Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4337-87

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО УСКОРЕННОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНУРОНА, КОТОРАНА, ДИКУРАНА

В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Г.С. Куликовой, В.Е. Кириченко, К.И. Пашкевичем (Отдел ТОС ИХ БНЦ УрО АН СССР, Свердловск).

Краткая характеристика препаратов указана в Методических указаниях N 2365-81, N 2839-83, N 3187-85, N 4710-88.

Принцип метода. Метод основан на экстракции препаратов из анализируемых проб органическим растворителем, очистке экстракта перераспределением и количественном определении методом ГЖХ с ДЭЗ в виде соответствующих N-гептафторбутирильных производных после обработки гептафтормасляным ангидридом.

Метрологическая характеристика метода. Метрологические данные приведены в таблице 110.

Таблица 110

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ФЕНУРОНА, КОТОРАНА, ДИКУРАНА (n = 5, p = 0,95)

┌────────┬─────────────┬────────────┬──────────────┬─────────────┐

│Пестицид│Анализируемый│   Предел   │   Среднее    │ Стандартное │

│        │   объект    │определения,│   значение   │ отклонение, │

│        │             │мг/л, мг/кг │определения, %│      %      │

├────────┼─────────────┼────────────┼──────────────┼─────────────┤

│Фенурон │Вода         │0,004       │103           │+/- 5,6      │

│        │Почва        │0,04        │83            │+/- 2,3      │

│Которан │Вода         │0,002       │98            │+/- 3,6      │

│        │Почва        │0,04        │85            │+/- 1,4      │

│Дикуран │Вода         │0,006       │103           │+/- 2,1      │

│        │Почва        │0,06        │92            │+/- 2,3      │

└────────┴─────────────┴────────────┴──────────────┴─────────────┘

Избирательность метода. Метод специфичен. Другие фенилмочевины определению не мешают.

    Реактивы и растворы. Хлороформ х.ч., перегнанный. Ацетон ч. Бензол х.ч.

Гептафтормасляный  ангидрид (C F CO)  O ч.  Сульфат  натрия  безводный,  ч.

                              3 7   2

Хлорид кальция ч., 1-процентный в.р.  Серная кислота ч. Азот особой чистоты

или аргон ч. Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм)  с  5% XE-60.  Стандартные

растворы  фенурона,  которана, дикурана в бензоле концентрацией 100 мкг/мл.

Стандартные растворы фенурона, которана, дикурана в бензоле  концентрациями

0,25;   0,50;   0,75  и 1,00  мкг/мл  (готовят  из  раствора  концентрацией

100 мкг/мл).

Приборы и посуда. Хроматограф "Цвет-164" или аналогичный с ДЭЗ. Колонка стеклянная размером 1 м x 3 мм. Встряхиватель любого типа. Ротационный испаритель вакуумный любого типа. Баня глицериновая. Термометры электроконтактные до 100 °C. Воронки: химические; делительные на 100 мл; фильтрующие. Колбы: круглодонные на 100 мл; плоскодонные конические на 25 и 100 мл; мерные на 50 мл. Пробирки градуированные на 10 мл. Пипетки на 1; 5 и 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл МШ-10. Фильтры бумажные.

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды 50 мл помещают в делительную воронку, добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и трижды экстрагируют хлороформом по 10; 5 и 5 мл. Хлороформные экстракты осушают, пропуская через фильтрующую воронку с сантиметровым слоем безводного сульфата натрия, собирают в круглодонной колбе, смывают сульфат натрия 2 мл хлороформа и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при 40 - 50 °C до нескольких капель, которые затем выдувают в токе воздуха.

Пробу почвы 5 г помещают в плоскодонную колбу, добавляют 10 мл экстрагента - смесь равных объемов ацетона и 1-процентного водного раствора хлорида кальция. Колбу встряхивают на аппарате для встряхивания 30 мин. и отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Операцию повторяют дважды и смывают колбу и фильтр 5 мл смеси. Из объединенного экстракта на ротационном испарителе отгоняют ацетон при 50 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку, добавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты. Колбу для отгонки споласкивают 10 мл хлороформа, переносят его в делительную воронку и экстрагируют гербициды хлороформом. Разделяют слои. Экстракцию хлороформом повторяют еще 2 раза порциями по 5 мл при встряхивании в течение 2 мин. Хлороформные экстракты осушают, пропуская через фильтрующую воронку с сантиметровым слоем безводного сульфата натрия, который затем промывают 2 мл хлороформа. Экстракты собирают в круглодонную колбу, отгоняют растворитель на ротационном испарителе при 40 - 50 °C до нескольких капель, которые затем выдувают в токе воздуха.

Получение производных для ГЖХ. В колбу для отгонки растворителя приливают 2 мл бензола, тщательно встряхивают, прибавляют микрошприцем 20 мкл гептафтормасляного ангидрида, переносят реакционную смесь в градуированную пробирку, закрывают притертой пробкой и выдерживают на глицериновой бане при 50 - 60 °C в течение 15 мин. Затем в пробирку приливают 5 мл дистиллированной воды, встряхивают 30 с, сразу после расслоения отбирают из верхнего слоя микрошприцем 5 мкл раствора и вводят в хроматограф.

    Условия  хроматографирования.  Хроматограф  типа  "Цвет" с ДЭЗ. Колонка

стеклянная  длиной  1 м, диаметром 3 мм, заполненная хроматоном N-AW-DMCS с

5% XE-60. Температура, °C: испарителя - 200, детектора - 250, колонки - 140

или  160.  Расход  газа-носителя  через  колонку  45  мл/мин.,  на продувку

                                                            -11

детектора  150  мл/мин.  Рабочая  шкала  электрометра 2 x 10    А. Скорость

диаграммной  ленты  200  мм/ч.  Время  удерживания  производных: фенурона -

6 мин. 4 с,  которана - 4 мин. 48 с при 140 °C, дикурана - 10 мин. 26 с при

160 °C,  гексанхлорбензола - 4 мин.  45  с  при  140 °C  и  3 мин. 24 с при

160 °C.  Линейность детектирования: для фенурона - 0,2 - 2,5 нг, которана -

0,1 - 2,5 нг, дикурана - 0,4 - 4,0 нг.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят по градуировочному графику. Для построения градуировочного графика в градуированные пробирки вносят по 1 мл стандартного раствора гербицидов в бензоле, содержащего 0,25; 0,50; 0,75 и 1,00 мкг гербицида, приливают микрошприцем по 20 мкл гептафтормасляного ангидрида и проводят ацилирование и анализ ГЖХ так, как описано выше. Строят график зависимости высоты пика от количества гербицида, введенного в хроматограф.

Содержание гербицида в анализируемой пробе (X, мг/л или мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                     AV

                                       1

                                 X = ----,

                                     V P

                                      2

    где:

    A - количество гербицида, найденное по градуировочному графику, нг;

    V  - общий объем бензольного раствора, мл;

     1

    V  - объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мкл;

     2

    P - масса анализируемой пробы, г или мл.