Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

3 января 1985 г. N 3190-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТИЛТА В РАСТЕНИЯХ, ПОЧВЕ, ВОДЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика препарата

1.1. Тилт

1.2. 1-2-(2,4-дихлорфенил)-4-пропил-1,3-диоксолан-2-ил-метил/-1Н-1,2,4-триазол

1.3. Структурная формула.

              Cl

         ___ /    CH   N____

         ---     /  2\ /────│

    Cl-/     \--C     N     │

       \\   // / \     \____│

         ---  O   O     ----N

              │   │

              └───┘

                   \

                    C H

                     3 7

    1.4. ЦГА 64250

    1.5.  Желтоватая  вязкая жидкость, температура кипения - 180 °С при 0,1

мм   рт.   ст.   Растворим   в   большинстве   органических  растворителей.

Растворимость в воде при 20 °С - 110 мг/л. Молекулярная масса - 342,2. ЛД

                                                                         50

орально для крыс - 1517 мг/кг, накожно - 4000 мг/кг.

2. Методика определения тилта

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении тилта из анализируемой пробы органическим растворителем: из воды - хлороформом, из почвы - смесью ацетона с 0,05 н водным раствором хлористого кальция (1:1), из растительных объектов - смесью ацетона с водой (1:1); для очистки растительных и почвенных проб используют перераспределение между двумя несмешивающимися растворителями. Количественное определение проводится методом газожидкостной хроматографии.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Минимально детектируемое количество - 0,2 нг.

Нижний предел определения, мг/кг:

вода - 0,005

почва - 0,01

растения - 0,015.

Размах варьирования, %:

вода - 85 - 95

почва - 80 - 92

растения - 78 - 95.

Среднее значение определения, %:

вода - 90,0

почва - 86,0

растения - 87,0.

Стандартное отклонение, %:

вода - 2,4

почва - 3,6

растения - 5,0.

Доверительный интервал среднего при Р = 0,95; n = 5:

вода - 90,0 +/- 2,4

почва - 86,0 +/- 3,6

растения - 87,0 +/- 5,0.

2.1.3. Избирательность метода

Метод специфичен. Хлорорганические пестициды при данных условиях хроматографирования определению не мешают.

2.2. Реактивы и растворы

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79

н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78

Натрий сернокислый безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76

Кальций хлористый, х.ч., ГОСТ 4162-77

Натрий хлористый, х.ч., ГОСТ 4233-77

Хроматон N-AW (0,125 - 0,160 мм) с 5% SE-30

Стандартный раствор тилта в гексане с содержанием 1 мкг/мл, срок хранения его в холодильнике - 1 месяц

Азот особой чистоты в баллонах, ГОСТ 9293-74

2.3. Посуда и приборы

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ-64-11081-83

Воронки делительные ВД-3-25 Р, ГОСТ 8613-75

Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74

Воронки химические, ГОСТ 8613-75

Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР)

Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ 2-833-106

Колонка хроматографическая стеклянная 1000 х 3 мм

Вата гигроскопическая, ГОСТ 5556-75

Бумажные фильтры, ТУ 6-08-1678-77

Холодильник бытовой

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Подготовка хроматографической колонки

Стеклянную колонку 1000 х 3 мм, промытую органическими растворителями (ацетон - этиловый спирт - петролейный эфир - 1:1:1 - залить колонку на 1 час, затем пропустить через нее 300 мл ацетона), высушенную в токе азота, заполняют с помощью вакуумного насоса готовой набивкой - хроматоном N-AW с 5% SE-30. Колонку кондиционируют при 270 °С в течение 8 часов, скорость азота - 30 - 40 мл/мин.

2.4.2. Отбор и подготовка проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными Заместителем Главного санитарного государственного врача СССР 21.08.1979, N 2051-79.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Экстракция тилта из проб

Вода. 500 мл воды помещают в делительную воронку, добавляют 10 г хлористого натрия, хорошо перемешивают и экстрагируют хлороформом трижды по 50 мл. Пропускают экстракт через слой сульфата натрия и упаривают при температуре бани не выше 50 °С под вакуумом не досуха, затем на воздухе досуха. Остаток в колбе растворяют в 1 мл гексана и хроматографируют.

Растения и почва. Растительную пробу измельчают и отбирают среднюю пробу массой 20 г, помещают в стеклянную колбу, заливают 100 мл смеси ацетона с водой (1:1). Из пробы почвы массой 20 г тилт экстрагируют 50 мл смеси ацетона с 0,05 н водным раствором хлористого кальция (1:1). Пробы в течение 1 часа встряхивают на аппарате для встряхивания. Колбы с экстрактом помещают в морозильную камеру бытового холодильника на 1 час. Затем экстракт фильтруют через вату в коническую колбу. Экстракцию проводят трижды. Из объединенных экстрактов препарат переэкстрагируют в н-гексан 25 - 30 мл трижды. Гексановые фракции фильтруют через безводный сернокислый натрий в круглодонную колбу, концентрируют под вакуумом при температуре не выше 40 °С до 10 мл. Аликвоту в количестве 1 - 3 мкл вводят в хроматограф.

2.5.2. Условия хроматографирования

Хроматограф "Цвет-106" или аналогичный прибор с детектором по захвату электронов (ДЭЗ) или постоянной скорости рекомбинации (ДПР).

Температура колонки - 240 °С, испарителя - 240 °С, детектора - 260 °С.

Скорость газа-носителя (азота) - 40 мл/мин.

Хроматографическая колонка - стеклянная, размером 1000 х 3 мм, заполненная хроматоном N-AW (0,125 - 0,160 мм) с 5% SE-30.

Линейность детектирования - 0,5 - 10 нг.

Время удерживания - 2 мин. 40 сек.

2.6. Обработка результатов

Содержание препарата в пробе определяют методом соотношения со стандартом по высоте пиков по формуле:

                             Н   х V   х С   х V

                              пр    ст    ст

                         С = -------------------,

                                Н   х V  х Р

                                 ст    a

    где:

    С - количество препарата в пробе, мг/кг или мг/л;

    С   - количество препарата в стандартном растворе, мкг/мл;

     ст

    Н   - высота пика стандарта, мм;

     ст

    Н   - высота пика анализируемой пробы, мм;

     пр

    V   - объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, мкл;

     ст

    V  - объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф, мкл;

     a

    V - объем экстракта анализируемой пробы, мл;

    Р - навеска пробы, г.

3. Требования безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила предосторожности, необходимые при работе с ядовитыми, взрывоопасными и легковоспламеняющимися веществами.

4. Разработчики

Петрова Т.М., Блинова Т.Ф., Красникова Н.Г., ВИЗР, г. Ленинград.