150 мм (ЧССР).

Стандартный раствор енамина N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1 г енамина в ацетоне в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Стандартные растворы енамина с содержанием 100 мкг/мл и 10 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 ацетоном. Растворы устойчивы в течение недели.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 40 л воздуха.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан и экстрагируют ацетоном порциями по 10 мл 3 раза. Продолжительность каждой экстракции - 5 минут при периодическом помешивании. Экстракты собирают в отгонной колбе. Растворитель испаряют досуха сначала на ротационном испарителе, а затем в токе воздуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона.

На хроматографической пластинке "Силуфол" на расстоянии 15 мм от края намечают линию старта. На середину линии старта с помощью микрошприца или микропипетки наносят 0,1 мл раствора пробы. Справа и слева от пятна пробы на расстоянии 15 мм друг от друга наносят стандартные пятна с содержанием 1, 5, 10, 20, 30, 50 мкг енамина. Диаметр пятна не должен превышать 10 - 12 мм.

    Пластинку  помещают в наклонном положении в хроматографическую

камеру  с  подвижной  фазой,  налитой  в  таком  количестве, чтобы

пластинка  погружалась  в  растворитель  не  более  чем на 0,5 см.

Хроматограмму  развивают  на  высоту  10  см,  вынимают из камеры,

подсушивают   на   воздухе   в  вытяжном  шкафу,  обрабатывают  из

пульверизатора  проявляющим реактивом. При наличии в пробе енамина

на  хроматограмме  проявляется  четкое  желто-коричневое  пятно на

одном  уровне  со  стандартными  пятнами. Значение R  енамина 0,8.

                                                    f

Окраска пятен устойчива 4 часа.

Для количественной оценки енамина измеряют планиметром или с помощью прозрачной миллиметровой бумаги площади пятен пробы и стандартного раствора, соответствующего ему по интенсивности окраски.

Для количественного измерения енамина на хроматограммах может быть использован денситометр или другой сканирующий прибор при светофильтре с длиной волны 436 нм.

Обработка результатов и расчет концентрации

При использовании планиметра количество вещества (M) (в мкг) в анализируемом объеме пробы находят по формуле:

                               m x S

                                    X

                           M = ------,

                                S

                                 st

    где:

    m - содержание енамина на пятне стандарта, мкг;

    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;

     X

    S   - площадь пятна стандарта, кв. мм.

     st

При использовании денситометра содержание енамина в анализируемом объеме находят по отношению интегральных значений содержаний вещества в пробах и "свидетелях".

Концентрацию вещества в воздухе в мг/куб. м (C) вычисляют по формуле:

                                а x в

                            C = -----,

                                б x V

где:

а - содержание вещества, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;

в - общий объем пробы, мл;

б - объем пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. проводят по следующей формуле:

                         V  x (273 + 20) x P

                          t

                    20 = -------------------,

                         (273 + t°) x 101,33

    где:

    V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

     t

    P  -  барометрическое  давление,  кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.

ст.);

    t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета 20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. надо умножить на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

КОЭФФИЦИЕНТ K ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА

К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ

┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐

│ °C │                        Давление P, кПа/мм рт. ст.                       │

│    ├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬───────┬───────┬───────┬───────┤

│    │97,33/│97,86/│98,4/ │98,93/│99,46/│ 100/ │100,53/│101,06/│101,33/│101,86/│

│    │ 730  │ 734  │ 738  │ 742  │ 746  │ 750  │  754  │  758  │  760  │  764  │

├────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼───────┼───────┼───────┼───────┤

│-30 │1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963 │1,2026 │1,2058 │1,2122 │

│-26 │1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1768 │1,1831 │1,1862 │1,1925 │

│-22 │1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581 │1,1643 │1,1673 │1,1735 │

│-18 │1,1036│1,1097│1,1158│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399 │1,1400 │1,1490 │1,1551 │

│-14 │1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224 │1,1284 │1,1313 │1,1373 │

│-10 │1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053 │1,1112 │1,1141 │1,1200 │

│-6  │1,0540│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887 │1,0945 │1,0974 │1,1032 │

│-2  │1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726 │1,0784 │1,0812 │1,0869 │

│0   │1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648 │1,0705 │1,0733 │1,0789 │

│+2  │1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571 │1,0627 │1,0655 │1,0712 │

│+6  │1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419 │1,0475 │1,0502 │1,0557 │

│+10 │0,9944│0,9999│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272 │1,0326 │1,0353 │1,0407 │

│+14 │0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128 │1,0183 │1,0209 │1,0263 │

│+18 │0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989 │1,0043 │1,0069 │1,0122 │

│+20 │0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921 │0,9974 │1,0000 │1,0053 │

│+22 │0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853 │0,9906 │0,9932 │0,9985 │

│+24 │0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787 │0,9839 │0,9865 │0,9917 │

│+26 │0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721 │0,9773 │0,9799 │0,9851 │

│+28 │0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9555│0,9605│0,9657 │0,9708 │0,9734 │0,9785 │

│+30 │0,9288│0,9339│0,9891│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594 │0,9645 │0,9670 │0,9723 │

│+34 │0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468 │0,9519 │0,9544 │0,9595 │

│+38 │0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347 │0,9397 │0,9421 │0,9471 │

└────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴───────┴───────┴───────┴───────┘