Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

3 января 1985 г. N 3200-85

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СОНАЛЕНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕЛЕНОЙ

МАССЕ СОИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика препарата

1.1. Сонален.

1.1.1. 2,6-динитро-4-трифторметил-N-этил-N-(2-метил-2-пропенил)-анилин.

1.2. Структурная формула:

              CF

              │ 3

             / \

            │ O │                                        Мол. масса 333,26.

           / \ / \

        O N   │   N O

         2    │    2

    CH =C-CH -N-C H

      2 │   2    2 5

        CH

          3

1.3. Кристаллическое вещество желтого цвета. Растворимость в воде - 0,2 мг/л при 25 °С. Хорошо растворимо в жирах, органических растворителях, в том числе в ацетоне, ацетонитриле, хлороформе, метаноле, метиленхлориде, ксилоле, бензоле.

    Малотоксичен для теплокровных. ЛД   - более 2000 мг/кг.

                                     50

Применяется для борьбы с сорной растительностью на посевах сои и хлопчатника.

ДОК и ПДК не установлены.

2. Методика определения

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода.

Метод основан на извлечении соналена из воды и растительных проб гексаном, а из почвы - смесью гексан - ацетон (2:1). Экстракты обрабатывают концентрированной серной кислотой, в которую переходит сонален. При разведении кислоты водой в 30 раз и последующей переходит в дистиллят, из которого его извлекают гексаном. Количественное определение проводят с помощью газовой и/или тонкослойной хроматографии.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

Предел обнаружения: в воде - 0,001 мг/л (ГЖХ); 0,005 мг/л (ТСХ)

                    в почве - 0,002 мг/кг (ГЖХ); 0,01 мг/кг (ТСХ)

                    в зеленой массе - 0,01 мг/кг (ГЖХ); 0,05 мг/кг (ТСХ).

Р - размах варьирования, %

                             84,6 - 93,2 в воде

                             79,5 - 87,4 в почве

_                            76,7 - 82,7 в зеленой массе

с - среднее значение определения, %

                             89,0 - в воде

                             83,5 - в почве

                             79,7 - в зеленой массе

S - стандартное отклонение, %

                             4,4 - в воде

                             4,1 - в почве

                             3,0 - в зеленой массе

2.1.3. Метод специфичен в присутствии ДДТ и линдана по времени удерживания и величине.

Определению мешает наличие в пробах трефлана.

2.2. Реактивы и растворы

н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Кислота серная, х.ч., удельный вес 1,84, ГОСТ 4204-76.

Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Стандартные растворы соналена с концентрацией 0,2 - 2,0 мкг/мл.

2.3. Приборы и посуда

Газовый хроматограф серии Цвет-100, оснащенный детектором постоянной скорости рекомбинации, или аналог.

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол".

Колбы грушевидные на шлифах КШ 50 29-32 ТС, ГОСТ 10394-72.

Колбы конические на шлифах КШ 50 29-32 ТС, ГОСТ 10394-72.

Делительные воронки ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

Воронки конические, диаметр 5 см, ГОСТ 8613-81.

Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-75.

Микропипетки, ГОСТ 1770-74.

Лампа кварцевая ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.

Камеры для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.

Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.

Прибор для перегонки с водяным паром.

Микрошприцы МШ-10М, ТУ 2.833.106.

2.4. Подготовка к определению

Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия безводный прокалить при температуре 300 °С.

2.4.1. Отбор проб.

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного врача СССР, N 2051-79 от 21.08.79.

Для анализа отбирают 20 г растительной пробы, 100 г почвы и 200 мл воды.

2.5. Ход определения

2.5.1. Вода.

200 мл воды в делительной воронке экстрагируют трижды по 50 мл гексана. Собирают гексановый экстракт. Далее - по п. 2.5.4.

2.5.2. Почва.

