"Временные методические указания по хроматографическому и газохроматографическому измерению концентрации лонтрела в воздухе рабочей зоны" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

21 ноября 1985 г. N 4016-85

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ И ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ

КОНЦЕНТРАЦИИ ЛОНТРЕЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

// \ Cl

// \/

│ ││

│ ││ М.м. 192,1.

/\\ /\

Cl \\ / C-OH

N ││

Лонтрел, 3,6-дихлорпиколиновая кислота (синонимы - ДХПК, Дауков 290).

Белое кристаллическое вещество без запаха. Растворимость в г/кг: в воде -

1, ацетоне - 250, ксилоле - 250, метаноле - 250 при 20 °С. Температура

-5

плавления 151 - 152 °С, давление пара 1,2 х 10 мм рт. ст. при 25 °С.

В обычных условиях устойчиво, с органическими и неорганическими основаниями

образует хорошо растворимые в воде соли.

Выпускается в виде водного раствора соли с этиламином с содержанием кислоты 100 и 300 г/л, а также в виде смесей с некоторыми пестицидами. Применяется в качестве послевсходового гербицида в посевах зерновых злаков, сахарной свеклы и др.

Расчетная предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны - 12 мг/куб. м (для 34% техн. р-ра) или 3,5 мг/куб. м по д.в. По экспериментальным данным предлагается - 2 мг/куб. м (по действ. вещ.). Агрегатное состояние технического препарата в воздухе - пары и аэрозоль.

I. Характеристика метода

1. Определение основано на: 1) газохроматографическом определении метилового эфира 3,6-ДХПК с детектором постоянной скорости рекомбинации на неподвижной фазе SE-30 (5/%) после аспирационного отбора пробы воздуха и переведении сухого остатка 3,6-ДХПК в ее метиловый эфир; 2) хроматографировании в тонком слое силикагеля с помощью подвижной фазы: гексан - бензол - уксусная кислота (10:2:3) с последующим обнаружением зоны локализации смесью растворов бромфенолового синего и азотнокислого серебра.

2. Отбор проб проводится с концентрированием (фильтр "синяя лента", ацетон).

3. Предел обнаружения:

ГЖХ - 1 нг при метилировании диметилсульфатом;

0,03 нг при метилировании диазометаном в 3 мкл;

ТСХ - 2 мкг.

4. Предел измерения в воздухе:

ГЖХ - 0,0006 мг/куб. м (проба воздуха 3 л);

ТСХ - 0,07 мг/куб. м (проба воздуха 30 л).

5. Диапазон измеряемых концентраций:

ГЖХ - 0,0006 - 1,0 мг/куб. м;

ТСХ - 0,14 - 1,4 мг/куб. м.

6. Определению не мешает наполнитель технического препарата. Методы избирательны в присутствии пиклорама, ХОП (гамма-ГХЦГ), 2,4-Д; 2М-4Х и других гербицидов класса феноксиалканкарбоновых кислот.

7. Граница суммарной погрешности измерения: ГЖХ - +/- 18,7%;

ТСХ - +/- 20%.

II. Реактивы, растворы, материалы

3,6-Дихлорпиколиновая кислота, х.ч.

Бумажный беззольный фильтр "синяя лента", ТУ-6-09-1678-77.

К методу ГЖХ:

Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.

Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6262-79.

Метанол, х.ч., ГОСТ 6995-77.

Метиламин хлоргидрата, ТУ 6-09-3755-74.

Мочевина, ч.д.а., ГОСТ 6691-77.

Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.

Гидроокись калия (таблетированная).

Серная кислота, х.ч., ГОСТ 4204-77.

Натрий азотистокислый, ч.д.а., ГОСТ 4197-74-75.

Натрий углекислый, х.ч., ГОСТ 83-79.

Натрий сернокислый безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

Диметилсульфат, ч.

Метиловый эфир 3,6-ДХПК.

Нитрозометилмочевина, готовится по прописи, изложенной далее.

Носитель-хроматон N-АW-НМД, 0,200 - 0,250 мм, с 5% SE-30.

К методу ТСХ:

Бензол, ГОСТ 5955-75.

Спирт этиловый 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.

Гексан, ТУ 6-09-3375-78.

