"Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина, 3-хлор-4-метоксинитробензола в воздухе рабочей зоны" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

21 ноября 1985 г. N 4017-85

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДОЗАНЕКСА,

3-ХЛОР-4-МЕТОКСИАНИЛИНА, 3-ХЛОР-4-МЕТОКСИНИТРОБЕНЗОЛА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

\ ---

CH O-// \\-HCON(CH ) М.м. 228,68.

3 \ ___ / 3 2

---

Дозанекс, синоним: метоксурон (действующее начало N'-(3-хлор-4-метоксифенил)-N,N-диметилмочевина) - белое кристаллическое вещество, температура плавления - 126 - 127 °С. Растворим в органических растворителях. Растворимость в воде - 678 мг/л.

Применяется в качестве гербицида на овощных и зерновых культурах.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль, пары.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1 мг/куб. м.

\ ---

CH O-// \\-NH М.м. 157,6.

3 \ ___ / 2

---

3-хлор-4-метоксианилин - кристаллическое вещество светло-коричневого

цвета, температура плавления - 62 °С. Хорошо растворим в органических

растворителях. Практически не растворим в воде. На воздухе быстро

-3

окисляется. Давление пара - 3,38 х 10 мм рт. ст. при 20 °С. Летучесть -

29,9 мг/куб. м.

Применяется при производстве дозанекса, а также является его возможным продуктом разрушения.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль, пары.

Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны не установлена.

\ ---

CH O-// \\-NO М.м. 187,6.

3 \ ___ / 2

---

3-хлор-4-метоксинитробензол - кристаллическое вещество светлого цвета, температура плавления - 97 - 98 °С. Растворим в органических растворителях, практически не растворим в воде.

Применяется при производстве дозанекса.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль, пары.

Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны не установлена.

I. Характеристика метода

1. Определение основано на хроматографировании веществ в тонком слое силикагеля (пластинки "Силуфол") в подвижной фазе на основе ацетона с последующим обнаружением зон локализации по реакции азосочетания либо с помощью нингидринового реагента.

2. Отбор проб с концентрированием (фильтры АФА-ХП, АФА-ХА, этанол).

3. Метрологическая характеристика метода дана в таблице.

Таблица

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

┌───┬──────────────────────────────┬──────────────────────────────────────┐

│ N │ Наименование характеристик │ Вещества │

│п/п│ ├────────────┬────────────┬────────────┤

│ │ │ дозанекс │3-хлор-4-ме-│3-хлор-4-ме-│

│ │ │ │токсианилин │токсинитро- │

│ │ │ │ │бензол │

├───┼──────────────────────────────┼────────────┼────────────┼────────────┤

│ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │

│1. │Диапазон определяемых │0,5 - 10,0 │0,5 - 10,0 │0,5 - 10,0 │

│ │концентраций, мг/куб. м (пары,│ │ │ │

│ │аэрозоль) │ │ │ │

│2. │Предел обнаружения в воздухе │0,5 │0,5 │0,5 │

│ │(при отборе 60 л воздуха), │ │ │ │

│ │мг/куб. м │ │ │ │

│3. │Предел обнаружения в │2 │2 │2 │

│ │анализируемом объеме, мкг │ │ │ │

│4. │Среднее значение определения │81,0 │83,1 │80,2 │

│ │стандартных количеств, % │ │ │ │

│5. │Число параллельных определений│9 │9 │9 │

│6. │Стандартное отклонение, S, % │5,9 │5,5 │5,8 │

│7. │Относительное стандартное │0,07 │0,07 │0,07 │

│ │отклонение │ │ │ │

│8. │Доверительный интервал средне-│81,0 +/- 4,5│83,1 +/- 4,0│80,2 +/- 4,5│

│ │го при Р = 0,95 и n = 1, % │ │ │ │

└───┴──────────────────────────────┴────────────┴────────────┴────────────┘

4. Определению не мешают вещества, используемые в синтезе дозанекса, другие замещенные анилина и нитробензола, а также гербициды, относящиеся к производным фенилмочевин. Анализируемые вещества (дозанекс, 3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол) определению друг друга не мешают.

II. Реактивы, растворы, материалы

Дозанекс 98-процентный.

3-Хлор-4-метоксианилин 98-процентный.

3-Хлор-4-метоксинитробензол 98-процентный.

Спирт этиловый технический, ГОСТ 18300-72.

Гексан, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон, ГОСТ 2603-79.

Хлороформ, ГОСТ 215-74.

Кислота соляная, ч, ГОСТ 3118-77.

Олово двухлористое, ч, ГОСТ 36-78.

Натрий азотистокислый, хч, ГОСТ 4197-74.

Калий гидроксид, ГОСТ 6-01-301-74.

1-Нафтол, чда, ГОСТ 5838-79.

Нингидрин, чда, ТУ 6-09-2737-73.

Бутанол, ТУ 6006-78.

Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 18290-72.

Фильтры аэрозольные АФА-ХП-20 или АФА-ХА-20.

Пластинки для хроматографии "Силуфол", размер 150 х 150 мм.

Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор дозанекса с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески 0,051021 г в 50 мл этилового спирта. Раствор устойчив в течение недели.

Стандартный раствор смеси 3-хлор-4-метиланилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески каждого компонента 0,051021 г в колбе и 50 мл этилового спирта.

Рабочие стандартные растворы с содержанием дозанекса 10 - 120 мкг/мл и смеси 3-хлор-4-метиланилина с 3-хлор-4-метоксинитробензолом до 10 - 120 мкг/мл каждого компонента готовят для построения градуировочной шкалы на пластинках "Силуфол".

III. Приборы и посуда

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Поглотительные приборы Рыхтера (средняя модель), ТУ 25-11-1081-75.

