"Методические указания по хроматографическому измерению концентрации анометрина-Н в воздухе рабочей зоны" // Технорма.RU

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

27 ноября 1984 г. N 3154-84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ

АНОМЕТРИНА-Н В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

I. Краткая характеристика препарата

Анометрин-Н - отечественный препарат из группы синтетических пиретроидов. Растворим в большинстве органических растворителей.

CH CH

3\ / 3

/\ Мол. масса 391,2.

H----------H O

/ \ // \/ \// \

Cl C=CH C -O-CH ──│ ││ │ ││

2 ││ 2 \\ / \\ /

3-феноксибенолл-2,2-диметил-3-(2,2-дихлорвизил)-циклопропанкарбоксилат.

При применении может находиться в виде аэрозоля.

I. Характеристика метода

1. Определение основано на хроматографировании анометрина-Н на неподвижной фазе SE-30 с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) или в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препарата путем обработки раствором нитрата серебра.

2. Отбор проб проводится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента" или стеклянный фильтр с пористой пластиной).

3. Предел измерения в анализируемом объеме пробы: ГЖХ - 3 нг, ТСХ - 3 мкг.

4. Предел измерения в воздухе (при отборе 40 л воздуха):

ГЖХ - 0,05 мг/куб. м, ТСХ - 0,1 мг/куб. м.

5. Диапазон измеряемых концентраций: ГЖХ - 0,05 - 0,5 мг/куб. м, ТСХ - 0,1 - 0,5 мг/куб. м.

6. Определению не мешают наполнители технического препарата, хлор-, фосфорорганические пестициды.

7. Границы суммарной погрешности: ГЖХ - +/- 13,8%, ТСХ - +/- 20%.

8. ОБУВ - 0,3 мг/куб. м.

II. Реактивы, растворы, материалы

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

Гептан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Диэтиловый эфир хч, ГОСТ 6262-79.

Сульфат натрия безводный свежепрокаленный, ГОСТ 4166-76.

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.

Аммиак 25% водный, ГОСТ 3760-79.

Нитрат серебра, ГОСТ 1277-81, хч.

Пластинки "Силуфол" (ЧССР).

Подвижная фаза - гексан - ацетон (95:5).

Проявляющий реагент: 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят объем до 100 мл ацетоном. Хранят в темном месте. Для обработки 1 пластинки берут 7 - 10 мл раствора.

Стандартный раствор анометрина-Н N 1, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл гексана. Хранят в холодильнике не более 2 месяцев.

К методу ГЖХ:

Неподвижная фаза - 5% SE-30, нанесенная на Хроматом N-AW (0,16 - 0,20 мм).

Азот газообразный особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Стандартный раствор N 2. Для приготовления раствора с концентрацией 2 мкг/мл вносят 5 мл раствора N 1 в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки гексаном. Хранят в холодильнике не более 2-х недель.

III. Приборы и посуда

Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.

Фильтродержатели.

Стеклянный фильтр с пористой пластиной (фильтр Шотта) N 2 (40 мк).

Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей.

Водяная баня, ТУ 46-22-608-75.

Колбы конические емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические, диаметр 6 см, ГОСТ 8613-75.

Колбы мерные на 25, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

К методу ТСХ:

Пластинки для хроматографии "Силуфол" (ЧССР).

Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-74.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

К методу ГЖХ:

Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) или с детектором по захвату электронов (ДЗЭ) (марки "Цвет", "Газохром" или др.).

Микрошприцы на 10 мкл.

Колонка стеклянная, длина 0,5 м, диаметр 3 мм.

Секундомер.

IV. Условия отбора проб воздуха

Воздух со скоростью 2 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр "синяя лента" (или стеклянный фильтр Шотта) в течение 20 мин. Длительность хранения пробы в холодильнике не более 2-х суток.

V. Условия анализа

Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 30 мл смеси гексан - ацетон (9:1). Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 30 мин. Экстракт сушат безводным сульфатом натрия, сливают в колбу ротационного испарителя и концентрируют до объема ~ 0,1 - 0,2 мл при температуре бани не выше 50 °C. Досуха испаряют на воздухе. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и проводят определение методами ГЖХ и ТСХ.

Если для поглощения аэрозоля использован стеклянный фильтр с пористой пластиной, то поверхность фильтра смывают дважды по 20 мл смеси гексан - ацетон (9:1), тщательно обмывая стенки фильтра. Сливают экстракт через слой сульфата натрия в колбу для отгонки растворителей. Концентрируют так, как описано выше, и далее проводят определение методами ТСХ и ГЖХ.

Определение методом ГЖХ

Детектор постоянной скорости рекомбинации.

Колонка стеклянная 0,5 м, внутренний диаметр - 3 мм.

Твердый носитель - Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм).

Жидкая фаза - 5% SE-30.

Температура термостата колонки 220 °C.

Температура испарителя 230 °C.

Температура термостата детектора 250 °C.

Газ-носитель - азот особой чистоты.

Скорость азота 70 мл/мин.

Скорость диаграммной ленты 240 мм/час.

Объем вводимой пробы 5 мкл.

-12

Шкала 20 x 10 А.

Линейный диапазон детектирования - 2 - 15 нг.

Время удерживания - 2,72 мин.

Количественное определение препарата проводят по методу абсолютной калибровки.

Концентрацию препарата (X) в воздухе в мг/куб. м рассчитывают по формуле:

G x V x S

1 пр

X = -------------,

S x V x V

ст 20

где:

G - количество препарата во введенном в хроматограф стандартном

растворе, мкг;

S - площадь пика стандартного раствора препарата, введенного в

ст

хроматограф, кв. мм;

S - площадь пика препарата в используемом растворе пробы, кв. мм;

пр

V - общий объем пробы, мл;

V - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

условиям, л.

Определение методом ТСХ

Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 - 0,3 мл, количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают порциями диэтилового эфира, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов пестицида, содержащих 2 мкг, 3 мкг, 10 мкг препарата.

Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую

камеру, в которую за 30 мин. до хроматографирования налита смесь

гептан - ацетон (98:2). После хроматографирования пластинку высушивают на

воздухе, после чего обрабатывают из пульверизатора проявляющим реагентом,

подсушивают и подвергают УФ-облучению в течение 15 - 20 мин. Анометрин-Н

проявляется в виде двух пятен (цис- и трансизомеры) серо-черного цвета.

Величины R - 0,33 и 0,45.

Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартного раствора. Строится градуировочный график зависимости площади от количества препарата в мкг и интенсивности окраски пятна. Прямолинейная зависимость между площадью и интенсивностью окрашивания пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 2 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (10 мкг), то для хроматографирования необходимо брать аликвотную часть экстракта (0,1, 0,2 мл и т.д.) параллельной пробы.

Концентрацию препарата (Х) в воздухе в мг/куб. м рассчитывают по формуле:

G x V

X = -------,

V x V

где:

X - количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме пробы,

мкг;

V - общий объем пробы, мл;

V - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным

условиям, л.

VI. Требования безопасности

Выполняются в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР", N 2455-81 от 20.10.81.