Уксусная к-та ледяная, ГОСТ 18290-72.

Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-76.

Азотнокислое серебро, ГОСТ 1277-75.

Аскорбиновая кислота, ГОСТ 4815-76.

Подвижная фаза: гексан - бензол - уксусная к-та (10:2:3).

Стандартный р-р 3,6-дихлорпиколиновой кислоты: 1, 10, 100 и 1000 мкг/мл. Срок хранения растворов - 10 суток (+4 °С).

К методу ГЖХ:

Стандартный раствор метилового эфира: 3,6-дихлорпиколиновой к-ты, содержащий 1, 10 мкг/мл.

Диазометан газообразный или диметилсульфат, 5-процентный р-р в абсолютном метиловом спирте.

Азот газообразный особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

К методу ТСХ:

Проявляющий реагент N 1: смесь 0,4% спиртного раствора бромфенолового синего и 2% водного р-ра азотнокислого серебра (1:1). Реактив должен быть свежеприготовленным.

Проявляющий реагент N 2: 2-процентный водный раствор аскорбиновой кислоты.

Реактив устойчив 3-е суток.

III. Приборы и посуда

Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77, модель 882.

Фильтродержатели.

Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1 или прибор Рыхтера, ТУ 25-11-1081-75.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Колбы мерные, цилиндры, ГОСТ 1770-74.

Колбы грушевидные на 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Пипетки на 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприцы на 10 мкл МШ-10, ТУ 5Е-2.883.0.24.

К методу ГЖХ:

Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) марки "Цвет", "Газохром" и др.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Колба Бунзена, ГОСТ 6514-75.

Нагреватель - электрическая плитка, ГОСТ 306-76.

Глицериновая баня.

Водоструйный насос стеклянный, ГОСТ 10696-75.

Холодильник шариковый, длина 300 мм.

Воронка Бюхнера РФ 3 120 мл, ГОСТ 9147-73.

Баллоны газовые.

Редуктор, ГОСТ 2405-72.

Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренний диаметр 3 мм.

К методу ТСХ:

Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР), 150 x 150 мм.

IV. Условия отбора проб воздуха

Отбор проб препарата в капельно-жидком состоянии производится на фильтры "синяя лента" со скоростью протягивания воздуха 5 - 10 л/мин. Отобрать 30 - 50 л воздуха.

В парообразном состоянии воздух протягивается через 3 последовательно соединенных поглотителя, наполненных 10 - 15 мл свежеперегнанного ацетона, со скоростью 0,2 л/мин.

Для определения 1/2 ПДК 3,6-ДХПК методом ГЖХ достаточно отобрать 0,2 л воздуха, а при анализе методом ТСХ объем пробы воздуха - 30 л.

Длительность хранения сухого остатка проб воздуха - 5 - 7 суток. Хранить в холодильнике при +4 °С.

V. Условия анализа

Из фильтра "синяя лента" 3,6-дихлорпиколиновую к-ту извлекают ацетоном

2 раза по 20 мл при периодическом встряхивании в течение 10 мин., экстракт

ацетона объединяют (N 1). Объединяют также экстракт и из поглотительных

приборов (N 2). Экстракты сушат над б/в Na SO и упаривают досуха.

2 4

При определении 3,6-ДХПК методом ГЖХ сухой остаток метилируется диазометаном или диметилсульфатом, при методе определения ТСХ - сухие остатки растворяются в 0,1 мл этилового спирта.

1. Условия анализа методом ГЖХ

Подготовка к метилированию

Нитрозометилмочевину получают следующим способом: в круглодонную стеклянную колбу помещают 1,5 моля хлоргидрата метиламина, 5 молей мочевины и 400 мл дистиллированной воды. Соединяют колбу с обратным холодильником и нагревают на глицериновой бане при температуре 120 °С в течение 3 часов. Колбу отсоединяют и переносят содержимое в химический стакан емкостью 2000 мл. Добавляют 1,6 моля азотистокислого натрия. Смесь охлаждают в емкости со льдом и поваренной солью до -10 °С. Медленно при постоянном перемешивании приливают 100 г конц. серной к-ты. Выпавшие в виде сметанообразной массы нитросоединения помещают на бумажный фильтр воронки Бюхнера, фильтруют с водоструйным насосом и промывают дистиллированной ледяной водой. Полученная нитрозометилмочевина хорошо высушивается в эксикаторе над таблетированным KOH до постоянного веса и используется для получения диазометана. Вещество хранить в банке из темного стекла с притертым шлифом в холодильнике (+4 °С).

