"Методические указания по определению базудина и гетерофоса в почве и табаке методом газожидкостной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

14 июля 1988 г. N 4675-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БАЗУДИНА И ГЕТЕРОФОСА В ПОЧВЕ И ТАБАКЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Краткая характеристика препарата гетерофоса приведена в Унифицированной методике. Препарат применяют в качестве почвенного нематоцида и инсектицида. Краткая характеристика базудина приведена в Унифицированной методике.

Принцип метода. Метод основан на экстракции гетерофоса и базудина из анализируемой пробы почвы смесью ацетона с 0,05 н водным раствором хлорида кальция (1:1), из проб табака смесью ацетона с водой (1:1), очистке экстрактов путем переэкстракции и осаждения восков и пигментов с последующим определением на газожидкостном хроматографе с ТИД.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций: базудина - 0,4 - 1,0 мкг, гетерофоса - 2,0 - 5,0 мкг в пробе. Минимально детектируемое количество базудина 1 нг, гетерофоса - 2,5 нг. Остальные параметры приведены в таблице 27.

Таблица 27

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ГЕТЕРОФОСА

И БАЗУДИНА В ПОЧВЕ И ТАБАКЕ МЕТОДОМ ГЖХ

┌─────────┬───────┬──────────┬────────┬───────┬───────┬─────────────┬──────────┐

│Пестицид │Объект │Внесенное │Среднее │Стан- │Относи-│Доверительный│Предел │

│ │анализа│количество│значение│дартное│тельное│ интервал │определе- │

│ │ │анализиру-│опреде- │откло- │стан- │среднего при │ния, мг/кг│

│ │ │емого │ления, %│нение, │дартное│ p = 0,95, │ │

│ │ │пестицида,│ │+/- % │откло- │n = 5, +/- % │ │

│ │ │мкг │ │ │нение │ │ │

├─────────┼───────┼──────────┼────────┼───────┼───────┼─────────────┼──────────┤

│Базудин │Почва │0,4 │85,8 │3,76 │1,72 │4,42 │0,008 │

│ │ │0,75 │88,4 │2,78 │1,24 │3,18 │ │

│ │ │1,0 │93,6 │2,41 │1,07 │2,74 │ │

│ │Табак │0,4 │76,5 │4,52 │2,01 │5,16 │0,016 │

│ │ │0,75 │82,8 │2,52 │1,12 │2,87 │ │

│ │ │1,0 │83,0 │2,45 │1,09 │2,80 │ │

│Гетерофос│Почва │2,0 │86,2 │3,90 │1,74 │4,47 │0,04 │

│ │ │3,75 │89,7 │3,24 │1,44 │3,70 │ │

│ │ │5,0 │94,5 │2,56 │1,14 │2,92 │ │

│ │Табак │2,0 │80,5 │4,86 │2,16 │5,55 │0,08 │

│ │ │3,75 │85,2 │6,06 │2,70 │6,93 │ │

│ │ │5,0 │89,3 │5,52 │2,46 │6,32 │ │

└─────────┴───────┴──────────┴────────┴───────┴───────┴─────────────┴──────────┘

Избирательность метода. Метод селективен. Гетерофос и базудин взаимному определению не мешают. ФОП (метафос, карбофос, фозалон, фосфамид, хлорофос) и гербициды (атразин, симазин, пропазин) определению не мешают.

Реактивы и растворы. Ацетон особой чистоты. Гексан х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Кислота ортофосфорная ч. Хлорид аммония х.ч. Хлорид кальция х.ч. Азот особой чистоты (в баллонах с редуктором). Водород электролитический (системы СГС-2). Хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм) с 5% ПЭГА. Хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм) с 5% XE-60. Гетерофос х.ч. Базудин х.ч.

Стандартные растворы смеси гетерофоса и базудина с содержанием: а) гетерофоса 10, базудина 4 мкг/мл (в ацетоне); б) гетерофоса 2,5, базудина 1 мкг/мл (в ацетоне).

Осаждающий раствор: 5 г хлорида аммония растворяют в 100 мл дистиллированной воды, смешивают с 10 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и доводят водой до 1 л.

