Утверждены

Минздравом СССР

3 января 1985 г. N 3195-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ РЕЛДАНА И ПРОДУКТА

ЕГО ГИДРОЛИЗА 3,5,6-ТРИХЛОР-2-ПИРИДИНОЛА В ВОЗДУХЕ

РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

    Краткая  характеристика  препаратов.  Релдан  - O,O-диметил-O-

(3,5,6-трихлорпиридил-2-)тиофосфат.   Брутто-формула C H Cl NPSO .

                                                      7 7  3    3

Молекулярная масса 322,6. Синонимы  - хлорпирифосметил, даурелдан,

петрал.

Релдан - белый кристаллический порошок со слабым запахом меркаптана. Т. пл. 45,5 - 46,5 °C. Растворимость в воде 4 мг/л. Хорошо растворим в ацетоне, ацетонитриле, бензоле, сероуглероде, хлороформе, метиленхлориде, диэтиловом эфире, плохо растворим в алифатических углеводородах и спиртах.

Во влажной атмосфере и воде под действием УФ-света релдан гидролизуется до 3,5,6-трихлор-2-пиридинола и O,O-диметилфосфата.

Летучесть 0,014 мг/куб. м при 0 °C, 0,75 мг/куб. м при 25 °C, 3,1 мг/куб. м при 35 °C. В воздухе может находиться в виде аэрозоля и паров. ОБУВ релдана в воздухе рабочей зоны 0,3 мг/куб. м.

Принцип метода. Методика основана на определении релдана методом газожидкостной и тонкослойной хроматографии. Определение релдана методом ГЖХ проводят на газовом хроматографе, снабженном ТИД. Определение релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола методом ТСХ основано на хроматографировании препаратов в тонком слое силикагеля и обнаружении обоих соединений по реакции с нитратом серебра или обнаружении только релдана по реакции с бромфеноловым реагентом.

Пробы отбирают с концентрированием.

Метрологическая характеристика. Метод ГЖХ. Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,5 нг, в воздухе - 0,02 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха). Диапазон линейной зависимости величины хроматографируемого сигнала от величины количества введенного в хроматограф релдана 0,5 - 10 нг. Диапазон измеряемых концентраций 0,02 - 0,5 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения +/- 15,8%.

Метод ТСХ. При применении реагента на основе нитрата серебра нижний предел измерения релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола 0,3 мкг (0,06 мг/куб. м); при применении реагента на основе бромфенолового синего нижний предел измерения релдана 0,5 мкг (0,1 мг/куб. м). Граница суммарной погрешности измерения релдана +/- 19,7%, 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 20,6%.

Избирательность метода. При определении релдана методом ГЖХ с ТИД на колонке с фазой 5% SE-30 определению может мешать метафос. Для идентификации релдана в присутствии метафоса используется альтернативная колонка (фаза 5% OV-1), на которой время удерживания релдана по отношению ко времени удерживания метафоса равно 0,76.

Сочетание методов ГЖХ и ТСХ также позволяет идентифицировать релдан в присутствии метафоса и других ФОП и ХОП.

Реактивы и растворы. н-Гексан ч. Ацетон ч. Диэтиловый эфир х.ч. Фильтры бумажные "синяя лента". Пенополиуретан (порезанный ножницами до размера частиц 3 - 5 мм), отмытый ацетоном в течение 12 ч в аппарате Сокслета. Нитрат серебра х.ч. Аммиак водный ч.д.а. Бромфеноловый синий (индикатор) ч.д.а. Уксусная кислота х.ч. Лимонная кислота особой чистоты. Безводный сульфат натрия ч.д.а. Пластинки "Силуфол". Неподвижные фазы: 5% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм), 5% OV-1 на диатомите CLQ (80 - 100 меш). Азот особой чистоты. Водород из баллона или получаемый из генератора водорода. Воздух из баллона или нагнетаемый компрессором.

Проявляющие реагенты:

    1) реагент на основе AgNO .  0,5  г  AgNO   растворяют  в 5 мл

                             3               3

дистиллированной  воды,  после  чего  прибавляют  7  мл  аммиака и

доводят объем раствора до 100 мл ацетоном;

    2)  реагент  на  основе бромфенолового синего и AgNO . Готовят

                                                        3

два раствора. Раствор  а - 0,5-процентный водно-ацетоновый раствор

AgNO  (1 часть воды и 3  части   ацетона),   раствор   б  - 0,05 г

    3

бромфенолового  синего  растворяют  в  10  мл  ацетона.  Раствор б

разбавляют   раствором  а  до  объема  100  мл.  Хранят  в  темном

прохладном месте. Для осветления фона пластинки после опрыскивания

проявляющей  смесью  б  используют 5-процентный  раствор  уксусной

кислоты  или  2-процентный  раствор   лимонной   кислоты.   Релдан

проявляется в виде сине-лилового пятна.

Основные стандартные растворы релдана (N 1) и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола (N 2) в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл. Хранят в холодильнике в течение 3 мес.

Рабочие стандартные растворы релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола в ацетоне (1, 2, 5 мкг/мл) готовят соответствующим разбавлением из основных стандартных растворов. Хранят в холодильнике 6 дней.

Приборы и посуда. Хроматограф с ТИД. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм). Альтернативная стеклянная колонка длиной 1,8 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-1 на диатомите CLQ (80 - 100 меш). Аспирационное устройство. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб. Колбы: мерные вместимостью 25, 50, 100 мл; грушевидные вместимостью 50 мл. Стаканы химические вместимостью 50, 100 мл. Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 - 10 мл. Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл. Микропипетки вместимостью 0,1 мл. Микрошприцы МШ-10М. Фильтродержатели. Аллонжи, плотно заполненные пенополиуретановой крошкой.

Отбор проб. Воздух, содержащий релдан в виде паров и аэрозоля, протягивают со скоростью 1 л/мин. через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель, и последовательно соединенный с фильтродержателем аллонж с пенополиуретановой крошкой. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 4 л воздуха. Закрытые пробы могут сохраняться в холодильнике до 10 дней.

Ход анализа. Подготовка проб к анализу. Бумажные фильтры, содержащие аэрозоль, вынимают из фильтродержателя, измельчают ножницами (до размера частиц 1 см), помещают в коническую колбу и заливают 25 мл ацетона, закрывают колбу и встряхивают ее на аппарате для встряхивания 30 мин. Сливают растворитель, экстракцию повторяют. Объединенные экстракты переносят в колбу для отгонки растворителей и упаривают на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не более 40 °C до 2 мл. В эту же колбу переносят экстракт, полученный от промывки аллонжа. Аллонж с пенополиуретановой крошкой промывают смесью н-гексана с ацетоном (3:1). Для этого конец аллонжа, который был присоединен со стороны фильтродержателя, опускают в колбу для отгонки растворителей, а к противоположному концу присоединяют встык воронку и промывают сорбент 40 - 50 мл смеси, собирая экстракт в колбу. Растворитель отгоняют, как описано выше, до 2 - 3 мл. Остаток растворителя отгоняют под вакуумом при комнатной температуре до 0,5 мл и переносят в мерную пробирку со шлифом, ополаскивая колбу н-гексаном. Доводят объем в пробирке до 1 мл.

    Условия газохроматографического анализа. Используют ТИД. Пробы

вводят через самоуплотняющуюся мембрану. Скорость потока, мл/мин.:

газа-носителя  -  23,  водорода - 14 - 17, воздуха - 400. Скорость

                                                               -10

движения  диаграммной ленты 240 мм/ч. Шкала электрометра 2 x 10

А. Объем вводимой пробы 5 мкл.

При использовании в качестве неподвижной фазы 5% SE-30 температура колонки 190 °C, испарителя - 210 °C, линейный диапазон детектирования 0,5 - 10 нг, время удерживания 4 мин. 30 с. При использовании в качестве неподвижной фазы 5% OV-1 температура колонки 225 °C, испарителя - 240 °C, линейный диапазон детектирования 1 - 15 нг, время удерживания 5 мин. 48 с.

Условия анализа методом тонкослойной хроматографии. Экстракт после определения методом ГЖХ упаривают до 0,2 - 0,3 мл и количественно наносят при помощи микропипетки на хроматографическую пластинку "Силуфол" так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Пробирку с экстрактом 2 - 3 раза ополаскивают небольшими порциями (по 0,2 - 0,3 мл) эфира, который также наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см от нее наносят стандартные растворы, содержащие 1, 3, 5 или 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую налита смесь н-гексана с ацетоном (9:1). Время насыщения камер 30 мин. Край пластинки должен быть погружен в раствор не глубже чем на 0,5 см. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. Затем пластинку опрыскивают одним из проявляющих реагентов.

    После  обработки  реагентом  на  основе  AgNO  (N 1) пластинку

                                                 3

помещают под источник УФ-света  на 5 мин. до появления пятен серо-

черного   цвета.    Нижний    предел    обнаружения    релдана   и

3,5,6-трихлор-2-пиридинола 0,3 мкг. Величина R  релдана составляет

                                              f

0,52, 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 0,29.

    После обработки бромфеноловым реагентом пластинку оставляют на

5  мин.  на  воздухе,  а  затем опрыскивают раствором 5-процентной

уксусной  или  2-процентной  лимонной кислоты для осветления фона.

Релдан проявляется в виде синего пятна на желтом фоне. Величина R

                                                                 f

равна     0,52,      нижний     предел     обнаружения    0,5 мкг;

3,5,6-трихлор-2-пиридинол этим реагентом не обнаруживается.

Обработка результатов анализа. При использовании метода ГЖХ количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 5 мкл рабочих стандартных растворов, измеряют высоту пиков и вычисляют среднее арифметическое из пяти определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (5 мкл) конечного экстракта пробы получают слишком большие пики или происходит "зашкаливание", пробу разбавляют н-гексаном.

Количественное определение при использовании метода ТСХ проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения площади пятна пробы и того стандарта, площадь пятна которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы.

Концентрацию препарата в пробе (X, мг/куб. м) рассчитывают по формуле:

                               GH V

                                 1 2

                          X = -------,

                              H V V

                               2 1 20

    где:

    G  -   количество   препарата   в   хроматографируемом  объеме

стандарта, нг;

    H  - высота пика (или площадь пятна) на  хроматограмме  пробы,

     1

мм (кв. мм);

    H  -  высота  пика  (или  площадь  пятна)   на   хроматограмме

     2

стандарта, мм (кв. мм);

    V  - хроматографируемый объем пробы, мкл;

     1

    V  - общий объем анализируемого раствора, мл;

     2

    V   - объем воздуха, отобранный для  анализа  и  приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

Требования безопасности. Следует соблюдать правила безопасности при работе в химических лабораториях.