Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4388-87

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НАБУ В МОРКОВИ МЕТОДОМ

ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Т.В. Ушаковой, С.В. Тулуповой (ВНИИССОК).

Краткая характеристика препарата приведена в Методических указаниях N 3880-85.

    Принцип метода. Метод заключается в проведении реакций превращения ряда

промежуточных продуктов разложения набу в соединение типа M SO , экстракции

                                                           2  2

препарата    хлороформом,    очистке    экстракта    перераспределением   в

несмешивающихся  растворителях,  дополнительной  очистке  хроматографией  в

тонком слое и количественном определении методом ГЖХ с применением ПИД.

    Метрологическая   характеристика   метода.   Минимально   детектируемое

количество  M SO   с  ПИД 50 нг. Линейный диапазон определения 50 - 400 нг.

             2  2

Нижний  предел определения 0,01 мг/кг. Среднее значение определения в пробе

82,0%.  Относительная  ошибка  определения (при p = 0,95, n = 5) составляет

+/- 5,3%.

    Реактивы  и  растворы.  Спирт  этиловый  96-процентный.   Универсальная

индикаторная   бумага.    Пероксид    водорода,    30-процентный   раствор.

М-Хлорнадбензойная  кислота  х.ч.  Гидроксид  натрия  х.ч.  Сульфат  натрия

безводный х.ч. Хлороформ ч. Пластинки "Силуфол".  Гипосульфит натрия ч.д.а.

Хлорид  натрия  ч.д.а.  Едкий натр, 0,05 н раствор.  Этилацетат х.ч. Гексан

х.ч.  Стандартный раствор  M SO   (100 мкг/мл)  хранится  в  холодильнике в

                            2  2

течение недели.

Приборы и посуда. Газожидкостный хроматограф "Хром-4" или другой с ПИД. Аппарат для встряхивания проб. Воронки химические и делительные (ВД-3-250). Испаритель ротационный ИР-1М. Камера для хроматографирования (любой сосуд с притертой крышкой). Автоматические пипетки с дискретными объемами 5; 10; 20; 50; 100; 200; 500; 1000 мкл. Конические колбы на 100 и 250 мл. Микрошприц на 10 и 100 мкл. Стаканчики. Пробирки вместимостью 5 мл с конусообразным дном.

Хранение проб. Пробы хранятся в течение 1 - 2 дней.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Измельченную пробу моркови (50 г) помещают в коническую колбу на 250 мл, заливают 150 мл смеси этилового спирта с водой (1:1) и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 1 ч. Полученный экстракт фильтруют через бумажный фильтр в колбу на 200 мл. Пробу и фильтр дважды промывают смесью спирта с водой. Далее подкисляют раствор до pH 3,0, промывают 0,5 мл 30-процентного раствора пероксида водорода и помещают в термостат при температуре 50 °C на 15 - 17 ч, после чего к инкубационной смеси добавляют 15 г хлорида натрия и 100 мл гексана. После встряхивания и разделения в делительной воронке гексановый слой отбрасывают. Препарат экстрагируют трижды хлороформом порциями по 10 мл. Объединенный хлороформный слой промывают 100 мл 0,05 н водного раствора едкого натра, содержащего 10 г хлорида натрия. Органическую фракцию фильтруют над безводным сульфатом натрия и затем выпаривают досуха на ротационном испарителе.

Остаток растворяют в 20 - 30 мг хлороформа и добавляют 20 мг М-хлорнадбензойной кислоты. Далее раствор помещают на 30 мин. в термостат при 30 °C. После этого его промывают 30 мл 3-процентного водного раствора гипосульфита натрия, содержащего 3 г хлорида натрия. Водный слой раствора отбрасывают. Органический слой фильтруют над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют его до объема 0,1 - 0,2 мл.

    Экстракт  количественно  переносят  на  пластинку   "Силуфол"  размером

2 х 15 см  (в пять точек по горизонтали на высоте 15 мм от края пластинки).

Пробу хроматографируют дважды:  в начале в системе этилацетат-гексан (3:1),

а затем, после подсушивания,  в  системе  гексан-ацетон  (2:1). Величина R

                                                                          f

препарата  при  этих  условиях  хроматографирования составляет 0,20 - 0,25.

Основываясь на этом, с пластинки счищают полосу силикагеля с R  0,18 - 0,40

                                                              f

на  воронку  с  бумажным  фильтром,   затем  смывают  ацетоном  препарат  в

конусообразную   пробирку   вместимостью  5  мл.  Растворитель  в  пробирке

выпаривают  досуха,  и  далее автоматической пипеткой приливают необходимое

количество ацетона в зависимости от предполагаемого содержания гербицида.

Условия хроматографирования. Хроматограф "Хром-4" с ПИД. Стеклянная колонка длиной 1,2 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-210 на хромосорбе N-AW-HCMS (80 - 100 меш). Температура (°C): испарителя - 280, колонки - 270. Скорость потока азота 30 мл/мин., водорода - 34, воздуха - 300 мл/мин. Рабочая шкала электрометра 1:10. Время удерживания 9 мин. 36 с. В колонку хроматографа вводит аликвоту ацетонового раствора (5 - 10 мкл).

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения рассчитываемого пика с пиком, полученным при введении известного количества стандартного вещества, при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора. Количественную оценку пиков хроматограммы проводят по площади пика.

Количество препарата в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                    C  V S

                                     ст 2

                                X = ------,

                                    S  V P

                                     ст 1

    где:

    C    -  количество  препарата  во  введенном  в хроматограф стандартном

     ст

растворе, мг;

    S и S   - площади пика рабочей пробы и стандартного раствора препарата,

         ст

введенных в хроматограф, кв. мм;

    V  - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;

     1

    V  - общий объем экстракта после упаривания, мл;

     2

    P - масса анализируемой пробы, кг.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.