Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

21 ноября 1985 г. N 4032-85

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИАЛЛАТА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

ХРОМАТОГРАФИИ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕРНЕ ПШЕНИЦЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика вещества

Название по номенклатуре СЭВ, ИСО: триаллат.

Химическое название: S-(2,3,3-трихлораллил)-N,N-диизопропилтиокарбамат.

Структурная формула:

    (CH ) CH

       3 2  \

             N-CO-SCH CCl=CCl

            /        2       2

    (CH ) CH

       3 2

    Эмпирическая формула: C  H  NOCl S.

                           10 16    3

Молекулярная масса - 304,7.

Физико-химические свойства: светло-бурое кристаллическое вещество с неприятным запахом. Температура плавления - 29 - 30 °С; Т кип. - 165° при 6 мм рт. ст. Растворимость в воде - 4 мг/л (при 20 °С); растворяется в органических растворителях (ацетон, бензол, этанол и др.).

Применяется в качестве гербицида в посевах пшеницы, ячменя для уничтожения овсюга и в посевах льна против плевела льняного.

    Малотоксичен  для  теплокровных,  ЛД   для  крыс  -  1340 мг/куб. м, не

                                        50

опасен для пчел, токсичен  для  гидробионтов,  умеренно  стоек  во  внешней

среде,  в  почве  сохраняется  2  -  3 мес. Остатков в пищевых продуктах не

допускается.

2. Методика определения триаллата в воде, почве и зерне

пшеницы методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении триаллата из воды и зерна пшеницы экстракцией органическими растворителями, из почвы - отгонкой с водяным паром с последующей экстракцией из водного дистиллята гексаном и газохроматографическом определении на приборе с детектором по захвату электронов. Количественное определение проводят по методу сравнения со стандартом.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций для воды - 0,0001 - 0,4 мг/л, для почвы - 0,005 - 2 мг/кг, для зерна пшеницы - 0,0005 - 0,2 мг/кг.

Предел обнаружения - 0,0001 мкг.

Предел обнаружения: для воды - 0,0001 мг/л, для почвы - 0,005 мг/кг, для зерна пшеницы - 0,0005 мг/кг.

Среднее значение определения стандартных количеств триаллата в воде - 92,0%, в почве - 84,0%, в зерне пшеницы - 89%.

Число параллельных определений П = 6.

Стандартное отклонение для воды - 4,73%, для почвы - 6,36%, для зерна пшеницы - 5,5%.

Относительное стандартное отклонение для воды - 0,05, для почвы - 0,075, для зерна пшеницы - 0,062.

Доверительный интервал среднего в % при Р = 0,95 и n - 10 составляет для воды - 92,0 +/- 4,96, для почвы - 84,0 +/- 6,67; для зерна пшеницы - 89,0 +/- 5,8.

2.1.3. Избирательность метода

Определению не мешают пестициды ряда феноксиалканкарбоновых кислот (2,4-Д; 2,4-ДП; 2М-4Х и др.) и тиокарбаматы.

2.2. Реактивы и материалы

Триаллат с содержанием основного вещества не менее 98,5%.

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.

Сульфат натрия безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Толуол, хч, ГОСТ 5789-78.

Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-74.

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.

Оксид алюминия L 40/250 щелочной для колоночной хроматографии производства ЧССР.

Насадка для хроматографической колонки: хроматон N-AW-DMCS (фр. 0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30 фирмы "Хемапол".

Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ 9293-74, в баллоне с редуктором.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Хроматограф с детектором по захвату электронов.

Колонка стеклянная длиной 150 см, внутренним диаметром 8 мм.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя емкостью 100 мл.

Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.

Воронка делительная емкостью 500 - 1000 мл, ГОСТ 8613-75.

Пробирки градуированные со шлифом, ГОСТ 16515-75.

Воронки конусообразные, ГОСТ 8615-75.

Установка для отгонки с водяным паром (схема, см. рис. 1 - здесь и далее рисунки не приводятся).

Мельница лабораторная (кофемолка).

Микрошприц емкостью 10 мкл, ТУ 2-333-106.

2.4. Подготовка к определению

Приготовление стандартных растворов.

Стандартный раствор триаллата N 1 с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением навески 0,01 г в 10 мл толуола.

Стандартный раствор триаллата N 2 с концентрацией 1 нг/мкл готовят разбавлением 10 мкл раствора N 1 до 10 мл толуолом.

Стандартный раствор триаллата N 3 с концентрацией 0,1 нг/мкл готовится разбавлением 1 мл стандартного раствора N 2 до 10 мл толуолом.

Срок хранения растворов 10 дней.

2.5. Отбор пробы

Отбор пробы проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР за N 2051-79 от 21 августа 1979 г.