Фильтродержатели.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Камеры хроматографические стеклянные, ГОСТ 10565-75.

Камеры для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.

Микрошприцы МШ-10, ТУ 2-833-106.

Микропипетки емкостью 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.

Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74.

Цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.

Пробирки градуированные с притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.

Химические стаканы емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Баня со льдом (для отбора проб воздуха).

Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.

Приготовление подвижных фаз

Подвижная фаза N 1 (для хроматографирования дозанекса): смешивают хлороформ и ацетон в соотношении 18:3.

Подвижная фаза N 2 (для хроматографирования 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола): смешивают гексан и ацетон в соотношении 20:6.

Подвижные фазы готовят непосредственно в хроматографических камерах за 30 мин. до хроматографирования. Высота слоя растворителя не должна превышать 0,5 см.

Приготовление проявляющих реагентов

Проявляющий реагент N 1: к смеси 46 мл воды и 4 мл концентрированной хлористоводородной кислоты добавляют 1 г азотистокислого натрия. Раствор готовят перед употреблением.

Проявляющий реагент N 2: к раствору 2,8 г гидроксида калия в 50 мл воды добавляют 0,1 г 1-нафтола. Реактив готовят перед употреблением.

Проявляющий реагент N 3 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина растворяют в 100 мл н-бутанола и прибавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты. Реактив устойчив в течение двух недель.

Проявляющий реагент N 4 (восстанавливающий): 10-процентный раствор двухлористого олова в концентрированной хлористоводородной кислоте. Раствор устойчив в течение месяца.

Подготовка шкалы стандартных пятен

Растворы для стандартных пятен дозанекса: в шесть градуированных пробирок с помощью микрошприца или микропипетки вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12; 0,24; 0,36 мл стандартного раствора дозанекса и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.

Растворы для стандартных пятен 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола: в шесть градуированных пробирок вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12; 0,24; 0,36 мл стандартного раствора смеси этих веществ и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.

На двух пластинках "Силуфол" на расстоянии 15 мм от края намечают на линию старта.

На линию старта пластинки N 1 справа и слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мл раствора из пробирок с растворами для стандартных пятен дозанекса в виде отдельных пятен диаметром не более 10 - 12 мл. Эти пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг дозанекса.

На линию старта пластинки N 2 справа и слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мм раствора из пробирок с растворами для стандартных пятен смеси 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола в виде пятен диаметром не более 10 - 12 мм. Эти пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг каждого из компонентов смеси.

IV. Условия отбора проб воздуха

Воздух со скоростью 1 - 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные аэрозольный фильтр, укрепленный в фильтродержателе, и поглотительный прибор Рыхтера, установленный в ледяную баню и заполненный 10 мл этилового спирта в качестве поглотительного раствора. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 60 л воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.

V. Условия анализа

Аэрозольный фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в химический стакан и экстрагируют этиловым спиртом четырьмя порциями по 10 мл, выдерживая каждый раз по 3 - 4 мин. Экстракты сливают в грушевидную колбу. В эту же колбу сливают этиловый спирт из поглотительного прибора. Прибор обмывают дважды этиловым спиртом порциями по 3 - 5 мл, смывы также сливают в грушевидную колбу. Отгоняют растворитель на ротационном испарителе до объема 2,5 мл. Этот раствор переносят в градуированную пробирку и доводят объем этиловым спиртом точно до 3 мл.

По 0,2 мл полученного раствора наносят на середину линий старта пластинок N 1 и N 2, на которые предварительно были нанесены соответствующие стандартные пятна (см. раздел III). Диаметр пятен не более 10 - 12 мм.

Пластину N 1 помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой N 1; пластину N 2 - в камеру с подвижной фазой N 2.

Хроматограммы развивают на высоту 10 см, вынимают из камер, подсушивают на воздухе в вытяжном шкафу.

Зоны локализации дозанекса на пластинке N 1 обнаруживают одним из двух способов:

а) нагревают пластину в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 3 - 5 мин., охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают из пульверизатора сначала проявляющим реагентом N 1, а затем проявляющим реагентом N 2. Дозанекс обнаруживают в виде светло-коричневого пятна на сером фоне;

б) обрабатывают пластинку проявляющим реагентом 3, а затем нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 5 - 10 мин. Дозанекс обнаруживают в виде сиреневого пятна на светлом фоне.

Значение R дозанекса - 0,40. Окраска пятен устойчива.

Зоны локализации 3-хлор-4-метоксинитробензола и

3-хлор-4-метоксианилина на пластинке N 2 обнаруживают следующим образом:

пластинку с помощью пульверизатора орошают проявляющим реагентом N 4, затем

нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 20 мин.,

охлаждают до комнатной температуры и орошают последовательно проявляющими

реагентами N 1 и N 2. 3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол

(восстановленный до соответствующего амина) обнаруживают в виде

красновато-коричневых пятен с R = 0,20 и 0,40 соответственно. Окраска

пятен устойчива.

Для количественных расчетов из стандартных пятен на пластинах N 1 и N 2 выбирают пятна, близкие пятнам соответственно дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина, 3-хлор-4-метоксинитробензола по интенсивности окраски и размерам. Измеряют с помощью прозрачной миллиметровой бумаги или другим способом площади этих пятен и пятен пробы.

Концентрацию дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:

G х S х V

пр 1

Х = -------------,

S х V х V

ст 20

где:

G - количество вещества в стандартном растворе, мкг;

S - площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм;

пр

S - площадь пятна на хроматограмме стандарта, кв. мм;

ст

V - общий объем пробы, мл;

V - объем хроматографируемой пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

условиям.

VI. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.81).

VII. Разработчики

Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., Фатьянова А.Д. (Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений - ВНИТИГ, г. Уфа).