100 г воздушно-сухой почвы растирают в ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с притертой пробкой и экстрагируют гербицид на аппарате для встряхивания в течение 3 - 5 часов 200 мл смеси ацетон - гексан (1:2). Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 10 - 15 мл гексана. К объединенному экстракту прибавляют 200 мл воды и верхний гексановый слой отделяют в делительной воронке. Далее - по п. 2.5.4.

2.5.3. Зеленая масса сои.

20 г измельченной растительной пробы экстрагируют гексаном на аппарате для встряхивания в течение 3 - 5 часов в конической колбе с притертой пробкой, используя 100 - 150 мл растворителя. Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 10 - 15 мл гексана и собирают гексановые фракции. Далее - по п. 2.5.4.

2.5.4. Перераспределение с концентрированной серной кислотой.

К объединенному гексановому экстракту добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и в течение 1 мин. встряхивают с осторожностью в делительной воронке. После этого нижнюю сернокислотную фазу переносят в дистиллированную воду, объем которой 150 - 200 мл. Полученный таким образом кислый раствор присоединяют к прибору для перегонки с водяным паром.

2.5.5. Перегонка с водяным паром.

Включают нагрев и собирают 50 - 70 мл дистиллята. Препарат экстрагируют из дистиллята трижды по 10 мл гексана. Гексановую фазу объединяют, осушают над безводным сульфатом натрия и упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 35 °С до объема 3 - 5 мл.

2.5.6. Определение методом газовой хроматографии.

    Условия хроматографического разделения:

    -  стеклянная колонка 2 м х 3 мм с 5% OV-225 на Хроматоне супер (0,16 -

0,20 мм);

    - температура: термостата колонок - 190 °С

                   термостата детекторов - 250 °С

                   испарителя - 250 °С;

    - расход газа-носителя (аргон ОСЧ или высшего сорта) - 60 мл/мин. через

колонку и 180 мл/мин. - на поддувку;

                                    -12

    - рабочая шкала ИМТ-05 - 10 х 10    А;

    - линейный динамический диапазон 0,04 - 4,0 нг;

    - время удерживания - 3 мин.

    2.5.7. Определение методом тонкослойной хроматографии.

    Очищенный экстракт, полученный по п. 2.5.5, упаривают в токе воздуха до

0,5   -   1,0   мл   и  количественно  переносят  на  пластинку  "Силуфол".

Хроматографирование  проводят  в  системе гексан - ацетон  (4:1).  Препарат

определяют визуально по желтой окраске в соответствии с R  = 0,7.

                                                         f

2.6. Обработка результатов анализа

Содержание препарата при использовании метода ГЖХ вычисляется по формуле:

                                    Н х V

                              Х = ----------,

                                  К х V  х Р

                                       a

    где:

    Х - содержание гербицида, мг/кг или мг/л;

    Н - высота пика, мм;

    К - калибровочный коэффициент, мм/нг;

    V - объем анализируемой пробы, мл;

    V  - объем вводимой в хроматограф аликвоты, мкл;

     a

    Р - навеска, г или мл.

    Содержание  препарата  при  использовании  метода  ТСХ  вычисляется  по

формуле:

                                    m х S

                                         2

                                Х = ------,

                                    Р х S

                                         1

    где:

    m - масса препарата, нанесенного на пластинку из стандартного раствора,

мкг;

    S  - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;

     2

    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;

     1

    Р - масса или объем пробы, взятой на анализ, г или мл;

    Х - содержание гербицида в анализируемой пробе, мкг/г, мг/кг или мг/л.

3. Требования безопасности

Необходимо соблюдать правила работы с токсическими соединениями II класса токсичности (гербициды), ЛВЖ (органические растворители) и с сжатыми газами (аргон под давлением).

4. Разработчики

Настоящие Методические указания подготовлены И.Ш. Кофманом и А.А. Дубровской, Институт физиологии растений АН УССР, г. Киев.

5. Методика апробирована во ВНИИГИНТОКС (Гиренко Д.Б.) и ВНИИ эфиромасличных культур (Баранов Ю.С., Хилик Л.А.).