Утверждены

Минздравом СССР

14 июля 1988 г. N 4659-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРЕПАРАТА ЭФ-165 (ЭФОГАМА) В ПОДСОЛНЕЧНОМ

МАСЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Б.Е. Бумажным (ТСХА).

Краткая характеристика препарата приведена в МУ N 3193-85.

Принцип метода. Методика основана на прямом газохроматографическом определении эфогама в масле с использованием селективного ТИД после разбавления образца ацетоном и добавлением внутреннего стандарта. В качестве внутреннего стандарта используют трипропилфосфат (ТПФ).

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел чувствительности детектора по эфогаму 0,2 нг. Нижний предел определения в масле 1 мг/л. Среднее значение определения 99 +/- 1%. Доверительный интервал среднего (при p = 0,95, n = 5) +/- 7,4%.

Реактивы и растворы. Вещества-стандарты ЭФ-165 и ТПФ (хроматографически чистые). Ацетон х.ч. Азот особой чистоты. Гелий газообразный очищенный. Водород из баллона или получаемый генератором водорода. Воздух из баллона или нагнетаемый микрокомпрессором.

Приборы и посуда. Хроматограф марки "Хром-5" или аналогичный с ТИД. Колонка хроматографическая стеклянная (1200 x 3 мм), заполненная инертоном-супер (0,16 - 0,20 мкм) с 3% SP-2100. Микрошприцы на 10 мкл. Микропипетки автоматические на 10 мкл (переменный объем) и 1 мл (переменный объем). Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 мл.

Подготовка к определению. Приготовление стандартных растворов.

Раствор а: к 0,99 мл ацетона прибавляют 10 мкл (0,01 мл) эфогама. Концентрация раствора а - 10 мг/мл (плотность чистого эфогама 1 г/мл).

Раствор б: к 0,5 мл раствора а добавляют 4,5 мл ацетона. Концентрация раствора б - 1 мг/мл.

Раствор в: к 0,5 мл раствора б прибавляют 4,5 мл ацетона. Концентрация раствора в - 0,1 мг/мл.

Раствор г: к 0,99 мл ацетона прибавляют 10 мкл ТПФ. Объемная доля ТПФ в растворе г равна 1 мкл/мл.

    Раствор д: к 50 мл ацетона прибавляют 50 мкл раствора г.  Объемная доля

                         -3

ТПФ в растворе д равна 10   мкл/мл.

    Сроки хранения стандартных растворов 2 мес.

    Ход  анализа. Построение калибровочного графика  (область  концентраций

      -3             -2

1 x 10    -  2  x  10    мг/мл).  В мерные  пробирки  помещают  1 мл масла,

используемого  в  качестве контроля, и соответственно 10; 50; 100 и 200 мкл

раствора  в   и  по  3  мл  раствора  д.   Содержимое  пробирок  интенсивно

перемешивают.   Получают   растворы,   соответствующие   образцам  масла  с

                          -3        -3        -2        -2

содержанием эфогама 1 x 10  , 5 x 10  , 1 x 10  , 2 x 10   мг/мл.  Объемная

                                                     -3

доля  внутреннего  стандарта  соответствует  3  x  10    мкл на 1 мл масла.

Готовят  также  образец,  не  содержащий  эфогама  и  ТПФ  (к  1  мл масла,

используемого  в  качестве  контроля,  добавляют  3  мл чистого ацетона), и

образец,  содержащий  только внутренний стандарт (к 1 мл контрольного масла

добавляют  3  мл  раствора д).  По 2 мкл указанных градуировочных растворов

вводят в хроматограф в такой последовательности: образец без эфогама и ТПФ,

образец,  содержащий только ТПФ, и далее в порядке возрастания концентрации

эфогама. Каждый из указанных растворов вводят в хроматограф дважды.

По полученным хроматограммам строят график зависимости отношения высоты пика эфогама (H) к высоте пика ТПФ от концентрации эфогама в пробе (C).

Сразу же после хроматографирования градуировочных растворов приступают к анализу пробы неизвестного образца, предварительно убедившись в полной чистоте микрошприца (отсутствие остатков в нем ЭФ-165 и ТПФ).

Анализ неизвестного образца. В мерную пробирку помещают 1 мл исследуемого образца подсолнечного масла, добавляют 3 мл раствора д и 2 мкл полученного раствора вводят в хроматограф.

Условия хроматографирования. Колонка длиной 1,2 м с внутренним диаметром 3 мм заполнена фазой 3% SP-2100 на инертоне-супер (0,16 - 0,20 мм). Температура (°C): колонки - 125 (газ-носитель азот) или 140 (газ-носитель гелий); испарителя - 200; детектора - 200.

Форколонку (стеклянная трубка длиной 10 см, диаметром 2,5 мм) вставляют в хроматографическую колонку со стороны инжектора и заполняют той же фазой, что и колонку. Расход газа-носителя 40 мл/мин., водорода - 28, воздуха - 250 мл/мин.

Соль щелочного металла в ТИД - сульфат натрия. Время выхода эфогама и ТПФ соответственно 16 и 4 мин. (газ-носитель азот, температура колонки 125 °C), 6 мин. и 1 мин. 30 с (газ-носитель гелий, температура колонки 140 °C).

После введения 20 проб, содержащих масло, требуется обновление содержимого форколонки с последующим кондиционированием при 300 °C в течение 4 - 6 ч.

Обработка результатов анализа. По полученным отношениям высот пиков эфогама и ТПФ определяют концентрацию эфогама в исследуемом образце, используя градуировочный график.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.