Утверждены

Минздравом СССР

11 октября 1988 г. N 4711-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БУТИЗАНА C В БЕЛОКОЧАННОЙ КАПУСТЕ, РЕПЕ,

ТУРНЕПСЕ И РАПСЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Т.В. Ушаковой, И.Ф. Бирюковой (ВНИИССОК).

    Краткая  характеристика  препарата.   Действующее  вещество  бутизана -

C-N-(2,6-диметилфенил)-N-(паразолил-1-метил)хлорацетамид.      Общепринятое

название  -  метазахлор.   Брутто-формула  C  H  ClN O.  Молекулярная масса

                                            14 16   3

277,7.  Форма  препарата - кристаллическое вещество бежевого цвета с т. пл.

85 °C.  Выпускается  в  виде  50-процентного концентрата эмульсии. ЛД   для

                                                                     50

крыс 2150 мг/кг. Селективный гербицид для борьбы с однолетними злаковыми  и

широколистными  сорными  растениями  на  капусте,  рапсе,  репе,  табаке  в

предвсходовый период.

Принцип метола. Метод основан на извлечении бутизана C из растительного материала водно-ацетоновой смесью, вымораживании с последующей экстракцией в гексан, очистке препарата от коэкстрактивных веществ, перераспределении в несмешивающихся растворителях и хроматографировании в тонком слое силикагеля. Бутизан C определяют с помощью бромфенолового реагента.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 63.

Таблица 63

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ БУТИЗАНА

┌────────────────────────────┬────────────────────────────────────────────┐

│          Параметры         │            Анализируемая проба             │

│                            ├──────────┬───────────┬──────────┬──────────┤

│                            │ капуста  │   репа    │ турнепс  │   рапс   │

├────────────────────────────┼──────────┼───────────┼──────────┼──────────┤

│Предел обнаружения,         │0,02      │0,02       │0,02      │0,06      │

│мг/л, мг/кг                 │          │           │          │          │

│Число параллельных          │7         │5          │5         │5         │

│определений, n              │          │           │          │          │

│Среднее значение            │86 +/- 8,3│86 +/- 3,25│85 +/- 2,5│80 +/- 3,5│

│определення, %              │          │           │          │          │

│Доверительный интервал      │+/- 7,7   │+/- 3,6    │+/- 2,7   │+/- 3,8   │

│среднего (p = 0,95, n = 5)  │          │           │          │          │

│Минимально детектируемое    │1         │1          │1         │3         │

│количество, мкг             │          │           │          │          │

└────────────────────────────┴──────────┴───────────┴──────────┴──────────┘

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. Гексан ч. Бромфеноловый синий водорастворимый ч.д.а. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Ацетонитрил ч. Лимонная кислота х.ч. Пластинки "Силуфол". Толуол ч.д.а.

Проявляющие реагенты. Бромфеноловый синий: 0,03 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона, затем 0,5-процентным водно-ацетоновым раствором нитрата серебра (1 часть воды на 3 части ацетона) объем смеси доводят до 100 мл. Срок хранения 1 мес. в темном прохладном месте.

Раствор лимонной кислоты (5-процентный).

Стандартный раствор бутизана (1 мг/мл) готовят, растворяя 100 мг х.ч. бутизана в 100 мл гексана. При необходимости готовят раствор, содержащий 0,1 мг/мл. Стандартный раствор хранят в холодильнике в течение 1 мес.

Приборы и посуда. Прибор для отгонки растворителей ИР-1М. Колбы конические вместимостью 100 мл, колбы грушевидные. Воронки химические. Капилляры. Микропипетки. Фильтры бумажные. Цилиндры мерные. Делительные воронки на 250 и 500 мл.

Отбор проб. Пробу растительного материала очищают, измельчают ножом или на гомогенизаторе и отбирают среднюю пробу массой 25 - 50 г. Срок хранения проб в прохладном месте 1 мес.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Растительную пробу (25 - 50 г) заливают на ночь 25 - 50 мл водно-ацетоновой смеси (1:1) с добавлением 5 - 10 г NaCl в колбе на 100 мл с пришлифованной пробкой. Одновременно заливают контрольные пробы с внесением стандартного раствора в количестве, близком к ожидаемому. Полученный экстракт фильтруют в делительную воронку вместимостью 100 - 200 мл. Пробу и фильтр дважды промывают водно-ацетоновой смесью порциями по 20 мл. Объединенный водно-ацетоновый раствор трижды промывают гексаном порциями по 20 мл. Далее гексановый экстракт фильтруют через слой безводного сульфата натрия, упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре 70 - 75 °C. Затем сухой остаток, содержащийся в колбе, растворяют в смеси ацетонитрил-вода (1:10) и трижды проводят экстракцию бутизана и его метаболитов гексаном с добавлением 10 г NaCl. Объединенный гексановый экстракт фильтруют через бумажный фильтр со слоем безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе до объема около 0,5 мл при температуре 68 - 70 °C.

Определение бутизана в капусте можно проводить, исключая стадию ацетонитриловой очистки.

    Хроматографирование. 0,5 мл содержимого колбы (при объеме более 0,5 мл)

количественно переносят микропипеткой или стеклянным капилляром (при объеме

около  0,5  мл)  на  пластинку  "Силуфол".  На  эту  же  пластинку  наносят

контрольную    пробу,    содержащую    внесенный    стандартный    раствор.

Хроматографируют  в  системе  толуол-ацетон  (9:1),  в  которой величина R

                                                                          f

бутизана составляет 0,20.

После высушивания пластинки на воздухе ее опрыскивают бромфеноловым реагентом и сразу же раствором 5-процентной лимонной кислоты.

Препарат проявляется в виде пятен синего цвета на желтом фоне. Синие пятна бутизана C недолговечны, оценку их размера и интенсивности проводят сразу после проявления.

Обработка результатов анализа. Содержание препарата в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                      A

                                  X = -,

                                      P

где:

A - количество гербицида, найденное путем сравнения со стандартом, мкг;

P - масса исследуемой пробы, г.

Требования безопасности. Следует соблюдать правила безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями и малотоксичными пестицидами.