Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

21 ноября 1985 г. N 4019-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ

ФОЗАЛОНА И ПОЛУПРОДУКТОВ ЕГО ПРОИЗВОДСТВА БЕНЗОКСАЗОЛОНА

И 3-ОКСИМЕТИЛ-6-ХЛОРБЕНЗОКСАЗОЛОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Таблица 1

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВЕЩЕСТВ

┌─────────────────┬─────────────────────────┬──────────┬───────────┬───────────┐

│     Вещество    │   Структурная формула   │Молекуляр-│Раствори-  │Температура│

│    химическое   │                         │ная масса │мость      │ плавления,│

│     название    │                         │          │           │    °С     │

├─────────────────┼─────────────────────────┼──────────┼───────────┼───────────┤

│                 │                S        │          │           │           │

│Фозалон          │   //\          ││       │367,8     │В воде -   │48         │

│S-(6-хлорбензок- │  //  \ --N-CH SP(OC H ) │          │10 мг/л.   │           │

│сазолинон-2-ил)- │  │   ││  │   2     2 5 2│          │Хорошо -   │           │

│3-метил-0,0-ди-  │  │   ││  │              │          │в ацетоне, │           │

│этилдитиофосфат  │ /\\  /\ /\\             │          │спиртах,   │           │

│                 │Cl \\/  O  O             │          │гексане,   │           │

│                 │                         │          │хлороформе,│           │

│                 │                         │          │бензоле и  │           │

│                 │                         │          │др.        │           │

│                 │                         │          │           │           │

│Бензоксазолон    │ //\                     │135,0     │-"-        │138 - 140  │

│                 │//  \ --NH               │          │           │           │

│                 ││   ││  │                │          │           │           │

│                 ││   ││  │                │          │           │           │

│                 │\\  /\ /\\               │          │           │           │

│                 │ \\/  O  O               │          │           │           │

│                 │                         │          │           │           │

│3-Оксиметил-6-   │   //\                   │165,0     │-"-        │128 - 137  │

│хлорбензоксазолон│  //  \ --N-CH OH        │          │           │с разложе- │

│                 │  │   ││  │   2          │          │           │нием       │

│                 │  │   ││  │              │          │           │           │

│                 │ /\\  /\  /              │          │           │           │

│                 │Cl \\/  O                │          │           │           │

└─────────────────┴─────────────────────────┴──────────┴───────────┴───────────┘

Вещества не летучи, в воздухе могут находиться в виде аэрозоля.

I. Характеристика метода

1. Определение основано на хроматографировании фозалона, бензоксазолона и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона в тонком слое силикагеля (пластинки "Силуфол") с последующим обнаружением зон локализации фозалона бромфеноловым реагентом, бензоксазолона и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона орто-толидиновым реагентом после хлорирования веществ на пластинке.

2. Отбор проб проводится с концентрированием на пористом фильтре.

3. Предел измерения в анализируемом объеме:

фозалона 0,4 мкг;

бензоксазолона 0,4 мкг;

3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 4 мкг.

4. Предел измерения в воздухе:

фозалона 0,25 мг/куб. м (при отборе 160 л воздуха);

бензоксазолона и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 0,5 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).

5. Диапазон измеряемых концентраций <*>:

фозалона 0,25 - 3,13 мг/куб. м;

бензоксазолона 0,5 - 4,0 мг/куб. м;

3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 0,5 - 6,25 мг/куб. м.

6. Определению не мешают полупродукты и растворители производства фозалона, в том числе: 0,0-диэтиловый эфир дитиофосфорной кислоты, хлорбензол, хлористый метилен, о-нитробензол, о-нитрофенол и др.

7. Границы суммарной погрешности для каждого компонента +/- 15%.

8. Предельно допустимая концентрация фозалона 0,5 мг/куб. м, бензоксазолона - 1 мг/куб. м, 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона не установлена.

II. Реактивы, растворы, материалы

Ацетон, осч, ГОСТ 2603-79.

Хлороформ, чда, ГОСТ 20015-74.

Уксусная кислота, чда, ГОСТ 18270-72, конц. и 5-процентный раствор.

Бромфеноловый синий, чда, ТУ 6-09-1058-76.

    AgNO , чда, ГОСТ 1277-75.

        3

    Проявляющий реагент 1. В 10 мл ацетона растворяют 0,05 г бромфенолового

синего и доводят до 100 мл 1-процентным раствором AgNO  в смеси ацетон:вода

                                                      3

(3:1). Проявитель хранят в темноте.

    Соляная кислота, ч, ГОСТ 3118-77.

    KMnO , чда, ГОСТ 20490-75.

        4

о-Толидин, ч.

KJ, чда, ГОСТ 4232-74.

Проявляющий реагент 2. Растворяют в 30 мл уксусной кислоты 0,16 г о-толидина, доводят до 500 мл дистиллированной водой и добавляют 1 г KJ. Проявитель хранят в темноте.

Стандартные растворы фозалона и бензоксазолона с содержанием 100 мкг/мл и 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона с содержанием 1000 мкг/мл в ацетоне. Стандартные растворы фозалона и бензоксазолона готовят растворением 10 мг вещества в мерных колбах на 100 мл в ацетоне, а 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона 0,1 г - в тех же условиях. Стандартные растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.

III. Приборы и посуда

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Стеклянные пористые фильтры, ЛХУ-1, пор 160, диаметром 5 см.

Камера хроматографическая с притертой крышкой, ГОСТ 10565-75.

Камера для хлорирования с притертой крышкой.

Источник УФ-света широкого диапазона волн.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

Пробирки градуированные, ГОСТ 1770-74, с пробками на шлифах, на 10 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 1 и 10 мл.

Микрошприц на 0,1 мл или микропипетка на 0,1 мл.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.