Приборы и посуда. Хроматограф "Цвет-106" с ТИД. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Воронки делительные. Колбы: конические и круглодонные нормального шлифа; остродонные; мерные на 100 мл. Микрошприц на 10 мкл. Электромельница. Колонки хроматографические стеклянные длиной 100 мм с внутренним диаметром 3 мм. Холодильник бытовой. Секундомер. Бумажные фильтры. Водоструйный насос КМ 1230.

Подготовка к определению. Подготовка хроматографических колонок и их кондиционирование. Стеклянные колонки моют хромовой смесью, ополаскивают водой, промывают ацетоном, а затем хлороформом и гексаном. Колонку просушивают и заполняют сорбентом, используя водоструйный насос. Заполненную колонку кондиционируют (не подключая к детектору) 20 ч при 200 °C (ПЭГА) и 250 °C (XE-60).

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу почвы (50 г) помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой, заливают 100 мл смеси ацетона с 0,05 н хлоридом кальция (1:1) и встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют еще раз. Объединенные экстракты фильтруют через бумажный фильтр и переносят в делительную воронку. Пестициды переэкстрагируют в гексан трижды порциями по 40 мл, каждый раз встряхивая 2 - 3 мин. Гексановые экстракты объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл при 45 - 50 °C и досуха упаривают в токе холодного воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 - 3 мл ацетона и хроматографируют.

Пробу табака (25 г) помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой, заливают 80 мл смеси ацетон - вода (1:1) и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Экстракцию повторяют еще дважды той же смесью порциями по 60 мл, встряхивают соответственно 30 и 20 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр.

Из объединенных водно-ацетоновых экстрактов пестициды переэкстрагируют в гексан (трижды порциями по 40 мл), каждый раз встряхивая 2 - 3 мин. Гексановые фракции объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл при 45 - 50 °C. Остатки растворителя удаляют в токе воздуха.

Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетона, прибавляют 25 мл осаждающего раствора и помещают колбу на 1 ч в холодильник при температуре минус 10 - 12 °C. Содержимое колбы отфильтровывают от восков и пигментов через бумажный фильтр. Из водно-ацетонового фильтрата пестициды экстрагируют гексаном трижды по 2 - 3 мин. порциями по 20 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют при 45 - 50 °C до объема 0,2 - 0,3 мл. Последние порции растворителя удаляют в токе воздуха.

Сухой остаток растворяют в 1 - 5 мл ацетона и используют для определения. В колонку вводят 2 - 3 мкл полученного раствора.

Условия хроматографирования. Хроматограф "Цвет-106" с ТИД.

-12

Рабочая шкала электрометра 100 x 10 А. Скорость движения ленты

самописца 200 мм/ч. Колонка стеклянная длиной 100 см с внутренним

диаметром 3 мм. Носитель - хроматон N-супер (0,125 - 0,160 мм).

Неподвижная фаза - 5% ПЭГА. Температура колонки 185 °C, испарителя

225 °C. Скорость газа-носителя (азота) 70 мл/мин. Скорость

водорода 17 - 18 мл/мин., воздуха - 160 мл/мин. Минимально

детектируемое количество гетерофоса 2,5 нг, базудина - 1 нг.

Линейный диапазон детектирования гетерофоса 2,5 - 25 нг, базудина

- 1 - 10 нг. Время удерживания базудина - 1 мин. 15 с, гетерофоса

- 2 мин. 25 с.

В качестве альтернативной можно использовать стеклянную колонку длиной 100 см с внутренним диаметром 3 мм, заполненную хроматоном N-супер с 5% XE-60.

Условия хроматографирования те же, что и для колонки с ПЭГА (полиэтиленгликольадипинат). При этом время удерживания базудина - 1 мин. 3 с, гетерофоса - 2 мин. 6 с.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят методом соотношения со стандартами по высоте пиков. Содержание пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее значение из двух параллельных определений. Количество пестицида в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

100CH V V

1 ст 2

X = ----------------,

H V P (100 - W)

ст 1

где:

C - концентрация стандартного раствора пестицида, мкг/мл;

H , H - высота хроматографического пика соответственно

1 ст

исследуемого и стандартного растворов, мм;

V - объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;

V - объем пробы стандартного раствора, введенный в

ст

хроматограф, мкл;

V - общий объем исследуемого раствора, мл;

P - навеска исследуемого образца табака, г;

W - влажность анализируемой пробы, %.

Требования безопасности. Необходимо выполнять правила безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями, пестицидами и сжатыми газами.