2.6. Проведение определения

Вода. Пробу воды (50 - 500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют дважды гексаном порциями по 50 мл. Объединенные экстракты пропускают через коническую воронку с безводным сульфатом натрия (5 г). Фильтрат собирают в грушевидную колбу для отгонки и концентрируют с помощью ротационного испарителя (температура бани не выше 50°, остаточное давление 70 - 100 мм рт. ст.) до объема 0,5 - 1 мл, затем в токе воздуха - досуха. Остаток растворяют в 1 - 10 мл гексана и 2 мкл раствора хроматографируют.

Почва. Навеску почвы (10 - 50 г) помещают в круглодонную отгонную колбу, снабженную насадкой, добавляют 100 мл дистиллированной воды. Колбу устанавливают на нагревательный прибор и соединяют один отвод насадки с холодильником и далее с приемной колбой. Предварительно нагревают воду в парообразователе до кипения, затем соединяют парообразователь через водоотделитель с колбой для отгонки. Пар из парообразователя барботируют через суспендированную в воде почву. Триаллат извлекается водяными парами, которые конденсируются в холодильнике и поступают в приемник. Отгонку с паром прекращают, когда объем дистиллята достигнет 100 мл. Дистиллят из приемника переливают в делительную воронку и дальнейшую его обработку проводят так, как это описано выше для воды. Сконцентрированный досуха гексановый экстракт растворяют в 5 - 10 мл гексана и 2 мкл раствора хроматографируют.

Зерно пшеницы. Навеску зерна (10 - 20 г) измельчают, муку помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 20 мл ацетонитрила, встряхивают в течение 0,5 часа и отфильтровывают под вакуумом. Экстракцию повторяют свежей порцией ацетонитрила (20 мл). Экстракты после фильтрации пропускают через бумажный фильтр и концентрируют до 0,5 - 1 мл на ротационном испарителе при температуре бани не выше 50 °С, остаточном давлении 70 - 100 мм рт. ст., затем до отсутствия ацетонитрила - в токе воздуха. Маслянистый остаток очищают в стеклянной колонке диаметром 0,8 см, длиной 30 см, заполненной щелочным оксидом алюминия (высота слоя 10 см). До внесения экстракта колонку с оксидом алюминия промывают гексаном (10 мл). Остаток после концентрирования экстракта растворяют в 1 мл гексана и переносят в колонку. Колбу обмывают 3 раза 1 мл гексана и смыв также переносят в колонку. Растворитель отсасывают под вакуумом и пропускают 2 порции гексана со скоростью 100 - 120 кап./мин.: 80 мл отбрасывают, последующие 70 мл гексана собирают в отгонную колбу, элюат концентрируют до 0,5 - 10 мл и 2 - 5 мкл раствора хроматографируют.

Аликвоту полученных гексановых экстрактов хроматографируют на приборе с детектором по захвату электронов при следующих условиях:

                                       -11

    рабочая шкала электрометра - 9 х 10    А;

    скорость протяжки картограммы - 200 мм/ч;

    колонка   стеклянная   длиной  150  см,  диаметром  3  мм,  заполненная

хроматоном N-AW-DMCS (фр. 0,20 - 0,25 мм) с 5% SЕ-30;

    температура термостата колонок - 170 °С, испарителя - 225 °С, детектора

- 220 °С;

    расход  газа-носителя  через  колонку  -  40 мл/мин., через продувочную

камеру детектора - 60 мл/мин.;

    объем, вводимый  в  испаритель, - 2 мкл для почвы и воды, 2 - 5 мкл для

зерна;

    линейность детектирования - 0,0001 - 0,004 мкг;

    абсолютное время удерживания триаллата - 3,9 мин.

Хроматографирование каждого экстракта проводят трижды, измеряют высоты пиков, вычисляют среднее значение высоты (рис. 2).

В этих же условиях хроматографируют 2 - 5 мкл (в зависимости от величины пика пробы) стандартного раствора триаллата N 3. Хроматографирование проводят трижды, вычисляют среднее значение высоты пика.

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание триаллата в пробе (Х) в мг/кг (или мг/л) вычисляют по формуле:

                             А х Н   х V  х 100

                                  пр    2

                         Х = ------------------,

                              Н   х V  х Р х R

                               ст    1

    где:

    А  -  количество  триаллата  в  хроматографируемом  объеме стандартного

раствора, нг;

    Н  ,  Н    -  средняя  высота  пика на хроматограммах растворов пробы и

     пр    ст

стандартного соответственно, мм;

    V  - объем аликвоты раствора пробы, вводимой в прибор, мкл;

     1

    V  - общий объем раствора пробы, мл;

     2

    Р - навеска пробы, г, или объем (для воды), мл;

    R  -  среднее  значение  определения  стандартных  количеств триаллата,

найденное предварительно, %.

3. Требование безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР N 2455-81 от 20.10.81.

4. Разработчики

Пиленкова Инна Иосифовна

Юркова Римма Григорьевна

Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г. Уфа.

5. Методические указания апробированы в институте ВНИИГИНТОКС, г. Киев (Киселева Н.И.).