"Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций релдана и продукта его гидролиза 3,5,5-трихлорпиридинола в воздухе рабочей зоны" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

3 января 1985 г. N 3195-85

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ РЕЛДАНА

И ПРОДУКТА ЕГО ГИДРОЛИЗА 3,5,5-ТРИХЛОРПИРИДИНОЛА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

1. Краткая характеристика препаратов

Cl Cl

\/ \\/

││ │ S

/\ //\ ││ OCH М.м. 322,6.

Cl N O--P / 3

OCH

Релдан (хлорпирифосметил, даурелдан, петрал, ДОWСО-214, ENT-27520, ОМ-1155) - O,O-диметил-O-(3,5,6-трихлорпиридил-2)тиофосфат.

Релдан - белый кристаллический порошок со слабым запахом меркаптана, температура плавления 45,5 - 46,5 °C. Растворимость в воде 4 мг/л. Хорошо растворим в ацетоне, ацетонитриле, бензоле, сероуглероде, хлороформе, метиленхлориде, диэтиловом эфире, плохо растворим в алифатических углеводородах и спиртах. В водных растворах гидролизуется с образованием 3,5,6-трихлор-2-пиридинола и O,O-диметилфосфата, Летучесть 0,014 мг/куб. м при 0 °C, 0,75 мг/куб. м при 25 °C, 3,1 мг/куб. м при 35 °C. В воздухе может находиться в виде аэрозоля и паров. ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,3 мг/куб. м.

Во влажной атмосфере под действием УФ-света релдан гидролизуется до 3,5,6-трихлор-2-пиридинола.

2. Методика определения релдана и 3,5,6-трихлорпиридинола

в воздухе рабочей зоны

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении релдана методом газожидкостной (ГЖХ) и тонкослойной (ТСХ) хроматографии.

ГЖХ-определение релдана проводят на газовом хроматографе, снабженном термоионным детектором (ТИД).

ТСХ-определение релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола основано на хроматографировании препаратов в тонком слое силикагеля и обнаружении обоих соединений по реакции с азотнокислым серебром или обнаружении только релдана по реакции с бромфеноловым реагентом.

Отбор проб с концентрированием.

2.1.2. Метрологическая характеристика

ГЖХ

Предел измерения в хроматографируемом объеме - 0,0005 мкг (0,5 нг). Предел измерения в воздухе - 0,02 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха).

Диапазон линейной зависимости величины хроматографического сигнала от величины количества введенного в хроматограф релдана: 0,5 - 10 нг.

Диапазон измеряемых концентраций: 0,02 - 0,5 мг/куб. м.

Граница суммарной погрешности при определении релдана методом ГЖХ составляет 15,8%.

ТСХ

При применении реагента на основе азотнокислого серебра нижний предел измерения релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 0,3 мкг (0,06 мг/куб. м); при применении реагента на основе бромфенолового синего нижний предел измерения релдана 0,5 мкг (0,1 мг/куб. м). Граница суммарной погрешности при определении релдана составляет 19,7%, 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 20,6%.

2.1.3. Избирательность метода

При определении релдана методом ГЖХ с ТИД на колонке с фазой 5% SE-30 определению может мешать метафос. Для идентификации релдана в присутствии метафоса используется альтернативная колонка (фаза 5% OV-1), на которой время удерживания релдана по отношению ко времени удерживания метафоса равно 0,76.

Сочетание методов ГЖХ и ТСХ также позволяет идентифицировать релдан в присутствии метафоса и других фосфорорганических и хлорорганических пестицидов.

2.2. Реактивы, растворы, материалы

н-Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Диэтиловый эфир хч, ГОСТ 6262-79.

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.

Пенополиуретан (порезанный ножницами до размера 3 - 6 мм), отмытый ацетоном в течение 12 часов в аппарате Сокслета.

Серебро азотнокислое хч, ГОСТ 1277-75.

