Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

28 мая 1986 г. N 4119-86

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА И ЕГО МЕТАБОЛИТА

ДИМЕТИЛСУЛЬФОНА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

В САХАРНОЙ СВЕКЛЕ, КАРТОФЕЛЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика веществ

1.1. Название по номенклатуре СЭВ, ИСО: диметилсульфоксид (метилсульфоксид).

Химическое название: диметилсульфоксид.

    Структурная формула диметилсульфоксида: CH -SO-CH .

                                              3      3

    Эмпирическая формула диметилсульфоксида: C H SO.

                                              2 6

    Молекулярная масса диметилсульфоксида 78.

    Синонимы: димексид.

    Физико-химические свойства. Диметилсульфоксид - бесцветная жидкость или

кристаллы  с  температурой  плавления 18,5 °С, температура кипения - 189 °С

                                                        20            20

при  760  мм  рт.  ст.,  86  °С  при  18  мм  рт. ст., п   - 1,4770, d    -

                                                        Д             4

1,1014. Смешивается с водой, спиртом, бензолом. ЛД   орально - 4 - 28 г/кг,

                                                  50

внутривенно - 2,4 - 4 г/кг. Токсичность диметилсульфоксида  меньше,  чем  у

растворов  хлорида  натрия, лишен  тератогенной активности. МДУ в продуктах

растительного происхождения (свекла, бобы,  зерно  и  др.)  1  -  8  мг/кг.

Применяется в качестве стимулятора роста в дозе 10 кг/га.

    1.2. Химическое название: диметилсульфон.

    Структурная формула: CH -SO -CH .

                           3   2   3

    Эмпирическая формула: C H SO .

                           2 6  2

    Молекулярная масса 94.

Физико-химические свойства: белое кристаллическое вещество с температурой плавления 238 °С, растворим в воде, нитрометане, спирте. Является метаболитом диметилсульфоксида в окружающей среде.

2. Методика определения диметилсульфоксида

и диметилсульфона в сахарной свекле, картофеле

и зеленой массе методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции диметилсульфоксида из анализируемых образцов хлороформом, а диметилсульфона - нитрометаном, концентрировании экстрактов и газохроматографическом определении диметилсульфоксида и диметилсульфона с использованием пламенно-ионизационного детектора. Количественное определение проводят по методу абсолютной калибровки с помощью калибровочного графика.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

┌─────────────────────────┬────────────────────────────────┬──────────────┐

│Наименование показателей │       Диметилсульфоксид        │Диметилсульфон│

│                         ├─────────────────┬──────────────┤              │

│                         │свекла, картофель│    листья    │              │

├─────────────────────────┼─────────────────┼──────────────┼──────────────┤

│1. Диапазон определяемых │2,0 - 50 мг/кг   │2,0 - 50 мг/кг│2,0 - 50 мг/кг│

│концентраций             │                 │              │              │

│2. Предел обнаружения    │0,02 мкг         │0,02 мкг      │0,02 мкг      │

│3. Предел обнаружения в  │2,5 мг/кг        │2,5 мг/кг     │2,0 мг/кг     │

│пробе                    │                 │              │              │

│4. Среднее значение      │89,5%            │93,5%         │93,5%         │

│определения стандартных  │                 │              │              │

│количеств                │                 │              │              │

│5. Число параллельных    │10               │11            │9             │

│определений, n           │                 │              │              │

│6. Стандартное отклоне-  │8,8              │7,9           │9,6           │

│ние, S                   │                 │              │              │

│7. Доверительный интервал│89,5 +/- 5,9%    │93,5 +/- 5,7% │93,5 +/- 7,4% │

│среднего при Р = 0,95 и  │                 │              │              │

│n - 1                    │                 │              │              │

└─────────────────────────┴─────────────────┴──────────────┴──────────────┘

2.1.3. Избирательность метода

Определению не мешают гербициды, применяемые в посевах сахарной свеклы и картофеля (ленацил, 2,4-Д, метоксихлор, эптам и др.).

2.2. Реактивы и материалы

Диметилсульфоксид, хч, ТУ 6-09-3818-77.

Диметилсульфон, ч, ТУ 6-09-4719-79.

Нитрометан, ч, ТУ 6-09-11-876-77.

Хлороформ, ГОСТ 215-74.

Натрия сульфат безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Натрия сульфит безводный, ГОСТ 195-77.

Стационарная жидкая фаза: карбовакс 20 М, нанесенный в количестве 5,0% на инертон AW (фр. 0,20 - 0,25 мм).

Азот газообразный, ГОСТ 9293-74, в баллоне с редуктором.

Водород, ГОСТ 3022-70, в баллоне с редуктором.

Силикагель КСК (фр. 0,20 - 0,25 мм), ГОСТ 3956-76.

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф серии "Цвет" с пламенно-ионизационным детектором.

Колонка стеклянная длиной 1,30 м и внутренним диаметром 3 мм.

Колбы мерные, мензурки, цилиндры, ГОСТ 1770-74.

Колбы конические со шлифом емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.

