Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

4 октября 1988 г. N 4707-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ АКРЕКСА И ДИНОСЕБА В КРОВИ И МОЧЕ

ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

1. Краткая характеристика препаратов

Акрекс (динобутон, талан, МС-1053, изофен)-2,4-динитро-6-втор-бутил-фенил-изопропилкарбонат

               OCOOCH(CH )

          ____/         3 2                     C  H  O N .

         //  \\                                  14 18 7 2

    O N-//    \\-CH(CH )C H

     2  \      /      3  2 5                    Мол. масса 326,31.

         \____/

          ----\

               NO

                 2

В чистом виде - кристаллическое вещество светло-желтого цвета. Т. пл. 61 - 62 °С. Препарат плохо растворим в воде, хорошо растворим в большинстве органических растворителей. Устойчив к кислотам, под действием щелочей гидролизуется с образованием диносеба.

Выпускается в виде 50-процентного смачивающегося порошка.

Применяется как контактный акарицид и фунгицид на цитрусовых культурах, огурцах и хлопчатнике.

Диносеб (гебутокс)-2,4-динитро-6-втор-бутилфенол

                CH CH(CH )

          _____/  2     3                       C  H  N O .

         //   \\                                 10 12 2 5

    O N-//     \\-OH

     2  \       /                               Мол. масса 240,2.

         \_____/

          -----\

                NO

                  2

В чистом виде - желтое кристаллическое вещество. Т. пл. 38 - 42 °С. Растворитель в воде при 20 °C 50 мг/л, в этаноле 480 г/л, хорошо растворим и в других органических растворителях.

    ЛД   для крыс 40 - 50 мг/кг.

      50

2. Методика определения

2.1. Принцип метода

Метод основан на подкислении анализируемой пробы минеральной кислотой, извлечении пестицидов диэтиловым эфиром и последующем определении тонкослойной хроматографией на пластинках "силуфол".

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

    Предел обнаружения в пробе                             - 2,0 мкг

    Размах варьирования                                    - 72 - 85%

    Стандартное отклонение                                 - +/- 8,0%

    Относительное стандартное отклонение                   - +/- 10,0%

    2.3.1. Избирательность метода

    Определению акрекса может мешать каратан, имеющий близкое значение  R ,

                                                                         1

однако совместно эти пестициды не применяются.

2.2. Реактивы и растворы

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6262-79.

Гексан, х.ч., ТУ 69-09-3375-78.

Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-79.

Этиловый спирт, ректификат, ГОСТ 5962-67.

Хлористоводородная кислота, ч., ГОСТ 3118-77; разбавленная дистиллированной водой в соотношении 1:1.

Муравьиная кислота, ч., ГОСТ 5848-73.

Сульфат натрия безводный, х.ч., ГОСТ 4266-77.

Гидроокись калия, ч.д.а., ГОСТ 9285-87.

Дистиллированная вода, ГОСТ 7602-72.

Пластины "силуфол", 15 x 15 см (ЧССР).

Универсальная индикаторная бумага.

Вата гигроскопическая.

Стандартные растворы акрекса и диносеба в ацетоне с концентрацией 100 мкг/мл. Растворы стабильны в течение 3 - 4 месяцев при хранении в холодильнике.

Проявляющий реактив: В мерную колбу на 100 мл помещают 5 г гидроокиси калия, растворяют в этиловом спирте и доводят до метки этиловым спиртом.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 23-11-917-76, или аналогичный прибор.

Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.

Вакуумный водоструйный стеклянный насос, ГОСТ 25336-82.

Сушильный шкаф, ТУ 64-11-1411-76Е.

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, на 250 мл.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1; 0,2 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 1; 5 мл.

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 100 мл.

Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на 100 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, на 50; 100 мл.

Воронки химические диаметр 6 см, ГОСТ 25336-82.

Ступка фарфоровая с пестиком, ГОСТ 9147-80.

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Пульверизатор стеклянный.

Палочки стеклянные.

2.4. Подготовка к определению

Хроматографическую камеру за 20 - 30 мин. до начала хроматографирования заполняют смесью растворителей гексан - диэтиловый эфир - муравьиная кислота (90:10:8) или гексан - бензол (2:3).

2.5. Проведение определения

Моча. 10 мл мочи помещают в делительную воронку на 250 мл, разбавляют до 50 мл дистиллированной водой, затем подкисляют до рН 1 - 2 разбавленной (1:1) хлористоводородной кислотой и трижды экстрагируют диэтиловым эфиром (20, 20 и 20 мл). В случае образования эмульсии к каждой порции экстракта прибавляют 5 - 7 мл этилового спирта.

Объединенный эфирный экстракт пропускают через безводный сульфат натрия (около 7 г) в круглодонную колбу и отгоняют эфир с помощью ротационного испарителя до объема около 2 - 3 мл. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха до объема 0,2 - 0,3 мл.

Кровь. 2 мл крови помещают в фарфоровую ступку, прибавляют 0,5 мл разбавленной (1:1) хлористоводородной кислоты и растирают с 30 - 35 г безводного сульфата натрия до сыпучей массы (сульфат натрия прибавляют постепенно по 8 - 10 г).

Полученную массу помещают в коническую колбу на 100 мл, заливают 35 - 40 мл диэтилового эфира и экстрагируют пестициды в статических условиях, периодически перемешивая содержимое колбы, в течение 15 - 20 мин. Экстракт пропускают через безводный сульфат натрия в круглодонную колбу для отгонки растворителя. Экстракцию повторяют дважды свежими порциями эфира. Растворитель отгоняют с помощью ротационного испарителя до объема 2 - 3 мл. Остаток растворителя удаляют в токе воздуха до объема 0,2 - 0,3 мл.

Концентрат  в  колбе  количественно с помощью микропипетки переносят на

пластинку.  Параллельно на пластинку наносят серию стандартов с содержанием

2;  5;  10  мкг  пестицидов  в  пятне (равные количества акрекса и диносеба

наносят в одну точку). Пластинку в течение 30 мин. выдерживают на воздухе и

помещают  в  хроматографическую  камеру  с  одной  из указанных выше систем

растворителей.  После  подъема  фронта  растворителя  от стартовой линии на

высоту  10  см  хроматографирование  прекращают.  Пластинку  выдерживают  в

вытяжном  шкафу  для удаления растворителя, орошают проявляющим реактивом и

помещают  на  5  - 7 мин. в сушильный шкаф с температурой 100 - 105 °С. При

наличии  пестицидов  на  хроматограмме проявляются окрашенные в ярко-желтый

цвет пятна. Величины R  приведены в таблице.

1

Таблица

                      ВЕЛИЧИНЫ R  АКРЕКСА И ДИНОСЕБА

                                1

┌────────────────────────┬────────────────────────────────────────────────┐

│        Пестицид        │             Подвижный растворитель             │

│                        ├─────────────────────┬──────────────────────────┤

│                        │гексан - бензол (2:3)│гексан - эфир - муравьиная│

│                        │                     │    кислота (90:10:2)     │

├────────────────────────┼─────────────────────┼──────────────────────────┤

│Акрекс                  │        0,25         │           0,29           │

│Диносеб                 │        0,53         │           0,51           │

└────────────────────────┴─────────────────────┴──────────────────────────┘

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят сравнением площади и интенсивности окраски пятен пробы и стандартов.

Содержание пестицидов в анализируемой пробе Х (мг/мл) вычисляют по формуле:

                              А

                          X = -,

                              Р

где:

А - количество пестицида, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

Р - объем анализируемой пробы, мл.

3. Требования безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с токсичными веществами, органическими растворителями, электронагревательными приборами.