"Методические указания по определению топсина-М и БМК при совместном присутствии в персиках, фейхоа и хурме методом тонкослойной хроматографии" // Технорма.RU

Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4337-87

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М И БМК ПРИ СОВМЕСТНОМ

ПРИСУТСТВИИ В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА И ХУРМЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны В.М. Григой, Е.Г. Дауровой (НИИЦиГС).

Краткая характеристика препаратов дана в Методических указаниях N 3164-84. Топсин-М, топсин-НФ-44. В процессе метаболизма и при гидролизе образуется биологически активное соединение - системный фунгицид БМК, метил-N-(2-бензимидазолил)-карбамат.

Принцип метода. Метод основан на определении метилтиофаната и БМК методом ТСХ после извлечения из растительного материала раствором азотной кислоты (pH 1) и очистке экстракта путем перераспределения в системе вода-хлороформ и в тонком слое силикагеля.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 107. Метод специфичен. Определению метилтиофаната в БМК не мешают другие пестициды, применяемые в сельском хозяйстве для защиты персика и субтропических культур.

Таблица 107

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИЛТИОФАНАТА И БМК

┌──────────────────────┬──────────────┬───────────────────────────────────┐

│ Параметры │ Пестицид │ Анализируемый объект │

│ │ ├───────────┬───────────┬───────────┤

│ │ │ персики │ фейхоа │ хурма │

├──────────────────────┼──────────────┼───────────┼───────────┼───────────┤

│Диапазон определяемых │Метилтиофанат │0,04 - 0,20│0,03 - 0,20│0,04 - 0,20│

│концентраций, мг/кг │БМК │0,06 - 0,20│0,05 - 0,20│0,05 - 0,20│

│Предел обнаружения, │Метилтиофанат │2,0 │0,9 │2,0 │

│мкг │БМК │1,5 │1,4 │1,5 │

│Предел определения, │Метилтиофанат │0,04 │0,03 │0,03 │

│мг/кг │БМК │0,06 │0,05 │0,05 │

│Среднее значение │Метилтиофанат │83,0 │85,8 │84,1 │

│определения, % │БМК │85,1 │87,1 │86,8 │

│Стандартное │Метилтиофанат │+/- 9,0 │+/- 8,2 │+/- 8,4 │

│отклонение, % │БМК │+/- 8,8 │+/- 8,1 │+/- 8,4 │

│Доверительный интервал│Метилтиофанат │+/- 9,5 │+/- 7,8 │+/- 8,0 │

│среднего (p = 0,95, │БМК │+/- 9,3 │+/- 7,7 │+/- 8,0 │

│n = 6), % │ │ │ │ │

└──────────────────────┴──────────────┴───────────┴───────────┴───────────┘

Реактивы и материалы. Азотная кислота ч. Вода дистиллированная. Вата обезжиренная гигроскопическая. Ацетон особой чистоты. Аммиак водный ч.д.а. Хлороформ. Бромфеноловый синий ч.д.а. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Этилацетат ч. Азотнокислое серебро, ч.д.а., 1-процентный водный раствор. Ледяная уксусная кислота х.ч. Этиловый спирт. Бумага фильтровальная. Стандартные растворы метилтиофаната и БМК в хлороформе (100 мкг/мл). Срок хранения в холодильнике 2 мес. Проявляющий реагент: 50 мл 1-процентного водного раствора азотнокислого серебра смешивают с 50 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение месяца.

Приборы, аппаратура, посуда. Колбы: лабораторные конические на 250 мл;

круглодонные для отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания.

Воронки делительные на 150 мл. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Пластинки

"Силуфол" УФ или "Силуфол". Камера для хроматографирования. Испаритель

254

ротационный. Воронки химические на 150 мл. Камера для опрыскивания

хроматографических пластинок. Пульверизатор стеклянный.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Навеску пробы 25 г тщательно измельчают, заливают 40 мл водного раствора азотной кислоты (pH 1) и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Пробу выдерживают в течение 20 мин. при минус 4 °C и экстракт фильтруют через обезжиренную вату в делительную воронку. Остаток промывают 20 мл охлажденного водного раствора азотной кислоты. Экстракты объединяют, подщелачивают 10-процентным раствором водного аммиака до pH 7, добавляют в пробу 40 мл хлороформа и встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.) хлороформный слой переносят через безводный сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя на 100 мл и отгоняют при температуре 40 °C до 0,4 - 0,5 мл.

Определение пестицидов методом ТСХ. Пробу наносят на хроматографическую

пластинку "Силуфол" УФ или "Силуфол". Слева от пробы наносят стандартные

254

растворы метилтиофаната и БМК и хроматографируют в системе растворителей

хлороформ-этилацетат-ледяная уксусная кислота в объемном соотношении 5:5:1.

Величина R метилтиофаната 0,51 + 0,03; R БМК 0,37 +/- 0,02. Можно

f f

использовать систему диэтиловый эфир-гексан (5:1). Величина R

метилтиофаната 0,40 +/- 0,03; R БМК 0,12 +/- 0,3. После высушивания

пластинки нагревают в течение 10 мин. при 70 °C, затем обрабатывают

проявляющим реагентом. Фон пластинки обесцвечивают 2,5-процентным раствором

уксусной кислоты. Линейность детектирования метилтиофаната сохраняется в

пределе 0,3 - 5,0 мкг, БМК - 1,0 - 5,0 мкг. Метилтиофанат проявляется в

виде сиреневых пятен на желтом фоне, БМК - в виде синих пятен. Обнаружение

пестицидов можно проводить в УФ-свете при использовании пластинок "Силуфол"

УФ . Зоны локализации проявляются в виде сиреневых пятен. Нижние пределы

254

обнаружения составляют 1,0 мкг для обоих пестицидов.

Обработка результатов анализа. Количественно метилтиофанат и БМК определяют путем сравнения интенсивности окраски и размеров площади пятен исследуемого вещества в пробе и стандартного раствора. Содержание анализируемого соединения в плодах (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

100 AS

X = -------,

S P

где:

A - количество фунгицидов в стандартном растворе, мкг;

S , S - площади пятен соответственно стандартного раствора и пробы,

1 2

кв. мм;

P - масса исследуемой пробы, г.

Требования безопасности. Соблюдать общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами.