Утверждены

Минздравом СССР

27 апреля 1984 г. N 3011-84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕВРИНОЛА В ПОЧВЕ, РАСТЕНИЯХ И

ЭФИРНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны Ю.С. Барановым, Л.А. Хилик (ВНИИЭМК).

    Краткая  характеристика  препарата.   Действующее  начало   девринола -

альфа(нафтил-1-окси)пропионовой    кислоты    диэтиламид.    Брутто-формула

C  H  NO .  Молекулярная  масса 271,4.  Общепринятое название - напропамид,

 17 21  2

торговое название - дэпра.  В чистом виде розовый кристаллический порошок с

т. пл. 69 °C. Растворимость в воде 70 мг/л при 20 °C, хорошо растворяется в

                                                                       -3

ацетоне,  этаноле,  хлороформе.  Давление  насыщенного  пара   1,2 x 10   -

        -4

5,3 x 10   Па. Выпускается в виде смачивающегося порошка.

Принцип метода. Метод основан на извлечении девринола из растений, почвы ацетоном, очистке экстрактов - перераспределением в системе двух несмешивающихся жидкостей, дополнительной очистке растительных экстрактов на колонке с оксидом алюминия и газохроматографическом определении с помощью ТИД. Из эфирных масел препарат извлекают диметилсульфоксидом, промывают н-гексаном и определяют газожидкостной хроматографией.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество 1,0 нг. Остальные параметры приведены в таблице 67.

Таблица 67

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕВРИНОЛА

┌────────────────────────────────────────┬────────────────────────────────┐

│               Параметры                │      Анализируемый объект      │

│                                        ├────────┬──────────────┬────────┤

│                                        │ почва  │эфиромасличные│эфирные │

│                                        │        │   растения   │ масла  │

│                                        │        │              │        │

├────────────────────────────────────────┼────────┼──────────────┼────────┤

│Нижний предел определения, мг/кг        │0,02    │0,04          │0,2     │

│Среднее значение определения, %         │88,8    │88,7          │83,8    │

│Относительное стандартное отклонение    │5,3     │3,8           │5,0     │

│Доверительный интервал среднего         │+/- 14,7│+/- 10,6      │+/- 13,8│

│(p = 0,95, n = 5), %                    │        │              │        │

└────────────────────────────────────────┴────────┴──────────────┴────────┘

Избирательность метода. Метод селективен. Прочие пестициды, используемые на плантациях лаванды и мяты, определению не мешают.

Реактивы и растворы. Диметилсульфоксид х.ч. Ацетон особой чистоты. н-Гексан ч., свежеперегнанный. Ацетонитрил ч. Оксид алюминия для хроматографии, ч., II степени активности. Сульфат натрия безводный х.ч. Диэтиловый эфир (для наркоза). Хроматон N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% XE-60. Хроматон N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30.

Стандартные растворы девринола в ацетоне с содержанием 100 (раствор N 1), 10 мкг/мл (раствор N 2). Растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 мес.

Приборы и посуда. Хроматограф с ТИД. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Делительные воронки на 250 и 500 мл. Колбы: плоскодонные, конические на 250 мл; круглодонные на 100 мл; мерные на 100 мл. Цилиндры мерные на 100 мл. Микрошприцы на 1 и 10 мкл. Пипетки на 1 и 10 мл. Колонки для хроматографии размером 100 x 15 мм.

Подготовка к определению. Органические растворители (ацетон, н-гексан) перед началом работы необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 - 400 °C. Хроматографическую колонку и детектор кондиционируют в режимных условиях в течение 2 ч.

Отбор проб. Для анализа отбирают среднюю пробу почвы массой 100 г, растений эфиромасличных культур - 50 г, эфирного масла - 10 г.

Ход анализа. Экстракция. Пробу измельченной и просеянной через сито почвы (100 г) помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и экстрагируют в течение 1 ч с помощью механического встряхивателя, оставляют на ночь. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в плоскодонную колбу на 250 мл. Остаток на фильтрате дважды промывают ацетоном порциями по 30 мл. Фильтрат упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 50 °C до объема 10 мл. Остаток количественно переносят в делительную воронку на 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют девринол н-гексаном трижды порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат, пропуская через 35 г безводного сульфата натрия, и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл ацетона, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора.

Свежесрезанные эфиромасличные растения (массой 50 г) гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 - 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 - 40 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. Стакан гомогенизатора трижды промывают ацетоном порциями по 20 мл и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Упаривают ацетон на ротационном вакуумном испарителе до 10 мл при температуре бани 50 °C. Остаток количественно с 50 мл ацетонитрила переносят в делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана. Встряхивают 1 - 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию проводят еще дважды. Нижний слой переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 250 мл 10-процентного сульфата натрия и трижды реэкстрагируют девринол н-гексаном порциями по 50 мл. Собирают верхний слой, объединяют, высушивают, пропуская через безводный сульфат натрия, и упаривают до 5 мл на ротационном испарителе. Остаток переносят на колонку с 6 г оксида алюминия, промытую 12 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). После того как раствор полностью впитается в слой сорбента, отгонную колбу смывают 5 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1) и переносят на колонку. Операцию повторяют 3 раза. Девринол элюируют 100 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). Элюат упаривают на ротационном испарителе досуха. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.

Навеску эфирного масла мяты, лаванды, шалфея (10 г) помещают в делительную воронку на 250 мл с 50 мл диметилсульфоксида и выдерживают 20 мин. для растворения. Прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивают 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию повторяют еще дважды. Оставшийся раствор переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 200 мл 10-процентного сульфата натрия, предварительно насыщенного 15 мл серного эфира, и реэкстрагируют девринол серным эфиром трижды порциями по 30 мл. Объединенные экстракты собирают, сушат, пропуская через безводный сульфат натрия, и концентрируют досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани 30 °C. К сухому остатку прибавляют 1 мл ацетона, встряхивают и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.

    Условия  хроматографирования.  Используют стеклянные колонки спиральной

формы  длиной  1 м  с  внутренним  диаметром  3  мм.  Расход  газа-носителя

40  мл/мин.;   водорода - 16;   воздуха - 400  мл/мин.   Температура  (°C):

испарителя - 230, термостата колонок - 190. Хроматографируемый объем 2 мкл.

Линейный  динамический  диапазон  1 - 1000 нг.  Рабочая шкала  электрометра

        -12

100 x 10    А.  Время  удерживания  девринола  на SE-30 8 мин.,  на XE-60 -

11 мин.

Обработка результатов анализа. Содержание препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

                                    HV

                                      1

                                X = ----,

                                    KV P

                                      2

    где:

    H - высота пика препарата и анализируемой пробе, мм;

    V  - объем анализируемой пробы, мл;

     1

    V  - объем инъектируемой пробы, мкл;

     2

    P - масса навески, г;

    K - калибровочный коэффициент, определяемый по формуле:

                             H     H           H

                          1   1     2           n

                      K = - (--- + --- + ... + ---),

                          n  CV    CV          CV

                               1     2           n

    где:

    H , H , H  - высоты пиков стандартного раствора девринола, мм;

     1   2   n

    V , V , V   -  объемы  стандартного   раствора  девринола,  вводимые  в

     1   2   n

хроматограф, мкл;

    C - концентрация стандартного раствора (10 мкг/мл).

Содержание микроколичеств девринола в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

Требования безопасности. Следует руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего класса опасности (девринол), а также с легколетучими растворителями.