Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

27 ноября 1984 г. N 3164-84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М В ЯБЛОКАХ, ПЕРСИКАХ,

ФЕЙХОА И ХУРМЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

(Дополнение к N 1760-77)

1. Краткая характеристика препарата

Топсин-М, топсин ИФ-44.

Действующее вещество - метилтиофанат - 1,2-бис(3-карбометоксилурендо)бензол.

             S     O

             ││    ││

     / \\-NH-C -NH-C -OCH

    ││  │                3                       Мол. масса 342,4.

     \ //-NH-C -NH-C -OCH

             ││    ││    2                       C  H  O N S .

             S     O                              12 14 4 4 2

    Чистый  фунгицид - белый порошок с температурой плавления 177 - 178 °C,

плавится   с  разложением.  Хорошо  растворим  в  хлороформе,  этилацетате,

ацетоне, низкомолекулярных спиртах, мало растворим в воде.

    Медленно  гидролизуется  в  щелочной среде. При метаболизме и гидролизе

образуется   системный   фунгицид   ВМК.  Топсин-М   выпускается  в   форме

70-процентного с.п. ЛД   для крыс - 6600 мг/кг.

                      50

МДУ в персиках - 1,0 мг/кг; яблоках - 0,5 мг/кг, в фейхоа и хурме содержание метилтиофаната не нормировано.

2. Методика определения метилтиофаната

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на определении фунгицида методом ТСХ после извлечения из растительной пробы хлороформом и очистки экстракта путем перераспределения в системе водный этанол - хлороформ.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

┌─────────────────────┬───────────────────────────────────────────────────┐

│   Метрологические   │               Анализируемый объект                │

│      параметры      ├────────────┬────────────┬────────────┬────────────┤

│                     │   яблоки   │  персики   │   фейхоа   │   хурма    │

├─────────────────────┼────────────┼────────────┼────────────┼────────────┤

│1. Предел            │0,08        │0,08        │0,06        │0,07        │

│обнаружения, мг/кг   │            │            │            │            │

│2. Число параллельных│6           │6           │6           │6           │

│определений          │            │            │            │            │

│3. Среднее значение  │78,2        │80,2        │85,5        │83,8        │

│определения, %       │            │            │            │            │

│4. Стандартное       │8,9         │8,2         │7,9         │8,0         │

│отклонение, %        │            │            │            │            │

│5. Доверительный     │78,2 +/- 9,3│80,2 +/- 8,6│85,5 +/- 8,3│89,8 +/- 8,4│

│интервал среднего    │            │            │            │            │

│при альфа = 0,95%    │            │            │            │            │

└─────────────────────┴────────────┴────────────┴────────────┴────────────┘

2.1.3. Избирательность метода

Метод специфичен. Определению метилтиофаната не мешают другие фунгициды, применяемые в сельском хозяйстве для защиты субтропических плодовых культур.

2.2. Реактивы и материалы

Хлороформ, ГОСТ 2603-71, хч.

Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Этилацетат ч, ГОСТ 22300-76.

Ацетон осч, ТУ 6-09-3513-82.

Натрий сернокислый безводный чда, ГОСТ 4166-76.

Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.

Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-13-70.

Спирт этиловый, ТУ 6-09-17-10-77, 96%.

Кислота уксусная ледяная хч, ГОСТ 61-75.

Бумага фильтровальная, ТУ 6-09-1678-77.

    Пластинки "Силуфол - UV   " или "Силуфол".

                           254

Вата обезжиренная гигроскопическая.

Вода дистиллированная.

Проявляющий реактив: 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 22,5 мл дистиллированной воды, доводят до 100 мл ацетоном и добавляют в раствор 0,05 г бромфенолового синего.

Стандартный раствор метилтиофаната в хлороформе (100 мкг/мл).

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Испаритель ротационный ИР-1, ТУ 25-11-917-74.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.

Камера для опрыскивания хроматографических пластинок.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Воронки делительные емкостью 150 мл, ГОСТ 8613-72.

Колбы лабораторные конические емкостью 250 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы круглодонные для отгонки растворителей емкостью 100 и 250 мл, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические емкостью 150 мл, ГОСТ 8613-75.

Пипетки емкостью 0,1, 1, 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-2451-72.

Мерные цилиндры емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Шприц медицинский стеклянный емкостью 1 мл.

Хроматоскоп.

2.4. Отбор проб

Пробы для анализа отбираются в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР за N 2051-79, 21.08.1979.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Экстракция и очистка экстрактов

Навеску пробы 25 г тщательно измельчают, заливают 50 мл хлороформа и экстрагируют в течение 30 минут на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют через обезжиренную вату в колбу перегонного аппарата емкостью 250 мл, в остаток добавляют 25 мл хлороформа и встряхивают еще раз в течение 15 минут. Экстракты объединяют и отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C досуха. Остаток тщательно растворяют в 0,40 - 0,45 мл хлороформа, затем в колбу вносят 5 мл охлажденного 60-процентного этилового спирта и перемешивают содержимое. Пробу фильтруют через смоченный водой фильтр в делительную воронку, а остаток в колбе последовательно промывают 3 мл 60-процентного этилового спирта, 10 мл дистиллированной воды и переносят через фильтр в ту же делительную воронку. В пробу добавляют 12 мл воды, 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают в течение 3 минут. После разделения фаз (10 минут) хлороформенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, переносят его в колбу перегонного аппарата емкостью 100 мл и отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C до 1 мл.

2.5.2. Хроматографирование

    1/5   часть   пробы   наносят   медицинским   стеклянным   шприцем   на

хроматографическую  пластинку  "Силуфол"  или  "Силуфол  - UV   ". Слева  и

                                                             254

справа  наносят  стандартные  растворы  метилтиофаната и хроматографируют в

системе растворителей н-гексан - этилацетат - ацетон в объемном соотношении

7:4:4,  R   метилтиофаната  -  0,70  +/- 0,03.  Можно  использовать систему

         f

хлороформ - этилацетат - ледяная  уксусная  кислота в объемном  соотношении

50:50:10, R  метилтиофаната - 0,85 +/- 0,03, R  БМК - 0,38 +/- 0,02.

           f                                  f

    После  высушивания  пластинок  на  воздухе  обнаружение  метилтиофаната

проводят проявляющим реактивом и через минуту обесцвечивают фон пластинки 5

мл  уксусной кислоты.  Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,3

-  5,0  мкг. Метилтиофанат проявляется в виде сиреневых, БМК - в виде синих

пятен.   Обнаружение   метилтиофаната   можно   проводить  в  УФ-свете  при

использовании  пластинок  "Силуфол  -  UV   ".  Зоны локализации пестицидов

                                         254

проявляются   в   виде   сиреневых   пятен.   Нижний   предел   обнаружений

метилтиофаната составляет 1,0 мкг.

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение метилтиофаната проводят сравнением размеров площадей и интенсивности окраски пятен исследуемого вещества в пробе и стандартного раствора. Содержание анализируемого соединения в плодах вычисляют по формуле:

                             A x P  x 100

                                  2

                         X = ------------ мг/кг,

                              P  x M x D

                               1

    где:

    A - количество метилтиофаната в стандартном растворе, мкг;

    P  - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;

     1

    P  - площадь пятна пробы, кв. мм;

     2

M - масса исследуемой пробы, г;

D - процент определения.

2.7. Требования безопасности

Соблюдаются общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами (ядохимикатами).