Метилирование

Метилирование сухого остатка 3,6-ДХПК можно проводить диазометаном и диметилсульфатом.

Методика метилирования диметилсульфатом утверждена заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N 1541-76 от 20.12.1976, и опубликована в сборнике "Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде", часть VIII, М., 1977 г., с. 124.

Метилирование диазометаном: при реакции нитрозометилмочевины с гидроокисью калия полученный диазометан сразу же участвует в процессе метилирования. Для этого в реакционную емкость прибора помещают 0,5 г нитрозометилмочевины, 5 мл диэтилового эфира и 5 мл метанола. Выходную трубку реакционного прибора погружают в приемник-концентратор, где сухой остаток 3,6-ДХПК растворен в 0,5 мл метанола и 4 мл диэтилового эфира. Растворители свежеперегнанные. В реакционную емкость по каплям приливается 10 - 15 мл 40% гидроокиси калия. При реакции образующийся диазометан пропускается через раствор в приемник за 15 мин. Раствор, насыщенный диазометаном, приобретает желтый цвет. Концентратор закрывается стеклянной пробкой со шлифом и выдерживается не менее 30 мин.

Метилированную пробу испаряют досуха, растворяют сухой остаток в 1 мл ацетона или этилового спирта (в зависимости от растворителя стандартов) и хроматографируют.

Условия хроматографирования

Ввод пробы в хроматограф - через самоуплотняющуюся мембрану.

Объем вводимой пробы - 3 мкл.

-12

Шкала электрометра - 50 - 10 А.

Хроматографические параметры на неподвижной фазе SE-30:

кол-во жидкой фазы - 5%;

Т колонки - 180 °С;

Т испарения - 250 °С;

Т детектора - 260 °С;

скорость газа-носителя - 30 мл/мин.;

скорость диаграммной ленты - 200 мм/час;

время удерживания 3,6-ДХПК - 1,1 мин.

Количественное определение проводят методом расчета по соотношению "площадь пика - концентрация" при вводе до и после анализа проб стандартного раствора.

2. Условия анализа методом ТСХ

Раствор пробы (0,1 мл) с помощью микропипетки или микрошприца наносят

на пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносятся стандартные растворы.

Стенки колбы смывают несколькими каплями растворителя, который наносят в

центр пятна. Пластинку помещают в хроматографическую камеру, предварительно

заполненную подвижной фазой. После подъема фронта на 10 см пластинку

вынимают из камеры, сушат на воздухе в вытяжном шкафу, опрыскивают сначала

проявляющим р-ром N 1, а затем раствором N 2. 3,6-ДХПК обнаруживается на

сером фоне в виде желтого пятна, которое постепенно становится черным.

Значение R = 0,3. Черная окраска пятен устойчива.

Количественное определение 3,6-ДХПК в анализируемой пробе проводится при сравнении площади пятен с пятнами стандарта с помощью прозрачной миллиметровой бумаги.

Линейная зависимость соблюдается в интервале от 2 до 20 мкг.

Концентрация препарата (Х) в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:

для ГЖХ:

G х S х V

пр 1

Х = -------------;

S х V х V

ст 20

для ТСХ:

Х = ---,

где:

G - количество препарата в стандартном растворе, введенном в

хроматограф, мкг;

G - количество препарата, найденное в хроматографическом объеме пробы,

мкг;

S - площадь пика на хроматограмме стандарта, кв. мм;

ст

S - площадь пика на хроматограмме пробы, кв. мм;

пр

V - общий объем пробы, мл;

V - хроматографируемый объем пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

условиям, л.

VI. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.1981).

VII. Разработчики

Баркене М.Ю., Раманаускене В.В., Вайтекунене Д.Ю. (НИИЭМГ Минздрава Литовской ССР, г. Вильнюс), Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., Фатьянова А.Д. (Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений - ВНИТИГ, г. Уфа).