"Методические указания по определению топсина-М в персиках, фейхоа, хурме и зеленой растительности методом газожидкостной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

14 июля 1988 г. N 4655-88

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА, ХУРМЕ

И ЗЕЛЕНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Е.Г. Дауровой, В.М. Григой (НИИЦиГС).

Краткая характеристика препаратов дана в Методических указаниях N 3164-84.

Принцип метода. Метод основан на газохроматографическом определении метилтиофаната с ДПР на неподвижной фазе карбовакс 20 М после экстракции смесью хлороформ-ацетон и очистке экстракта путем перераспределения в системе водный этанол-хлороформ.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 108.

Таблица 108

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

┌────────────────────────────────────────────┬────────────────────────────┐

│ Параметры │ Анализируемый объект │

│ ├─────────────┬──────────────┤

│ │ персики, │ зеленая │

│ │хурма, фейхоа│растительность│

├────────────────────────────────────────────┼─────────────┼──────────────┤

│Диапазон определяемых концентраций, мг/кг │0,02 - 0,12 │0,20 - 0,60 │

│Предел определения, мг/кг │0,02 │0,20 │

│Предел обнаружения, мкг │0,5 │1,0 │

│Среднее значение определений, % │83,1 │73,6 │

│Стандартное отклонение, % │+/- 4,6 │+/- 7,7 │

│Доверительный интервал среднего (p = 0,95, │+/- 5,7 │+/- 9,4 │

│n = 5), % │ │ │

└────────────────────────────────────────────┴─────────────┴──────────────┘

Избирательность метода. Метод специфичен. Определению метилтиофаната не мешают другие соединения, применяемые для защиты персика и субтропических культур.

Реактивы и материалы. Хлороформ. Ацетон особой чистоты. Сульфат натрия безводный, ч.д.а. Этиловый спирт 60-процентный. Бумага фильтровальная. Вода дистиллированная. Стандартный раствор метилтиофаната в ацетоне (1 мкг/мл) - срок хранения в холодильнике 2 мес. Азот особой чистоты, газообразный. Карбовакс 20 М 15-процентный на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм). Алиезон-L 15-процентный на хроматоне N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм). Вата обезжиренная.

Приборы, аппаратура, посуда. Хроматограф "Цвет-100 М", модель 164 с ДПР. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы: лабораторные конические на 250 мл; круглодонные для отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания. Мерные цилиндры вместимостью 1 и 10 мл. Пробирки на 5 мл с притертыми пробками. Воронки делительные на 150 мл. Микрошприц на 10 мкл. Колонка спиральная стеклянная размером 100 x 0,3 см.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Навеску пробы плодов (25 г) измельчают, заливают 50 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон в объемном соотношении 9:1 и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу на 250 мл через слой безводного сульфата натрия, нанесенного на вату. В остаток добавляют 25 мл смеси хлороформ-ацетон (9:1) и встряхивают еще раз в течение 15 мин. Экстракты объединяют, отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C до объема 0,2 - 0,4 мл и высушивают на воздухе досуха. Остаток тщательно растворяют в 0,40 - 0,45 мл хлороформа, вносят в колбу 5 мл охлажденного 60-процентного этилового спирта и перемешивают содержимое. Пробу фильтруют через смоченный водой фильтр в делительную воронку, а остаток в колбе последовательно промывают 3 мл 60-процентного этилового спирта, 10 мл дистиллированной воды, переносят через фильтр в ту же делительную воронку. В пробу добавляют 12 мл воды, 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.) хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия и переносят его в колбу перегонного аппарата. Пробу концентрируют под вакуумом до 0,2 - 0,4 мл, а затем на воздухе досуха, добавляют 2 мл ацетона, перемешивают и вводят в хроматограф аликвоту объемом 2 - 5 мкл.

Пробу измельченной ножницами зеленой растительности (5 г) заливают 40 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон (9:1) и далее анализ проводят по схеме описанной экстракции из плодов.

Хроматографирование. Условия хроматографирования приведены в таблице 109.

Таблица 109

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ

┌────────────────────────────────────────┬────────────────────────────────┐

│ Параметры │ Фаза │

│ ├────────────────┬───────────────┤

│ │ карбовакс 20 М │ апиезон-L │

│ │ 15-процентный │ 15-процентный │

├────────────────────────────────────────┼────────────────┼───────────────┤

│Расход азота, мл/мин. │60 │60 │

│Температура, °C: │ │ │

│ испарителя │220 │220 │

│ термостата колонок │100 │80 │

│ детектора │230 │230 │

│Объем пробы, мкл │1 - 5 │1 - 5 │

│Время удерживания, с │130 │91 │

│Линейный динамический диапазон, нг │0,5 - 3,0 │1,0 - 5,0 │

│ │ -9 │ -9 │

│Рабочая шкала электрометра, А │4 x 10 │4 x 10 │

└────────────────────────────────────────┴────────────────┴───────────────┘

Обработка результатов анализа. Количественно пестицид определяют сравнением высот пиков исследуемого вещества и стандартного раствора. Содержание метилтиофаната (X, мг/кг) в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

AH V

2 2

X = ------,

H V P

1 1

где:

A - содержание препарата в объеме стандартного раствора, введенном в

хроматограф, нг;

H , H - высоты пиков соответственно стандартного раствора и

1 2

анализируемой пробы, мм;

V - объем аликвоты экстракта, введенный в хроматограф, мкл;

V - конечный объем экстракта пробы, мл;

P - навеска анализируемого образца, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.