Утверждены

Минздравом СССР

12 апреля 1985 г. N 3253-85

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЛЕНТАГРАНА В КУКУРУЗЕ, ПОЧВЕ И ВОДЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

    Краткая  характеристика  препарата.  Лентагран - S-октил-O-(3-

фенил-6-хлорпиридазинил-4)тиокарбонат.              Брутто-формула

C  H  ClN O S.  Молекулярная  масса 278,9. Общепринятое название -

 19 23   2 2

пиридат.  Химически  чистое  соединение  -  белое  кристаллическое

вещество  с  т.  пл.  27  °C. Растворимость в воде 90 мг/л. Хорошо

растворяется в большинстве органических растворителей. Выпускается

в  форме  смачивающихся  порошков, содержащих различные количества

действующего вещества. ДСД 0,08 <*> мг/кг; МДУ в кукурузе 0,05 <*>

мг/кг.

--------------------------------

<*> Временный норматив.

Принцип метода. Метод основан на извлечении лентаграна из растительных проб, почвы и воды органическим растворителем (ацетон, н-гексан), очистке экстрактов путем перераспределения между двумя несмешивающимися жидкостями. Количественно определяют методом ТСХ.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество 2 мкг. Нижний предел определения: вода - 0,01 мг/л; почва - 0,02 мг/кг; кукуруза - 0,05 мг/кг. Среднее значение определения, %: в растениях - 78,6; почве - 87,5; воде - 89,5. Стандартное отклонение, %: в растениях - +/- 9,0; почве - +/- 8,7; воде - +/- 7,9. Доверительный интервал среднего при p = 0,95 и n = 5%: для растений - +/- 9,0; почвы - +/- 8,7; воды - +/- 7,9.

Избирательность метода. Метод специфичен, другие соединения в данных условиях хроматографирования определению не мешают.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. Аммиак ч.д.а. Ацетонитрил ч. Нитрат висмута ч.д.а. Иодид калия х.ч. н-Гексан. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Хлорид натрия ч.д.а. Силикагель для хроматографии ЛС 5/40. Сульфат кальция ч.д.а. Серная кислота х.ч. Дистиллированная вода. Стандартный раствор лентаграна в ацетоне концентрацией 100 мкг/мл. Нитрат серебра ч. Проявляющие реагенты: N 1 - реактив Драгендорфа. Растворяют 1,5 г нитрата висмута и 7,5 г иодида калия в 100 мл 2-процентной серной кислоты; N 2 - 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 7 мл аммиака и доводят ацетоном до 100 мл.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Прибор для облучения УФ-светом с лампой ПРК-4. Пульверизатор стеклянный. Камера для опрыскивания. Камера хроматографическая. Воронки химические: делительные на 250 - 500 мл. Колбы: конические со шлифом и пробками на 250 - 500 мл; круглодонные со шлифом на 100 - 250 мл. Пипетки на 0,1 мл. Цилиндры мерные на 50, 100 мл.

Приготовление хроматографических пластинок. Стеклянные пластинки размером 9 x 12 см тщательно моют. В ступке смешивают 3,5 г силикагеля с 1,5 г сульфата кальция, добавляют 30 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и равномерно наносят на 5 пластинок. Сушат их 17 - 18 ч при комнатной температуре, затем в сушильном шкафу 20 мин. при температуре 170 - 180 °C и хранят в эксикаторе над слоем осушителя.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку и добавляют 10 - 15 г хлорида натрия. Лентагран экстрагируют тремя порциями н-гексана по 50 мл каждый раз в течение 5 мин. Объединенный экстракт фильтруют над слоем безводного сульфата натрия. Растворитель отгоняют на ротационном испарителе до 0,2 - 0,3 мл при температуре воды в бане около 50 °C. Остаток удаляют в токе воздуха.

Навеску измельченной почвы (100 г) помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 200 мл водного ацетона (1:1) или 80 мл ацетона. Экстракцию пиридата проводят путем энергичного встряхивания в течение 1 ч. Раствор фильтруют и переносят в делительную воронку, добавляют 200 мл дистиллированной воды (в случае экстракции водным ацетоном) и трижды экстрагируют гексаном порциями по 50 мл. Растворитель объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия, концентрируют по 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха. Ацетоновый экстракт отгоняют на ротационном испарителе.

Измельченную зеленую массу кукурузы (40 г) помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают до покрытия поверхности н-гексаном или этилацетатом. Экстракцию проводят путем энергичного встряхивания в течение 1 ч. Экстракт отфильтровывают через складчатый фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Растворитель отгоняют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетонитрила, добавляют 100 мл воды и отфильтровывают через складчатый фильтр. Лентагран экстрагируют 3 порциями н-гексана по 70 мл в течение 5 мин. Экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и отгоняют на ротационном испарителе до 0,3 мл.

Идентификация и количественное определение лентаграна. Пробу, концентрированную до 0,3 мл, количественно переносят на пластинку с сорбентом. Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием 3, 5, 10 мкг д.в. лентаграна. При необходимости используют двумерную хроматографию, используя в качестве первой подвижной фазы хлороформ. Затем пластинку помещают в камеру с системой подвижных растворителей н-гексан - ацетон (4:1 по объему).

    После  обработки  стеклянных  пластинок  реактивом Драгендорфа

лентагран проявляется в виде красных пятен с величиной R  0,65 +/-

                                                        f

0,05.  После  обработки  хроматограмм раствором нитрата серебра их

помещают   под   источник  УФ-света  до  четкого  появления  пятен

препарата.

    Содержание  лентаграна в исследуемой пробе (X, мг/кг или мг/л)

вычисляют по формуле:

                                  A

                              X = -,

                                  P

где:

A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

P - навеска или объем воды, г или мл.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.