Воронки конусообразные, d 56, ГОСТ 6613-75.

Концентраторы или колбы для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.

Пробирки градуированные со шлифом, ГОСТ 10515-75.

Ступка с пестиком фарфоровая.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Приготовление стандартных и калибровочных растворов

Стандартный раствор диметилсульфоксида с концентрацией 5 мг/мл готовят растворением навески 0,0500 г в 10 мл хлороформа.

Стандартный раствор диметилсульфона с концентрацией 5 мг/мл готовят растворением навески 0,0500 г в 10 мл нитрометана.

Срок хранения растворов в холодильнике 1 месяц.

2.4.2. Построение калибровочных графиков

При построении калибровочных графиков для определения диметилсульфоксида и диметилсульфона готовят 2 набора искусственных смесей: в пробирки с притертыми пробками помещают 5; 10; 15; 20; 30; 40; 50 мкл стандартных растворов, что соответствует 25; 50; 75; 100; 150; 200; 250 мкг этих веществ. Стандартные количества диметилсульфоксида растворяют в 1 мл хлороформа и хроматографируют по 1 мкл каждый. Стандартные количества диметилсульфона растворяют в 1 мл нитрометана и хроматографируют по 1 мкл каждый. Хроматографирование каждого раствора проводят трижды. На хроматограммах измеряют высоту соответствующих пиков, вычисляют среднее арифметическое и строят графики зависимости высоты пика вещества от его количества.

2.4.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Инертон с нанесенной на него стационарной жидкой фазой засыпают в хроматографическую колонку, устанавливают ее в термостат хроматографа и стабилизируют в токе азота в течение 8 - 10 час. при температуре 150 °С, не подключая к детектору.

2.5. Отбор проб

Отбор проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21 августа 1979 г., N 2051-79.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Определение диметилсульфоксида в свекле и картофеле

В 10 г измельченной на терке пробы засыпают 13 г сульфита натрия безводного, заливают 15 - 20 мл хлороформа и встряхивают в течение часа. После чего растворитель сливают в отгонную колбу, экстракцию повторяют 10 мл свежего хлороформа. Экстракты объединяют и выпаривают в токе воздуха до объема 1 мл. Хроматографируют аликвоту 1 - 2 мкл.

2.6.2. Определение диметилсульфоксида в зеленой массе

10 г нарезанных или натертых листьев смешивают с 3 г силикагеля и 20 г безводного сульфата натрия и растирают в ступке до полного измельчения листьев.

Растертую массу переносят в коническую колбу, заливают 15 - 20 мл хлороформа и встряхивают в течение часа. Далее проводят обработку пробы, как описано в п. 2.6.1.

2.6.3. Определение диметилсульфона в свекле, картофеле и зеленой массе

10 г пробы измельчают и заливают 15 мл нитрометана, встряхивают пробу в течение часа и сливают растворитель в отгонную колбу. Остаток заливают еще 5 мл нитрометана и встряхивают 0,5 часа, после чего отфильтровывают экстракт в ту же отгонную колбу. Отгонную колбу помещают в стакан с теплой водой и экстракт концентрируют в токе воздуха до 1 мл. Хроматографируют 1 - 2 мкл.

Условия хроматографирования:

                                         -12

    - рабочая шкала электрометра 100 х 10    мА;

    - скорость протяжки картограммы 200 мм/ч;

    - колонка стеклянная  размером 130 х 0,3 см, заполненная инертоном AW с

5% карбовакса 20 М;

    - температура  термостата  колонок  для  диметилсульфоксида  (I) - 80°,

диметилсульфона (II) - 100 °С:

      испаритель для I - 100 °С;

                     II - 150 °С;

    - расход газа-носителя через колонку 40 мл/мин.;

    - расход водорода 60 мл/мин.;

    - расход воздуха 600 мл/мин.;

    - объем, вводимый в испаритель, 1 - 2 мкл;

    - линейность детектирования для I - 0,03 - 0,50 мкг;

                                    II - 0,02 - 0,50 мкг;

    - абсолютное время удерживания при данных условиях для I - 4 мин. 12 с;

                                                           II - 8 мин.

Хроматографируют каждую пробу трижды, измеряют высоты пиков, вычисляют среднее значение высоты и по калибровочному графику для соответствующего вещества находят количество диметилсульфоксида или диметилсульфона в аликвоте экстракта.

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание диметилсульфоксида (диметилсульфона) в пробе (Х) в мг/кг вычисляют по формуле:

                                 100 х А х V

                                            2

                             Х = ------------,

                                  V  х Р х R

                                   1

    где:

    А  -  количество  I  (или  II)  в аликвоте, найденное по калибровочному

графику, мкг;

    V  - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, мл;

     1

    V  - общий объем экстракта, мл;

     2

    Р - навеска анализируемой пробы, г;

    R  -  среднее  значение  определения  стандартных  количеств, найденное

предварительно, %.

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР N 2455 от 20.10.1981.

4. Разработчики

Пиленкова Инна Иосифовна, Фатьянова Анна Давыдовна.

Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г. Уфа.