Аммиак водный чда, ГОСТ 3780-74.

Бромфеноловый синий (индикатор) чда, ТУ 6-09-1058-76.

Уксусная кислота хч, ГОСТ 22300-76.

Лимонная кислота осч, ТУ 6-09-684-75.

Натрий сернокислый безводный чда, ГОСТ 4166-76.

Пластинки "Силуфол" (Хемапол, ЧССР).

Неподвижные фазы:

5% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20), Хемапол, ЧССР.

5% OV-1 на диатомите CZQ (80 - 100 меш).

Азот особой чистоты, содержание O не более 0,003%, ГОСТ 9293-74.

Водород из баллона или получаемый из генератора водорода.

Воздух из баллона или нагнетаемый компрессором.

Проявляющие реагенты:

1. Реагент на основе AgNO : 0,5 г AgNO растворяют в 5 мл

3 3

дистиллированной воды, после чего прибавляют 7 мл аммиака и разбавляют

раствор ацетоном до объема 100 мл. Готовят в день употребления. Препараты

проявляются в виде пятен серо-черного цвета.

2. Реагент на основе бромфенолового синего (БФС) и AgNO . Готовят два

раствора: "а" - 0,5% водно-ацетоновый раствор AgNO (1 часть воды и 3 ч.

ацетона) и "б" - 0,05 г БФС растворяют в 10 мл ацетона. Раствор "б"

разбавляют раствором "а" до объема 100 мл. Хранят в темном, прохладном

месте. Для осветления фона пластинки после опрыскивания проявляющей смесью

"б" используют 5% раствор уксусной кислоты или 2% раствор лимонной кислоты.

Релдан проявляется в виде сине-лилового пятна.

Основные стандартные растворы релдана (N 1) и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола (N 2) в ацетоне, 100 мкг/мл. Хранят в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Рабочие стандартные растворы релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола в ацетоне 1, 2, 5 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением из основных стандартных растворов. Хранят в холодильнике 6 дней.

2.3. Приборы и посуда

Хроматограф с термоионным детектором.

Колонка стеклянная (1 м x 3 мм), заполненная SE-30 5% на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм).

Альтернативная стеклянная колонка (1,8 м x 3 мм), заполненная 5% OV-1 на диатомите CZQ (80 - 100 меш).

Аспирационное устройство.

Аппарат для встряхивания АВУ-6с, ТУ 64-1-2451-78.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, с набором колб.

Колбы мерные вместимостью 25 мл, 50 мл, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Стаканы химические вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы конические вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные вместимостью 50 мл ОКШ 50-14/23 ТС, ГОСТ 10394-72.

Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 - 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Микропипетки вместимостью 0,1 мл, ГОСТ 1770-74.

Микрошприцы МШ-10М, ТУ 2-83-106.

Фильтродержатели.

Аллонжи, плотно заполненные пенополиуретановой крошкой.

2.4. Отбор проб

Воздух, содержащий релдан в виде паров и аэрозоля, протягивают со скоростью 1 л/мин. через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель, и последовательно соединенный аллонж с пенополиуретановой крошкой. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 4 л воздуха. Закрытые пробы могут сохраняться в холодильнике до 10 дней.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Подготовка проб к анализу

Бумажные фильтры, содержащие аэрозоль, вынимают из фильтродержателя, измельчают ножницами (до 1 см), помещают в коническую колбу и заливают 25 мл ацетона, закрывают колбу и встряхивают ее на аппарате для встряхивания в течение 30 минут. Сливают растворитель, экстракцию повторяют. Объединенные экстракты переносят в колбу для отгонки растворителей и упаривают на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не более 40 °C до 2 мл. В эту же колбу переносят экстракт, полученный при промывке аллонжа.