Мерные цилиндры, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

IV. Условия отбора проб воздуха

Воздух со скоростью 10 л/мин. аспирируют через стеклянный пористый фильтр. Для определения 1/2 ПДК фозалона достаточно отобрать 160 л, а 1/2 ПДК бензоксазолона - 80 л воздуха. Пробы, отобранные на фильтр, длительному хранению не подлежат и должны быть проанализированы в течение трех суток.

V. Условия анализа

С пористого фильтра вещества смывают 10 мл ацетона в пробирку емкостью 10 мл. Доводят содержимое пробирки до метки (10 мл) ацетоном. Пробирку закрывают пробкой на шлифе и ее содержимое перемешивают. Аликвотную часть раствора 0,1 мл для фозалона и бензоксазолона и 1 мл для 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона при помощи микрошприца или микропипетки наносят на хроматографическую пластинку силуфол. Параллельно на пластинку наносят с помощью микрошприца или микропипетки серию стандартов с содержанием 0,4; 0,6; 0,8; 1; 2...5 мкг при определении фозалона или бензоксазолона и 4, 6, 8, 10, 20...50 мкг - при определении 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона. Серии стандартов готовят согласно таблице 2 и таблице 3.

Таблица 2

ШКАЛА СТАНДАРТОВ ФОЗАЛОНА И БЕНЗОКСАЗОЛОНА

┌──────────────────────────────────────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┬────┐

│              N стандарта             │ 1  │ 2  │ 3  │ 4  │ 5  │... │ 6  │

├──────────────────────────────────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┤

│Стандартный раствор фозалона или      │0,4 │0,6 │0,8 │1,0 │2,0 │... │5,0 │

│бензоксазолона, содержащий 100 мкг/мл │    │    │    │    │    │    │    │

│Ацетон, мл                            │9,6 │9,4 │9,2 │9   │8   │... │5   │

│Содержание фозалона или бензоксазолона│0,4 │0,6 │0,8 │1   │2   │... │5   │

│в 0,1 мл, мкг                         │    │    │    │    │    │    │    │

└──────────────────────────────────────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┘

Таблица 3

ШКАЛА СТАНДАРТОВ 3-ОКСИМЕТИЛ-6-ХЛОРБЕНЗОКСАЗОЛОНА

┌─────────────────────────────────────────────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┐

│              N стандарта                    │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │...│ 6 │

├─────────────────────────────────────────────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┤

│Стандартный раствор 3-оксиметил-6-           │0,4│0,6│0,8│1  │2  │...│5  │

│хлорбензоксазолона, содержащий 1000 мкг/мл   │   │   │   │   │   │   │   │

│Ацетон                                       │9,6│9,4│9,2│9  │8  │...│5  │

│Содержание 3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона в│4  │6  │8  │10 │20 │...│50 │

│0,1 мл, мкг                                  │   │   │   │   │   │   │   │

└─────────────────────────────────────────────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴───┘

    При   определении  фозалона  пластинку  помещают  в  хроматографическую

камеру,  в  которую  за  30  мин.  до  начала хроматографирования был налит

подвижный  растворитель  бензол.  После  высушивания  хроматограмму сначала

обрабатывают  из  пульверизатора  бромфеноловым  проявляющим реагентом 1, а

затем, для снятия фона,  - 5-процентным раствором уксусной кислоты. Фозалон

на хроматограммах проявляется в виде голубых пятен на лимонно-желтом фоне с

R  0,5 +/-  0,05.  Пятна  стабильны  в  течение  8  -  10  мин.  Линейность

 f

детектирования - 0,4 - 5 мкг.

    При   определении   бензоксазолона  и  3-оксиметил-6-хлорбензоксазолона

пластинку   помещают   в   камеру,   в   которую   за  30  мин.  до  начала

хроматографирования налит подвижный растворитель хлороформ:уксусная кислота

(20:1).   После   развития   пластинку  сразу  же  помещают  в  камеру  для

хлорирования  и  выдерживают  там  пластинку 5 - 10 мин. Хлорирующую камеру

готовят  ежедневно,  для  чего  в  камеру  помещают  чашку  Петри  с  10  г

марганцовокислого  калия и осторожно приливают 10 мл конц. соляной кислоты.

После  хлорирования  пластинку извлекают из камеры и выдерживают на воздухе

до  полного  улетучивания следов хлора (примерно 20 - 30 мин.). Опрыскивают

из  пульверизатора  орто-толидиновым проявляющим реагентом (N 2) и сразу же

влажную   помещают   под   УФ-свет   на   10   -   20  с.  Бензоксазолон  и

3-оксиметил-6-хлорбензоксазолон  проявляются  в  виде  темно-серых пятен на

белом  фоне  с  R   =  0,50  +/-  0,05  и  0,40  +/-  0,02  соответственно.

                 f

Хроматограммы  стабильны в течение 10 мин., а затем фон темнеет. Линейность

детектирования    бензоксазолона    -   0,4   -   4    мкг,    3-оксиметил-

6-хлорбензоксазолона - 4 - 50 мкг.

    Количественное   определение   проводят   путем   сравнения  площади  и

интенсивности окраски пятен пробы и стандартных растворов.

    Концентрацию вещества (Х) в воздухе в мг/куб. м вычисляют по формуле:

                                   G х V

                                        1

                               Х = -------,

                                   V х V

                                        20

    где:

    G - количество вещества, найденное в анализируемой пробе, мкг;

    V  - общий объем пробы, мл;

     1

    V - хроматографируемый объем пробы, мл;

    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

     20

условиям, л.

VI. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.81).

VII. Разработчики

Мельцер Ф.Р., Новикова К.Ф. (ВНИИ химических средств защиты растений с опытным заводом, г. Москва).