Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1987 г. N 4325-87

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГОАЛА В ПОЧВЕ, ЭФИРОМАСЛИЧНЫХ РАСТЕНИЯХ

И ЭФИРНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Ю.С. Барановым (ВНИИЭМК).

Краткая характеристика препарата приведена в Методических указаниях N 3063-84.

Принцип метода. Метод основан на извлечении гоала из почвы и растительных проб ацетоном с последующим перераспределением из водно-ацетоновой смеси в н-гексан, очистке гексановых экстрактов концентрированной серной кислотой и определении методом ГЖХ с ДПР.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество гоала 0,1 нг. Остальные параметры приведены в таблице 59.

Таблица 59

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГОАЛА

(n = 5, p = 0,95)

┌────────────────────────────────────────────────┬────────────────────────┐

│                   Параметры                    │  Анализируемый объект  │

│                                                ├───────┬────────┬───────┤

│                                                │ почва │растения│эфирное│

│                                                │       │        │ масло │

├────────────────────────────────────────────────┼───────┼────────┼───────┤

│Нижний предел определения, нг                   │0,002  │0,004   │0,02   │

│Среднее значение определения (при n = 15), %    │89,4   │79,8    │80,5   │

│Стандартное отклонение, %                       │+/- 2,1│+/- 2,3 │+/- 2,1│

│Доверительный интервал среднего, %              │+/- 5,1│+/- 5,6 │+/- 5,2│

└────────────────────────────────────────────────┴───────┴────────┴───────┘

Избирательность метода. Метод селективен в присутствии ХОП и ФОП, определению не мешают фенилзамещенные мочевины, симм-триазины, амиды, трефлан, стомп, нитрохлор, префоран.

Реактивы и растворы. Ацетон ч. н-Гексан ч. Серная кислота ч. Бензол. Оксид алюминия для хроматографии ч., II степени активности по Брокману. Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30. Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 5% XE-60. Стандартные растворы гоала в гексане с содержанием 10; 1 и 0,1 мкг/мл. Растворы гоала стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 мес.

Приборы и посуда. Хроматограф газовый с ДЭЗ "Цвет-106", "Цвет-164", "Газохром-1106" и др. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Гомогенизатор. Весы технические и аналитические. Воронки делительные. Колбы: плоскодонные конические; грушевидные остродонные; круглодонные; мерные на 100 мл. Мензурки на 100 и 50 мл. Пипетки на 1 и 10 мл. Пробирки на 10 и 20 мл типа ПЧО. Микрошприцы на 10 мкл. Колонка для хроматографии длиной 100 мм с диаметром 15 мм.

Подготовка к определению. Органические растворители (ацетон, н-гексан, бензол) перед началом работы следует очистить по соответствующим методикам и перегнать, сульфат натрия прокалить при 300 - 400 °C. Хроматографическую колонку кондиционируют в режимных условиях в течение 2 ч.

Отбор проб. Для анализа отбирают среднюю пробу почвы массой 100 г, растений-эфироносов - 50 г, эфирного масла - 10 г. Пробы хранят в холодильнике при 5 °C не более суток.

Ход анализа. Экстракция. Пробу измельченной и просеянной через сито почвы (100 г) помещают в колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и экстрагируют 1 ч, используя механический встряхиватель; оставляют на ночь. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 500 мл. Остаток на фильтре дважды промывают ацетоном порциями по 30 мл. Фильтрат концентрируют до объема 10 мл на ротационном испарителе при температуре водяной бани 50 °C. Остаток с 30 мл н-гексана переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды, встряхивают и отделяют верхний слой, пропуская его через 100 г безводного сульфата натрия. Оставшийся водный раствор дважды экстрагируют н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты пропускают через безводный сульфат натрия и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл бензола, закрывают колбу и вращают ее. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора. Если экстракт окрашен, бензольный раствор переносят количественно (4 мл бензола) в пробирку с притертой пробкой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, энергично встряхивают и оставляют на 10 - 20 мин. После расслоения фаз в хроматограф вводят 2 мкл бензольного слоя.

Свежесрезанные эфиромасличные растения (50 г) гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 - 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 - 40 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу на 500 мл. Остаток на фильтре дважды промывают ацетоном порциями по 50 мл. Фильтрат концентрируют на ротационном испарителе до объема 10 мл при температуре водяной бани 50 °C. Остаток количественно с 30 мл н-гексана переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды, встряхивают и отделяют верхний слой, пропуская его через 100 г безводного сульфата натрия. Оставшийся водный раствор дважды экстрагируют н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенные экстракты пропускают через безводный сульфат натрия и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 5 мл бензола и 1 мл концентрированной серной кислоты, энергично встряхивают и оставляют на 10 - 20 мин. После расслоения фаз в хроматограф вводят 2 мкл бензольного раствора.

Если проба окрашена, проводят дополнительную очистку на колонке с оксидом алюминия. Для этого отбрасывают на делительной воронке слой серной кислоты, а оставшийся бензольный раствор переносят на предварительно промытую бензолом хроматографическую колонку, заполненную смесью из 6 г оксида алюминия и 2 г безводного сульфата натрия. Элюируют гоал 60 мл бензола. Элюат концентрируют до 1 мл на ротационном испарителе и 2 мкл раствора вводят в испаритель хроматографа.

Навеску эфирного масла (10 г) растворяют в 50 мл н-гексана. В делительной воронке вместимостью 250 мл гексановый раствор трижды промывают концентрированной серной кислотой порциями по 30 мл. Верхний гексановый слой пропускают через безводный сульфат натрия. Серную кислоту собирают и через 1,5 - 2 ч снова отделяют гексановый слой, который присоединяют к основному раствору. Объединенный гексановый раствор упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл бензола, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора.

Если проба очищена недостаточно, проводят дополнительную очистку на колонке с оксидом алюминия.

    Условия  хроматографирования.  Используют стеклянные спиральные колонки

длиной  1  м  с  внутренним диаметром 3 мм. Расход газа-носителя 60 мл/мин.

Температура (°C): испарителя - 250, термостата детекторов - 250, термостата

колонок  -  190.  Хроматографируемый  объем  2  мкл.  Линейный динамический

                                                               -12

диапазон  0,1  -  10  нг.  Рабочая  шкала  электрометра 20 x 10    А. Время

удерживания гоала на SE-30 - 7 мин. 45 с, на XE-60 - 9 мин. 9 с.

Обработка результатов анализа. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                     HV

                                       1

                                 X = ----,

                                     V KA

                                      2

    где:

    H - высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;

    V  - объем анализируемой пробы, мл;

     1

    V  - объем инъектируемой пробы, мкл;

     2

    A - навеска, г;

    K - калибровочный коэффициент, определяемый по формуле:

                            H     H           H

                         1   1     2           n

                     K = - (--- + --- + ... + ---),

                         n  CV    CV          CV

                              1     2           n

    где:

    H , H , H  - высоты пиков стандартных растворов гоала, мм;

     1   2   n

    V ,   V ,   V   -  объемы  стандартных  растворов  гоала,  вводимых   в

     1     2     n

хроматограф, мкл;

    C  -  концентрация  стандартного раствора гоала (0,5 мкг/мл).

Содержание гоала в пробах почвы, растений и эфирного масла вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

Требования безопасности. Следует руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего класса токсичности и легколетучими растворителями.