Аллонж с пенополиуретановой крошкой промывают смесью н-гексан - ацетон (3:1). Для этого конец аллонжа, который был присоединен со стороны фильтродержателя, опускают в колбу для отгонки растворителей, а к противоположному концу присоединяют на стык воронку и промывают сорбент 40 - 50 мл смеси, собирая экстракт в колбу. Растворитель отгоняют, как описано выше, до 2 - 3 мл. Остаток растворителя отгоняют под вакуумом при комнатной температуре до 0,5 мл и переносят в мерную пробирку со шлифом, ополаскивая колбу н-гексаном. Доводят объем в пробирке до 1 мл.

2.5.2. Условия хроматографического анализа

Детектор - термоионный (ТИД).

Ввод проб в хроматограф через самоуплотняющуюся мембрану.

Неподвижная фаза

SE-30 OV-1

Температура колонки, °C 190 225

Температура испарителя, °C 210 240

Скорость газа-носителя, мл/мин. 23 23

Скорость водорода, мл/мин. 14 - 17 14 - 17

Скорость воздуха, мл/мин. 400 400

Скорость диаграммной ленты, мм/час 240 240

-10

Шкала электрометра 2 x 10

Объем вводимой пробы - 5 мкл

Время удерживания, мин. 4,5 5,8

Линейный диапазон детектирования, нг 0,5 - 10 1 - 15

2.5.3. Условия анализа методом тонкослойной хроматографии

Экстракт после определения методом ГЖХ упаривают до 0,2 - 0,3 мл и количественно наносят при помощи микропипетки на хроматографическую пластинку "Силуфол" так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Пробирку с экстрактом 2 - 3 раза ополаскивают небольшими порциями (0,2 - 0,3 мл) эфира, который также наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см от нее наносят стандартные растворы, содержащие 1, 3, 5 или 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую налита смесь растворителей н-гексан - ацетон (9:1). Время насыщения камеры 30 мин. Край пластинки должен быть погружен в раствор не более чем на 0,5 см. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. Затем пластинку опрыскивают одним из проявляющих реагентов.

1. После обработки реагентом на основе AgNO (N 1) пластинку помещают

под источник УФ-света на 5 минут до появления пятен серо-черного цвета.

Нижний предел обнаружения релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 0,3 мкг.

Величина R релдана 0,52, 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 0,29.

2. После обработки бромфеноловым реагентом пластинку оставляют на 5

мин. на воздухе, а затем опрыскивают раствором 5% уксусной или 2% лимонной

кислоты для осветления фона. Релдан проявляется в виде синего пятна на

желтом фоне. R 0,52, нижний предел обнаружения - 0,5 мкг.

3,5,6-Трихлор-2-пиридинол этим реагентом не обнаруживается.

2.5.4. Обработка результатов анализа

Метод газожидкостной хроматографии

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 5 мкл рабочих стандартных растворов (см. п. 2.3), измеряют высоту пиков и вычисляют среднее арифметическое из 5 определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (5 мкл) конечного экстракта пробы получают слишком большие пики или происходит "зашкаливание", пробу разбавляют н-гексаном. Концентрацию препарата в воздухе в мг/куб. м (X) рассчитывают по формуле:

Y x H x V

X = -------------,

H x V x V

1 1 20

где:

Y - количество препарата в хроматографируемом объеме стандартного

раствора, мкг;

H - высота пика на хроматограмме стандарта, мм;

H - высота пика на хроматограмме пробы, мм;

V - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - хроматографируемый объем пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным

условиям, л.

Метод тонкослойной хроматографии

Количественное определение проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения пятен пробы и того стандарта, площадь пятна которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы. Количество препарата в воздухе в мг/куб. м (X) рассчитывают по формуле:

Y x S

X = --------,

S x V

1 20

где:

Y - количество пестицида в хроматографируемом объеме стандартного

раствора, мкг;

S - площадь пятна на хроматограмме стандарта, кв. мм;

S - площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм;

V - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным

условиям, л.

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР, N 2455-81 от 20.10.81.